樹突狀細胞（Dendritic cell,DC）是專職抗原提呈細胞,其對免疫系統(tǒng)強有力的調(diào)節(jié)作用為腫瘤治療開辟了新的途徑。DC疫苗是指負載腫瘤抗原的DC,其能在患者體內(nèi)誘發(fā)抗原特異性的T細胞反應(yīng)進而殺死腫瘤細胞。在DC的分化和發(fā)揮功能過程中,Notch信號途徑是必須的。文獻報道Notch配體Jagged-1能對DC的分化起抑制作用。而我們利用過表達Notch配體DLL1（Delta-like 1）的OP9基質(zhì)細胞與野生型小鼠骨髓細胞共培養(yǎng)誘導(dǎo)生成DC,觀察DLL1對DC分化和對其負載EL4淋巴瘤抗原后的提呈功能的影響,以期在DC誘導(dǎo)分化過程中,通過調(diào)節(jié)Notch信號產(chǎn)生更有效的DC腫瘤疫苗。DC通過模式識別受體,如TLR來識別病原體,進而與T細胞發(fā)生相互作用并影響T輔助細胞向Th1或Th2極化。具有誘發(fā)Th1反應(yīng)潛能的DC被命名為DC1;而能誘發(fā)Th2反應(yīng)的則被稱為DC2。胞內(nèi)菌感染引發(fā)以分泌IFN-γ為特征的Th1反應(yīng),而寄生蟲感染觸發(fā)以分泌IL-4、IL-5和IL-13為特征的Th2反應(yīng)。TLR信號能激活NF-κB途徑。多項研究報道Notch信號途徑對NF-κB起調(diào)控作用。我們前期... 

【文章來源】：中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

Notch信號途徑受體和配體（引自FreddyRadtke,etal.Immunity,2010）

第四軍醫(yī)大學碩士學位論文受體跨膜區(qū)。隨后γ分泌酶在S3位點酶切受體跨膜區(qū)，釋放Notch受體胞內(nèi)段8�？扇苄缘陌麅�(nèi)段是Notch的活性形式，它能轉(zhuǎn)移入核并結(jié)合CSL。轉(zhuǎn)錄因子CSL在人類中也被稱為CBF-1，在小鼠中為RBP-J，它在未結(jié)合胞內(nèi)段時是轉(zhuǎn)錄抑制子，能募集轉(zhuǎn)錄共抑制物CoR、組蛋白脫乙酰酶HDAC對基因轉(zhuǎn)錄起抑制作用。當與NICD結(jié)合后對轉(zhuǎn)錄起促進作用。CSL能與DNA特定序列C/TGTGGGAA結(jié)合，激活下游基因的表達（如圖2）。在多種組織中，基因HES和HEY被證實是Notch靶基因。最近研究也表明還有很多基因受到Notch信號的直接調(diào)控。并且，Notch信號途徑與其他多種信號途徑存在交叉調(diào)控，比如NF-κB等，我們可以推測出還有很多受到Notch調(diào)控的未知基因。除了上述經(jīng)典的Notch信號途徑外，另一種Notch信號途徑為非CBF-1/RBP-Jκ依賴性。近年來，研究表明Notch信號途徑還存在其他轉(zhuǎn)導(dǎo)方式9。

體都要依賴 RBP-J 的介導(dǎo)才能激活下游分子，所以剔除 RBP-J 將徹底阻斷Notch 信號途徑，并排除受體間代償?shù)目赡苄�。研究發(fā)現(xiàn)在條件性剔除 RBP-J的小鼠脾臟中的 cDC 數(shù)量明顯減少40。我們實驗室利用 RBP-J 條件性剔除小鼠模型研究了 Notch 對 DC 發(fā)育的影響。研究結(jié)果顯示：通過全骨髓移植實驗，RBP-J 剔除受體小鼠體內(nèi)脾臟、淋巴結(jié)、骨髓和腹腔中的所有 DC 亞群數(shù)量明顯減少，包括 MHCII+CD11c+；cDC：CD3-CD19-MHCII+CD11c+；pDC：CD3-CD19-CD11b-B220+CD11c+。在體外培養(yǎng)體系中，DC 由骨髓細胞誘導(dǎo)分化而成。DC 經(jīng)刺激成熟后，形態(tài)和功能均表現(xiàn)出缺陷（如圖 3）。電鏡結(jié)果顯示 RBP-J 剔除 DC 樹突數(shù)量減少并變短。RBP-J 剔除后，DC 的抗原提呈和遷移能力下降，其表面分子 MHCⅡ和 CXCR4 的表達量低于對照細胞。而其它表面分子表達情況與對照組沒有明顯區(qū)別，如CD11c、CD86、CD80、Gr1、Mac1 和 CD2441。

【參考文獻】：
博士論文
[1]Notch信號途徑對小鼠骨髓單核來源樹突狀細胞和巨噬細胞分化發(fā)育的調(diào)控[D]. 王耀春.第四軍醫(yī)大學 2009



本文編號：3605921