本文關(guān)鍵詞：Pristane誘導(dǎo)小鼠狼瘡模型的建立及其免疫細胞功能變化的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的建立Pristane誘導(dǎo)的小鼠系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)模型；觀察該模型各器官組織的炎癥病理變化特點；觀察該模型各部位免疫細胞的組成變化；檢測該模型淋巴細胞共刺激分子的表達及脾臟T細胞的活化程度；觀察絲裂原(LPS和ConA)刺激對脾淋巴細胞免疫功能的影響。方法(一)狼瘡模型的建立、生物學(xué)鑒定及其器官組織免疫和病理學(xué)檢查：0.5mlPristane單次腹腔注射雌性BALB/c小鼠構(gòu)建小鼠狼瘡模型(對照組注射等量的生理鹽水NS)；注射前及注射后每月ELISA法檢測血清抗dsDNA抗體和抗Sm/RNP抗體含量，Albustix試紙法檢測尿蛋白含量；6個月后處死全部小鼠，解剖、肉眼觀察其胸、腹腔臟器組織病變情況，并取肝、脾、肺、腎、小腸及其他病變組織做HE染色觀察其組織炎癥病理變化；直接熒光染色法觀察腎臟免疫復(fù)合物(IC)沉積及肝、肺和小腸組織T、B細胞浸潤程度；半定量RT-PCR檢測肝、肺和小腸組織炎癥性細胞因子IL-6mRNA和Ⅰ型干擾素刺激基因(ISGs)Mx1mRNA的表達水平。(二)模型組小鼠免疫細胞組成和功能變化的研究：流式細胞術(shù)檢測造模3個月時模型組小鼠脾臟T細胞的活化程度，造模3個月和6個月時脾臟T細胞表面共刺激分子CD28、CD154、CD137和B細胞表面共刺激分子CD40、CD137L的表達，以及造模6個月時外周血、脾臟和腹腔灌洗液中各免疫細胞的組成變化；RT-PCR檢測造模6個月時脾臟CD137mRNA和CD137LmRNA的表達水平；流式細胞術(shù)檢測造模6個月時模型組小鼠外周血和腹腔灌洗液中淋巴細胞表面共刺激分子的表達；MTT法和流式細胞術(shù)檢測模型組小鼠脾淋巴細胞在絲裂原刺激下的增殖、活化、共刺激分子表達和凋亡。結(jié)果(一)模型組小鼠出現(xiàn)多種SLE樣臨床癥狀和體征，并發(fā)生肝、肺等器官組織炎癥反應(yīng)：模型組小鼠造模3個月～6個月時血清抗Sm/RNP抗體和4個月～6個月時血清抗dsDNA抗體較對照組明顯增高(P0.01)；造模6個月時其蛋白尿(≥+)陽性率和關(guān)節(jié)病變陽性率均顯著高于對照組(P0.01)；器官組織檢查發(fā)現(xiàn)，造模6個月時50%的模型組小鼠出現(xiàn)不同程度的腎小球腎炎病變伴毛細血管壁大量IC沉積，且大多數(shù)模型組小鼠出現(xiàn)脾腫大，肝、肺和小腸組織T、B細胞浸潤，IL-6mRNA和Mx1mRNA表達上調(diào)及腹腔產(chǎn)生大量脂肪肉芽腫結(jié)節(jié)等器官組織炎癥反應(yīng)，而對照組未見這些病變。(二)模型組小鼠免疫細胞組成和功能明顯異常：與對照組相比，造模3個月時模型組小鼠脾臟T細胞明顯活化(P0.05)；造模6個月時模型組小鼠脾臟中T、B細胞明顯減少(P0.05)，，漿細胞明顯增多(P0.05)，外周血樹突狀細胞和漿細胞明顯增多(p0.05)，腹腔灌洗液中T細胞、漿細胞和樹突狀細胞明顯增多(P0.05)，B細胞明顯減少(P0.05)，且各部位成熟樹突狀細胞均明顯增多(P0.05)；造模6個月時模型組小鼠脾臟T細胞上CD28表達明顯減少(P0.05)，CD137表達明顯增多(P0.01)，B細胞上CD40表達明顯減少(P0.01)，CD137L表達明顯增多(P0.05)，且其脾臟CD137mRNA和CD137LmRNA表達上調(diào)；造模6個月時模型組小鼠外周血淋巴細胞上述幾種共刺激分子的表達與脾臟基本一致，而腹腔灌洗液中T細胞表達CD28不是減少而是明顯增多(P0.05)；模型組小鼠脾淋巴細胞在絲裂原刺激下的增殖、活化和凋亡均較對照組明顯增強(P0.05)，且絲裂原刺激不能糾正模型組小鼠脾淋巴細胞表面所有共刺激分子的表達異常。結(jié)論Pristane能成功誘發(fā)BALB/c小鼠SLE；Pristane能誘導(dǎo)狼瘡鼠出現(xiàn)明顯的器官組織炎癥性病變；Pristane誘導(dǎo)的狼瘡鼠免疫細胞組成及淋巴細胞增殖、活化、表面共刺激分子表達及凋亡明顯異常。
【關(guān)鍵詞】：Pristane 小鼠 狼瘡模型 炎癥 共刺激分子
【學(xué)位授予單位】：蚌埠醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R593.241;R-332
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 前言10-13
• 材料與儀器13-15
• 實驗方法15-25
• 實驗結(jié)果25-45
• 討論45-49
• 結(jié)論49-50
• 參考文獻50-56
• 致謝56-57
• 附錄57-73
• A、系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷標(biāo)準(zhǔn)57-58
• B、英文縮略詞表58-59
• C、常用試劑配制59-60
• D、個人簡歷及發(fā)表的文章60-61
• E、綜述61-73
• 參考文獻68-73

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

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  本文關(guān)鍵詞：Pristane誘導(dǎo)小鼠狼瘡模型的建立及其免疫細胞功能變化的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：362773