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利用小鼠骨骼肌細(xì)胞持續(xù)表達(dá)單鏈胰島素類似物進(jìn)行1型糖尿病模型鼠的長(zhǎng)效基因治療

發(fā)布時(shí)間:2022-02-19 03:29
  目的探討Pluronic L64-電脈沖(L/E)體系介導(dǎo)的單鏈胰島素類似物基因在骨骼肌組織的傳遞表達(dá)對(duì)1型糖尿病小鼠的治療效果和影響。方法將胰島素基因中的C肽區(qū)域換成(GGGGS)3,克隆到pcDNA3.1(+)質(zhì)粒中,構(gòu)建載體pcDNA-INS。使用鏈脲佐菌素腹腔注射雄性BALB/c小鼠建立1型糖尿病小鼠模型,并分為L(zhǎng)/E聯(lián)合pcDNA3.1(+)空質(zhì)粒治療的L/E-pcDNA3.1(+)組、僅使用pcDNA-INS裸質(zhì)粒治療的pcDNA-INS組和L/E聯(lián)合pcDNA-INS裸質(zhì)粒治療的L/E-pcDNA-INS組。模型小鼠在脛骨前肌注射相關(guān)質(zhì)粒進(jìn)行治療,且根據(jù)治療方案在注射1 h后進(jìn)行Pluronic L64-電脈沖處理,并以生理鹽水處理的正常小鼠(NC)組作為對(duì)照。記錄各組小鼠的血糖、體質(zhì)量、血清胰島素含量、生存率、免疫組化、外形特征及組織病理等指標(biāo)。結(jié)果 (1)pcDNA-INS質(zhì)粒通過酶切和測(cè)序鑒定無誤;(2)與NC組相比,模型小鼠血糖顯著上升,體質(zhì)量顯著下降(P<0.05),且胰島遭到嚴(yán)重破壞;(3)L/E-pcDNA-INS組的血糖水平和血... 

【文章來源】:四川動(dòng)物. 2019,38(06)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】:9 頁(yè)

【文章目錄】:
1 材料和方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    1.2 試劑及儀器
    1.3 實(shí)驗(yàn)方法
        1.3.1 質(zhì)粒的制備與鑒定
        1.3.2 模型建立及治療
        1.3.3 血糖和體質(zhì)量的檢測(cè)
        1.3.4 生存率檢測(cè)及小鼠形體觀察
        1.3.5 胰島素檢測(cè)
        1.3.6 蘇木精-伊紅(HE)染色病理檢測(cè)
    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 含胰島素類似物基因的載體(pcDNA-INS)構(gòu)建及結(jié)果分析
    2.2 糖尿病小鼠模型的建立
    2.3 各組小鼠的血糖水平變化
    2.4 各組小鼠的血清胰島素含量變化
    2.5 糖尿病小鼠生存率情況及免疫組化結(jié)果
    2.6 各組小鼠的形體變化及病理檢查結(jié)果
3 討論



本文編號(hào):3632124

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