本文關(guān)鍵詞：vWF-A3區(qū)單抗SZ-123抑制人vWF與Ⅰ型、Ⅲ型和Ⅳ型膠原的結(jié)合及其抗血小板黏附功能的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景： 近年來，隨著我國人口老齡化程度日益加重，血栓性疾病成為最常見的死亡病因之一，且其發(fā)病率仍在不斷上升。而血栓性疾病中，動(dòng)脈血栓引起的疾病因起病急，致殘率及病死率高而受到廣泛關(guān)注。動(dòng)脈血栓的治療主要是使用抗血小板藥物治療。臨床廣泛使用的第一代抗血小板藥物包括阿司匹林、噻氯吡啶和氯吡格雷等，阿司匹林能阻斷花生四烯酸途徑，噻氯吡啶和氯吡格雷能選擇性的抑制二磷酸腺苷（ADP）與其血小板受體結(jié)合，但這兩類藥物用于介入治療時(shí)均容易發(fā)生“再�！爆F(xiàn)象。第二代抗血小板藥物包括Reopro和SZ-21，均為GPⅡb/Ⅲa拮抗劑，能阻斷血小板血栓形成的最終環(huán)節(jié),從而阻斷血小板聚集的最后通路。雖然它們作用效果較強(qiáng),但一些患者使用時(shí)會(huì)出現(xiàn)明顯的出血副作用。趙益明等之前報(bào)道了一株特異性針對vWF-A3區(qū)的單克隆抗體（monoclonal antibody，mAb）-SZ-123，為血管性血友病因子(vonWillebrand factor，vWF) A3區(qū)鼠源性單克隆抗體，主要針對病理性血栓形成的第一步—血小板黏附，通過抑制血小板黏附來阻斷病理性血栓的形成，但并不妨礙血小板聚集，從而減少出血的不良反應(yīng)。 目的： (1)本研究旨在通過單抗SZ-123對vWF分別在Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型膠原上的結(jié)合抑制實(shí)驗(yàn)來研究單抗SZ-123對vWF在血管內(nèi)皮下各型膠原的抑制作用，進(jìn)一步闡明單抗SZ-123的抗血栓功能。 (2)通過用體外血管腔模型（Flow Chamber）來模擬體內(nèi)血管剪切力、溫度等環(huán)境來研究單抗SZ-123的抗血小板黏附作用，也為將來開發(fā)基于單抗SZ-123的抗栓藥物奠定基礎(chǔ)。 方法： （1）首先用人胎盤Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型膠原包板，加入正常人混合血漿與單抗SZ-123同時(shí)孵育后，再加入辣根過氧化物酶（horseradish peroxidase，HRP）標(biāo)記的兔抗人vWF多克隆抗體孵育，四甲基聯(lián)苯胺（Tetramethylbenzidine，TMB）顯色后，用酶標(biāo)儀讀取吸光度值（OD）。 （2）乙酸酸化的人胎盤Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型膠原分別包被在載玻片上，4℃過夜，經(jīng)生理鹽水洗滌后，，用2%BSA-PBS封閉，備用。經(jīng)肝素抗凝（40U/ml）的人全血2管，一管加單抗SZ-123，另一管加單抗非抑制性抗體SZ-34為陰性對照，37℃孵育10min，在37℃，1000S-1剪切力的小室中灌注，將經(jīng)血小板黏附的載玻片表面用生理鹽水灌注2次后，在倒置顯微鏡下觀察黏附的血小板，并使用SlideBook軟件分析血小板黏附率。 結(jié)果： （1）vWF膠原結(jié)合抑制實(shí)驗(yàn)：結(jié)果表明SZ-123呈劑量依賴性地抑制人血漿中vWF與Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型膠原的結(jié)合反應(yīng)，對Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型膠原的抑制率分別為95%、96%及41%。 （2）平板流動(dòng)小室內(nèi)血小板黏附實(shí)驗(yàn)（Flow Chamber）：結(jié)果表明，在高剪切力條件下、37℃環(huán)境中，SZ-123能夠抑制人血小板在Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型膠原上的黏附作用。 結(jié)論： （1）單抗SZ-123能夠抑制人血小板在Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型膠原上的黏附作用。 （2）單抗SZ-123對人血漿vWF與人Ⅰ、Ⅲ型膠原的結(jié)合抑制率明顯高于與Ⅳ型膠原的結(jié)合。 （3）單抗SZ-123在高剪切力條件下具有較好的抗血小板黏附作用。為進(jìn)一步開發(fā)基于單抗SZ-123的抗栓藥物以及為更加深入的研究血栓形成的機(jī)制提供理論依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：血管性血友病因子 膠原 血栓 vWF-A3區(qū) 單抗SZ-123 血小板黏附
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R392
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 引言9-16
• 參考文獻(xiàn)13-16
• 第一部分 VWF-A3 區(qū)單抗 SZ-123 抑制人血漿 VWF 與Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型膠原的結(jié)合作用16-21
• 材料和方法16-17
• 結(jié)果17-19
• 討論19-20
• 參考文獻(xiàn)20-21
• 第二部分 VWF-A3 區(qū)單抗 SZ-123 在體外血管腔模型中抗血小板黏附功能的研究21-26
• 材料和方法21-22
• 結(jié)果22-24
• 討論24
• 參考文獻(xiàn)24-26
• 結(jié)論26-27
• 綜述27-35
• 參考文獻(xiàn)32-35
• 中英文對照縮略詞表35-36
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文及科研情況36-37
• 致謝37-39

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 姚拾秀;江淼;趙益明;;血管性血友病因子裂解蛋白酶活性檢測方法的研究新進(jìn)展[J];國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2013年15期

  本文關(guān)鍵詞：vWF-A3區(qū)單抗SZ-123抑制人vWF與Ⅰ型、Ⅲ型和Ⅳ型膠原的結(jié)合及其抗血小板黏附功能的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：365509