腸道多重耐藥細(xì)菌感染動(dòng)物模型的建立及益生菌干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究
本文關(guān)鍵詞:腸道多重耐藥細(xì)菌感染動(dòng)物模型的建立及益生菌干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:通過(guò)建立小鼠腸道多重耐藥細(xì)菌感染模型,研究益生菌對(duì)多重耐藥銅綠假單胞菌感染小鼠結(jié)腸屏障功能的保護(hù)作用及致病菌本身耐藥性質(zhì)的變化,為控制和治療因耐藥菌引起的感染奠定基礎(chǔ)。 方法:1.將6周齡雄性BALB/C小鼠隨機(jī)分成4組:對(duì)照組、MDR-PA組、MDR-PA+抗生素組和MDR-PA+禁食組。 2.采用MDR-PA+抗生素組小鼠模型,將8周齡雄性小鼠分組:對(duì)照組、MDR-PA組、MDR-PA+LP組和LP組。 3.方法1和方法2均記錄各組小鼠精神狀態(tài)、糞便及體重變化;實(shí)驗(yàn)結(jié)束后取回盲部?jī)?nèi)容物行細(xì)菌培養(yǎng)+藥敏,結(jié)腸組織行病理學(xué)觀察、炎癥評(píng)分、TNF-a和INF-y濃度檢測(cè)。方法2中小鼠結(jié)腸再行通透性、TER及緊密連接蛋白表達(dá)檢測(cè)。 4.采用黏附實(shí)驗(yàn)和侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)益生菌拮抗銅綠假單胞菌粘附與侵襲Caco-2細(xì)胞的作用;多重耐藥銅綠假單胞菌誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn),行流式細(xì)胞術(shù)分析;細(xì)菌培養(yǎng)+藥敏,檢測(cè)細(xì)菌耐藥性質(zhì)的變化。 結(jié)果:1.經(jīng)過(guò)處理的三組小鼠較對(duì)照組均出現(xiàn)炎癥因子TNF-a和]NF-γ的濃度明顯升高和光鏡下出現(xiàn)炎癥病變,但MDR-PA+抗生素組的小鼠的炎癥因子和炎癥評(píng)分較另外兩組明顯升高;鏡下觀察MDR-PA+抗生素組的炎癥病變較其余兩組嚴(yán)重。 2.MDR-PA組小鼠結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞旁路的通透性存在異常增加,伴有緊密連接相關(guān)蛋白ZO-1、occludin、和claudin-1表達(dá)降低和異常分布。炎癥因子TNF-a和IINF-γ濃度增高。LP干擾后,小鼠結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞旁路的通透性降低,緊密連接相關(guān)蛋白ZO-1、occludin、和claudin-1表達(dá)分布接近正常,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。炎癥因子TNF-α和INF-γ濃度減少接近正常,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 3.益生菌呈劑量依賴的方式抑制MDR-PA黏附和侵襲Caco-2細(xì)胞,當(dāng)益生菌劑量為109CFU時(shí),MDR-PA侵襲力下降了86%。流式細(xì)胞儀檢測(cè)發(fā)現(xiàn),MDR-PA可誘導(dǎo)腸上皮細(xì)胞凋亡,隨著MDR-PA劑量的增加腸上皮細(xì)胞凋亡率逐漸升高;LP可有效抑制MDR-PA對(duì)Caco-2細(xì)胞誘導(dǎo)凋亡,且黏附抑制法較競(jìng)爭(zhēng)性排斥法的抑制效果更明顯。 4.益生菌干預(yù)后,銅綠假單胞菌的美羅培南(MEM10ug)和哌拉西林/他唑巴坦(TZP110)或氨曲南(ATM-30)和頭孢他啶(CAZ-30)的藥敏直徑均較MDR-PA組直徑增大,但均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論:1.三種方法均可成功建立腸道多重耐藥細(xì)菌感染動(dòng)物模型,各模型間有其不同特點(diǎn)。 2.益生菌可以治療小鼠腸道多重耐藥銅綠假單胞菌感染引起的腹瀉,保護(hù)腸道屏障功能。 3.益生菌可以抑制銅綠假單胞菌株黏附和侵襲腸上皮細(xì)胞。 4.益生菌可以減弱多重耐藥銅綠假單胞菌的耐藥性質(zhì),但未達(dá)到有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的程度。
【關(guān)鍵詞】:益生菌 植物乳酸桿菌 多重耐藥 銅綠假單胞菌 腸屏障
【學(xué)位授予單位】:蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R446.5;R-332
【目錄】:
- 摘要4-6
- Abstract6-11
- 引言11-14
- 第一部分 建立多重耐藥銅綠假單胞菌腸道干染動(dòng)物模型的比較和評(píng)價(jià)14-25
- 1 材料和方法14-19
- 2 結(jié)果19-22
- 3 討論22-25
- 第二部分 益生菌對(duì)多重耐藥銅綠假單胞菌感染干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究25-50
- 1 材料和方法25-38
- 2 結(jié)果38-45
- 3 討論45-50
- 綜述50-59
- 參考文獻(xiàn)59-74
- 中英文縮略語(yǔ)對(duì)照74-76
- 致謝76-77
- 攻讀碩士學(xué)位期間已發(fā)表論文77
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