本文關(guān)鍵詞：BDNF在大鼠胚胎脊髓發(fā)育中與Wnt信號(hào)通路的關(guān)系研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：[目的] 探討B(tài)DNF對(duì)體外培養(yǎng)的SD大鼠胚胎脊髓神經(jīng)元、神經(jīng)干細(xì)胞生長(zhǎng)的影響,并探討其與Wnt信號(hào)通路的關(guān)系。進(jìn)一步闡明BDNF促進(jìn)脊髓發(fā)育的機(jī)制,為臨床治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病提供重要依據(jù)。 [方法] 原代培養(yǎng)SD大鼠胚胎脊髓神經(jīng)元和神經(jīng)干細(xì)胞,并對(duì)其鑒定；BDNF過表達(dá)及干擾的單純皰疹病毒(HSV)重組體轉(zhuǎn)染原代培養(yǎng)SD大鼠胚胎脊髓神經(jīng)元和神經(jīng)干細(xì)胞(均分為正常組、對(duì)照組、BDNF過表達(dá)組和BDNF低表達(dá)組),分別于轉(zhuǎn)染24、48和72小時(shí)計(jì)數(shù)各組神經(jīng)元數(shù)量、胞體面積、突起長(zhǎng)度(神經(jīng)球數(shù)量、神經(jīng)球面積、分化率),MTT檢測(cè)神經(jīng)元和神經(jīng)干細(xì)胞的活力,Real timePCR檢測(cè)Wnt信號(hào)通路相關(guān)因子的mRNA表達(dá)量,探討B(tài)DNF對(duì)SD大鼠胚胎脊髓神經(jīng)元和神經(jīng)干細(xì)胞生長(zhǎng)的影響,并探討其與Wnt信號(hào)通路的關(guān)系。 [結(jié)果] 培養(yǎng)SD大鼠胚胎脊髓神經(jīng)元和神經(jīng)干細(xì)胞,并進(jìn)行鑒定。轉(zhuǎn)染培養(yǎng)的SD大鼠胚胎脊髓神經(jīng)元和神經(jīng)干細(xì)胞。 1、BDNF對(duì)神經(jīng)元生長(zhǎng)發(fā)育的影響： (1)轉(zhuǎn)染24h,各組神經(jīng)元數(shù)量、胞體面積、最長(zhǎng)突起長(zhǎng)度和細(xì)胞活力比較,均沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 (2)轉(zhuǎn)染48h, BDNF過表達(dá)組與對(duì)照組比較,神經(jīng)元數(shù)量顯著增加,神經(jīng)元活力顯著增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)；而BDNF低表達(dá)組與對(duì)照組比較,神經(jīng)元數(shù)量顯著減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),最長(zhǎng)突起長(zhǎng)度顯著減少,神經(jīng)元活力明顯減低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；各組神經(jīng)元胞體面積比較均無明顯變化,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.(P0.05)。 (3)轉(zhuǎn)染72h,鏡下見一片荒蕪,已無法統(tǒng)計(jì)。 2、BDNF對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育的影響： (1)轉(zhuǎn)染24h,各組神經(jīng)球數(shù)量、球面積、分化率和細(xì)胞活力比較,均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 (2)轉(zhuǎn)染48h,BDNF過表達(dá)組與對(duì)照組比較,神經(jīng)球面積增大,細(xì)胞活力增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),神經(jīng)球數(shù)量和分化率沒有變化(P0.05)；而BDNF低表達(dá)組與對(duì)照組比較,神經(jīng)球數(shù)量減少,神經(jīng)球面積減小,分化率降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),細(xì)胞活力沒有變化(P0.05)。 (3)轉(zhuǎn)染72h,BDNF低表達(dá)組與對(duì)照組比較,神經(jīng)球數(shù)量減少,分化率降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；各組神經(jīng)球面積、神經(jīng)干細(xì)胞活力比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 3、BDNF與Wnnt信號(hào)通路的關(guān)系： (1)神經(jīng)元Real timePCR檢測(cè)結(jié)果： BDNF過表達(dá)組與對(duì)照組比較,GSK-3β的表達(dá)明顯減少(P0.01),cyclinDl的表達(dá)顯著增加(P0.01),而BDNF低表達(dá)組與對(duì)照組比較,GSK-3β的表達(dá)明顯增加(P0.01), cyclinDl的表達(dá)顯著減少(P0.01),Wnt信號(hào)通路的其他因子各組比較無明顯差異(P0.05)。 (2)神經(jīng)干細(xì)胞Real timePCR檢測(cè)結(jié)果： BDNF過表達(dá)組與對(duì)照組比較,GSK-3β的表達(dá)明顯減少(P0.01),cyclinDl的表達(dá)顯著增加(P0.01),而BDNF低表達(dá)組與對(duì)照組比較,GSK-3β的表達(dá)明顯增加(P0.01), cyclinDl的表達(dá)顯著減少(P0.05), Wnt信號(hào)通路的其他因子各組比較均無差異(P0.05)。 [結(jié)論] 1、BDNF促進(jìn)大鼠胚胎脊髓神經(jīng)元存活、軸突生長(zhǎng)。2、BDNF促進(jìn)大鼠胚胎脊髓神經(jīng)干細(xì)胞的增殖、分化。 3、BDNF可能是通過抑制Wnt信號(hào)通路中GSK-3β的表達(dá),刺激核內(nèi)靶基因cyclinDl轉(zhuǎn)錄,進(jìn)而促胚胎脊髓的生長(zhǎng)、發(fā)育。
【關(guān)鍵詞】：BDNF 脊髓 神經(jīng)元 神經(jīng)干細(xì)胞 Wnt
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R338
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-11
• 前言11-14
• 第一部分 SD大鼠胚胎脊髓神經(jīng)元和神經(jīng)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)及鑒定14-28
• 材料與方法14-24
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果24-28
• 第二部分 BDNF對(duì)SD大鼠胚胎脊髓發(fā)育的影響及其與Wnt信號(hào)通路的關(guān)系初探28-68
• 材料與方法28-46
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果46-68
• 討論68-72
• 結(jié)論72
• 參考文獻(xiàn)72-77
• 綜述77-85
• 參考文獻(xiàn)81-85
• 讀碩士學(xué)位期間的主要成果85-86
• 致謝86

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 王盛蘭;但齊琴;榮榮;王廷華;張?jiān)戚x;;人單純皰疹病毒BDNF轉(zhuǎn)基因重組體的構(gòu)建表達(dá)及活性檢測(cè)[J];四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2012年02期

2 張建,胡遠(yuǎn)兵,楊忠,蔡文琴;Wnt信號(hào)通路與神經(jīng)發(fā)生[J];解剖科學(xué)進(jìn)展;2005年03期

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本文編號(hào)：365522