本文關(guān)鍵詞：基于報告病毒和細胞活性的抗EV71和CA16病毒藥物篩選方法的建立及應用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：手足口病(HFMD)是一種常見的兒科疾病，主要由腸道病毒71型（EV71）和柯薩奇病毒A16型（CA16）感染引起。近年來，手足口病頻繁爆發(fā)，已成為西太平洋地區(qū)最受關(guān)注的公共健康問題之一。當前仍沒有上市的針對EV71和CA16的疫苗和抗病毒藥物，因此，急需研究出有效的抗病毒療法。 本研究建立了一個以報告病毒和細胞活性檢測為基礎(chǔ)的兩步篩選平臺并應用于篩選EV71和CA16藥物。首先，利用兩種報告病毒，帶有熒光素酶基因的假病毒和帶有增強型綠色熒光蛋白基因的感染性病毒，對400種高度純化的天然化合物庫進行初篩。然后用傳統(tǒng)的檢測細胞活性的方法對初篩產(chǎn)生的候選化合物進行復篩，進一步確認它們的抗病毒活性。 經(jīng)過兩輪篩選，得到了三種具有抗病毒活性的小分子化合物（木犀草素、高良姜素和榭皮素），其中木犀草素對EV71和CA16的抑制效果最強，我們對其進行了深入的研究。通過細胞病變（CPE）減少實驗和空斑減少實驗，得到的木犀草素的半數(shù)抑制濃度(IC50)均為10μM左右。初步機制研究表明，木犀草素作用于病毒的吸附后階段，并抑制病毒RNA的復制。綜上所述，本研究建立了一種兩步法的抗病毒藥物篩選系統(tǒng)，并為EV71和CA16抗病毒藥物研究提供了一種前體化合物。
【關(guān)鍵詞】：腸病毒71型 柯薩奇病毒A16 木犀草素 報告病毒 高通量篩選 抗病毒藥物研究
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R373
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-6
• 英文縮略詞表6-7
• 目錄7-9
• 引言9-18
• 1. 手足口病介紹9-12
• 2. 抗手足口病藥物研究進展12-16
• 3. 本文的立題依據(jù)和實驗設(shè)計16-18
• 第一章 篩選方法的建立及應用18-28
• 第一節(jié) 報告病毒的制備18-21
• 1. 材料與方法18-19
• 2. 實驗結(jié)果19-21
• 3. 小結(jié)21
• 第二節(jié) 篩選條件的選取及篩選過程21-28
• 1. 材料與方法21-23
• 2. 實驗結(jié)果23-27
• 3. 小結(jié)27-28
• 第二章 木犀草素抗病毒作用的評價28-33
• 1. 材料與方法28-29
• 2. 實驗結(jié)果29-32
• 3. 小結(jié)32-33
• 第三章 木犀草素抗病毒機理的初步研究33-36
• 1. 材料與方法33
• 2. 實驗結(jié)果33-35
• 3. 小結(jié)35-36
• 討論36-38
• 結(jié)論38-39
• 參考文獻39-45
• 致謝45-46
• 在讀期間發(fā)表的論文46-47
• 作者簡介47

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