本文關(guān)鍵詞：Pristane誘導(dǎo)小鼠狼瘡模型的建立及其免疫細(xì)胞功能變化的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的建立Pristane誘導(dǎo)的小鼠系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)模型；觀察該模型各器官組織的炎癥病理變化特點(diǎn)；觀察該模型各部位免疫細(xì)胞的組成變化；檢測該模型淋巴細(xì)胞共刺激分子的表達(dá)及脾臟T細(xì)胞的活化程度；觀察絲裂原(LPS和ConA)刺激對脾淋巴細(xì)胞免疫功能的影響。方法(一)狼瘡模型的建立、生物學(xué)鑒定及其器官組織免疫和病理學(xué)檢查：0.5mlPristane單次腹腔注射雌性BALB/c小鼠構(gòu)建小鼠狼瘡模型(對照組注射等量的生理鹽水NS)；注射前及注射后每月ELISA法檢測血清抗dsDNA抗體和抗Sm/RNP抗體含量，Albustix試紙法檢測尿蛋白含量；6個(gè)月后處死全部小鼠，解剖、肉眼觀察其胸、腹腔臟器組織病變情況，并取肝、脾、肺、腎、小腸及其他病變組織做HE染色觀察其組織炎癥病理變化；直接熒光染色法觀察腎臟免疫復(fù)合物(IC)沉積及肝、肺和小腸組織T、B細(xì)胞浸潤程度；半定量RT-PCR檢測肝、肺和小腸組織炎癥性細(xì)胞因子IL-6mRNA和Ⅰ型干擾素刺激基因(ISGs)Mx1mRNA的表達(dá)水平。(二)模型組小鼠免疫細(xì)胞組成和功能變化的研究：流式細(xì)胞術(shù)檢測造模3個(gè)月時(shí)模型組小鼠脾臟T細(xì)胞的活化程度，造模3個(gè)月和6個(gè)月時(shí)脾臟T細(xì)胞表面共刺激分子CD28、CD154、CD137和B細(xì)胞表面共刺激分子CD40、CD137L的表達(dá)，以及造模6個(gè)月時(shí)外周血、脾臟和腹腔灌洗液中各免疫細(xì)胞的組成變化；RT-PCR檢測造模6個(gè)月時(shí)脾臟CD137mRNA和CD137LmRNA的表達(dá)水平；流式細(xì)胞術(shù)檢測造模6個(gè)月時(shí)模型組小鼠外周血和腹腔灌洗液中淋巴細(xì)胞表面共刺激分子的表達(dá)；MTT法和流式細(xì)胞術(shù)檢測模型組小鼠脾淋巴細(xì)胞在絲裂原刺激下的增殖、活化、共刺激分子表達(dá)和凋亡。結(jié)果(一)模型組小鼠出現(xiàn)多種SLE樣臨床癥狀和體征，并發(fā)生肝、肺等器官組織炎癥反應(yīng)：模型組小鼠造模3個(gè)月～6個(gè)月時(shí)血清抗Sm/RNP抗體和4個(gè)月～6個(gè)月時(shí)血清抗dsDNA抗體較對照組明顯增高(P0.01)；造模6個(gè)月時(shí)其蛋白尿(≥+)陽性率和關(guān)節(jié)病變陽性率均顯著高于對照組(P0.01)；器官組織檢查發(fā)現(xiàn)，造模6個(gè)月時(shí)50%的模型組小鼠出現(xiàn)不同程度的腎小球腎炎病變伴毛細(xì)血管壁大量IC沉積，且大多數(shù)模型組小鼠出現(xiàn)脾腫大，肝、肺和小腸組織T、B細(xì)胞浸潤，IL-6mRNA和Mx1mRNA表達(dá)上調(diào)及腹腔產(chǎn)生大量脂肪肉芽腫結(jié)節(jié)等器官組織炎癥反應(yīng)，而對照組未見這些病變。(二)模型組小鼠免疫細(xì)胞組成和功能明顯異常：與對照組相比，造模3個(gè)月時(shí)模型組小鼠脾臟T細(xì)胞明顯活化(P0.05)；造模6個(gè)月時(shí)模型組小鼠脾臟中T、B細(xì)胞明顯減少(P0.05)，，漿細(xì)胞明顯增多(P0.05)，外周血樹突狀細(xì)胞和漿細(xì)胞明顯增多(p0.05)，腹腔灌洗液中T細(xì)胞、漿細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞明顯增多(P0.05)，B細(xì)胞明顯減少(P0.05)，且各部位成熟樹突狀細(xì)胞均明顯增多(P0.05)；造模6個(gè)月時(shí)模型組小鼠脾臟T細(xì)胞上CD28表達(dá)明顯減少(P0.05)，CD137表達(dá)明顯增多(P0.01)，B細(xì)胞上CD40表達(dá)明顯減少(P0.01)，CD137L表達(dá)明顯增多(P0.05)，且其脾臟CD137mRNA和CD137LmRNA表達(dá)上調(diào)；造模6個(gè)月時(shí)模型組小鼠外周血淋巴細(xì)胞上述幾種共刺激分子的表達(dá)與脾臟基本一致，而腹腔灌洗液中T細(xì)胞表達(dá)CD28不是減少而是明顯增多(P0.05)；模型組小鼠脾淋巴細(xì)胞在絲裂原刺激下的增殖、活化和凋亡均較對照組明顯增強(qiáng)(P0.05)，且絲裂原刺激不能糾正模型組小鼠脾淋巴細(xì)胞表面所有共刺激分子的表達(dá)異常。結(jié)論P(yáng)ristane能成功誘發(fā)BALB/c小鼠SLE；Pristane能誘導(dǎo)狼瘡鼠出現(xiàn)明顯的器官組織炎癥性病變；Pristane誘導(dǎo)的狼瘡鼠免疫細(xì)胞組成及淋巴細(xì)胞增殖、活化、表面共刺激分子表達(dá)及凋亡明顯異常。
【關(guān)鍵詞】：Pristane 小鼠 狼瘡模型 炎癥 共刺激分子
【學(xué)位授予單位】：蚌埠醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R593.241;R-332
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 前言10-13
• 材料與儀器13-15
• 實(shí)驗(yàn)方法15-25
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果25-45
• 討論45-49
• 結(jié)論49-50
• 參考文獻(xiàn)50-56
• 致謝56-57
• 附錄57-73
• A、系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷標(biāo)準(zhǔn)57-58
• B、英文縮略詞表58-59
• C、常用試劑配制59-60
• D、個(gè)人簡歷及發(fā)表的文章60-61
• E、綜述61-73
• 參考文獻(xiàn)68-73

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 高元元;吳俊英;李柏青;王慧;梁友寶;梁華;;4-1BBL/4-1BB信號對系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者外周血淋巴細(xì)胞活化的影響[J];蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2011年11期

2 李玉杰,李幼姬,葉任高,梁柳琴,孔慶瑜,余學(xué)清,董秀清;CD40在系統(tǒng)性紅斑狼瘡?fù)庵苎馨图?xì)胞的表達(dá)[J];上海免疫學(xué)雜志;2003年06期

3 錢齊宏,張學(xué)光,於葛華,邱玉華,周照華,施勤,王寶濤,劉銘,沈華英,陳蕾,楊曉惠,周靜芬;T細(xì)胞亞群及共刺激分子表達(dá)與系統(tǒng)性紅斑狼瘡免疫病理的關(guān)系[J];蘇州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2002年01期

4 張利寧,曹英林,趙文璞,馬春紅,宋靜,孫汶生;CD137在SLE和RA病人外周血T細(xì)胞上的表達(dá)特點(diǎn)及意義[J];中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志;2000年02期

5 張榕;羅曉光;張曉莉;趙麗娟;;系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者CD4~+ T細(xì)胞上CD137的表達(dá)[J];中國免疫學(xué)雜志;2007年02期

  本文關(guān)鍵詞：Pristane誘導(dǎo)小鼠狼瘡模型的建立及其免疫細(xì)胞功能變化的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：362773