本文關(guān)鍵詞：黃芪多糖在白色念珠菌重組蛋白疫苗中免疫增強(qiáng)作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：黃芪多糖是從中藥黃芪中提取出來的多聚糖，是黃芪中含量最多，免疫活性較強(qiáng)的天然成分，研究證明，黃芪多糖具有免疫調(diào)節(jié)功能及藥理功效，還具有來源廣泛、細(xì)胞毒性低、增強(qiáng)免疫效果等特點(diǎn)，可以作為疫苗佐劑進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。 白色念珠菌是廣泛寄居在宿主體內(nèi)的一種條件致病真菌，目前對于白色念珠菌感染的治療主要是通過一些抗真菌的藥物，但系統(tǒng)性白色念珠菌感染，服用抗真菌藥物后仍有70%的死亡率,因此選擇良好的疫苗激發(fā)機(jī)體的適應(yīng)性和固有性免疫將成為研制安全有效的白色念珠菌疫苗的重要策略。研究發(fā)現(xiàn)，白色念珠菌熱休克蛋白90（Hsp90）是白色念珠菌的一種免疫優(yōu)勢抗原，是免疫應(yīng)答的主要靶位，能夠誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生保護(hù)性抗體，而其中的表位C是一種保守表位，能夠與所有病人的血清起反應(yīng)，因此可以將其作為白色念珠菌疫苗的候選抗原。本實(shí)驗(yàn)室表達(dá)了含有白色念珠菌熱休克蛋白90表位C的重組蛋白（rP-HSP90C），可以作為疫苗，但是重組疫苗免疫原性較差，需要一種安全有效的佐劑來增強(qiáng)其免疫效果。 本論文以黃芪多糖（APS）作為疫苗佐劑與rP-HSP90C共同免疫ICR小鼠，皮下注射免疫兩次，末次免疫后的第14天，對免疫小鼠進(jìn)行眼球取血，收集血清進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)，來研究黃芪多糖的免疫增強(qiáng)作用。Western Blot實(shí)驗(yàn)檢測免疫小鼠抗血清中抗體的特異性；ELISA實(shí)驗(yàn)檢測抗血清中特異性抗體IgG、IgG1及IgG2b的抗體滴度；ELISA試劑盒檢測抗血清中IL-2、IL-12、IL-4、IL-10的含量；遲發(fā)型超敏反應(yīng)實(shí)驗(yàn)；檢測腎臟的真菌負(fù)荷量以及分析腎組織切片的病理變化研究APS對rP-HSP90C抗系統(tǒng)性白色念珠菌免疫保護(hù)作用的影響。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，APS與rP-HSP90C共同免疫小鼠后，其血清中特異性抗體IgG、IgG1及IgG2b滴度及IL-2、IL-12、IL-4、IL-10含量明顯高于rP-HSP90C組；增強(qiáng)了遲發(fā)型超敏反應(yīng)；免疫保護(hù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，APS與rP-HSP90C共同免疫組小鼠腎組織勻漿培養(yǎng)得到的白色念珠菌菌落數(shù)顯著少于rP-HSP90C組，腎臟的受損程度明顯減弱。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果有利地證明了APS作為rP-HSP90C疫苗的佐劑顯著增強(qiáng)了Th1型和Th2型免疫應(yīng)答，增強(qiáng)了rP-HSP90C疫苗抗系統(tǒng)性白色念珠菌感染的能力，，為APS在疫苗佐劑領(lǐng)域中的應(yīng)用奠定了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，也為白色念珠菌感染的疫苗的研制奠定了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：黃芪多糖 白色念珠菌 重組蛋白疫苗 佐劑
【學(xué)位授予單位】：東北師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R392
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-9
• 中英文縮寫9-10
• 第一章 文獻(xiàn)綜述10-18
• 1.黃芪多糖及其免疫藥理作用概述10-12
• 1.1 黃芪多糖對免疫器官的作用10
• 1.2 黃芪多糖對免疫細(xì)胞的作用10
• 1.3 黃芪多糖對細(xì)胞免疫的影響10-11
• 1.4 黃芪多糖對體液免疫的影響11
• 1.5 黃芪多糖對粘膜免疫的影響11
• 1.6 黃芪多糖的抗病毒、抗菌作用11
• 1.7 黃芪多糖的抗腫瘤作用11
• 1.8 黃芪多糖的抗氧化作用11-12
• 2.佐劑及其種類簡介12-14
• 2.1 鋁佐劑12
• 2.2 脂質(zhì)體佐劑12
• 2.3 細(xì)胞因子佐劑12
• 2.4 皂苷及免疫刺激復(fù)合物(ISCOM)佐劑12-13
• 2.5 細(xì)菌毒素佐劑13
• 2.6 核酸和CpG序列佐劑13
• 2.7 植物多糖佐劑13-14
• 3.白色念珠菌及其疫苗簡介14-16
• 3.1 全菌疫苗14-15
• 3.2 糖結(jié)合疫苗15
• 3.3 多肽疫苗15
• 3.4 DNA 疫苗15
• 3.5 核糖體疫苗15-16
• 3.6 細(xì)胞壁表面成分疫苗16
• 3.7 殺傷細(xì)胞毒素疫苗16
• 3.8 蛋白疫苗16
• 4.研究目的及意義16-18
• 第二章 實(shí)驗(yàn)材料與方法18-28
• 1 實(shí)驗(yàn)材料及儀器18-19
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料18
• 1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑18-19
• 1.3 實(shí)驗(yàn)儀器19
• 2 實(shí)驗(yàn)方法19-28
• 2.1 rP-HSP90C 的制備19-22
• 2.2 APS 在 rP-HSP90C 中的免疫增強(qiáng)作用研究22-24
• 2.2.1 免疫動(dòng)物22
• 2.2.2 Western blot 方法檢測免疫小鼠抗血清中抗體的特異性22-23
• 2.2.3 ELISA 法檢測免疫小鼠血清中特異性抗體滴度23-24
• 2.2.4 ELISA 試劑盒檢測免疫小鼠抗血清中 IL-2、IL-12、IL-4、IL-10 的含量24
• 2.2.5 遲發(fā)型超敏反應(yīng)實(shí)驗(yàn)24
• 2.3 APS 對免疫后小鼠抗系統(tǒng)性白色念珠菌感染的免疫保護(hù)作用的影響24-27
• 2.4 數(shù)據(jù)分析27-28
• 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析28-38
• 1.rP-HSP90C 的 SDS-PAGE 電泳分析28
• 2.APS 的免疫增強(qiáng)作用結(jié)果分析28-38
• 2.1 Western blot 檢測免疫小鼠抗血清中抗體的特異性28-29
• 2.2 APS 對免疫小鼠抗血清中抗 rP-Hsp90C 特異性抗體滴度的影響29-32
• 2.3 APS 對免疫小鼠抗血清中 IL-2、IL-12、IL-4、IL-10 的影響32-33
• 2.4 APS 對小鼠遲發(fā)型超敏反應(yīng)的影響33-34
• 2.5 APS 對免疫小鼠抗系統(tǒng)性白色念珠菌感染的免疫保護(hù)作用34-38
• 第四章 討論38-40
• 1.免疫劑量的確定38
• 2.APS 增強(qiáng)了 Th1 型和 Th2 免疫應(yīng)答38-39
• 2.1 APS 增強(qiáng)了 Th1 免疫應(yīng)答38-39
• 2.2 APS 增強(qiáng)了 Th2 型免疫應(yīng)答39
• 3.APS 增強(qiáng)了 rP-HSP90C 抗系統(tǒng)性白色念珠菌感染的免疫保護(hù)作用39-40
• 結(jié)論40-41
• 參考文獻(xiàn)41-44
• 致謝44

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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本文編號：359997