本研究在柯薩奇病毒B3（coxsackievirus B3,CVB3）基因組P1編碼區(qū)與P2編碼區(qū)之間插入一段has-miRNA-205-3p和has-miRNA-205-5p（簡稱miR-205）的靶序列,得到重組病毒v205T,并比較分析了它在人宮頸癌細(xì)胞系HeLa細(xì)胞（miR-205低水平表達(dá)）和非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549細(xì)胞（miR-205高水平表達(dá)）中的復(fù)制情況。結(jié)果表明,插入的miR-205靶序列不影響病毒在HeLa細(xì)胞中的復(fù)制水平,但抑制了病毒在A549細(xì)胞中的復(fù)制,病毒滴度為對照的1%以下。為探討v205T在2株細(xì)胞中復(fù)制差異的原因,進(jìn)一步加入miR-205的類似物和抑制物。miR-205類似物可抑制v205T在HeLa細(xì)胞中復(fù)制和殺傷細(xì)胞的水平,而miR-205抑制物可提高v205T在A549細(xì)胞中的復(fù)制和殺傷細(xì)胞的水平。結(jié)果表明,v205T的復(fù)制確實(shí)受miR-205的調(diào)控。本研究為開發(fā)基于CVB3載體的溶瘤病毒和針對CVB3的減毒活疫苗提供了依據(jù)。 

【文章來源】：微生物與感染. 2019,14(04)

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 細(xì)胞和培養(yǎng)基
    1.2 CVB3感染性克隆質(zhì)粒的構(gòu)建
    1.3 重組病毒的拯救和傳代
    1.4 病毒滴度及生長曲線的測定
    1.5 miRNA類似物和抑制物
    1.6 細(xì)胞活性分析
    1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
2 結(jié)果
    2.1 CVB3感染性克隆的構(gòu)建和重組病毒的獲得
    2.2 病毒在HeLa 和A549細(xì)胞中的復(fù)制
    2.3 miR-205類似物顯著降低v205T在HeLa細(xì)胞中的復(fù)制
    2.4 miR-205抑制物顯著增強(qiáng)v205T在A549細(xì)胞的復(fù)制
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]宮頸癌細(xì)胞株HeLa與正常宮頸細(xì)胞株Ect1/E6E7的微小RNA表達(dá)譜的差異[J]. 鄧晰月,洪文旭,吳運(yùn)妙,段永恒,段山,劉素純,劉建軍.  中國婦幼保健. 2016(01)



本文編號：3605915