OGD對BBB體外模型中內(nèi)皮細胞緊密連接蛋白及TEER的影響
發(fā)布時間:2017-05-11 20:04
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【摘要】:目的:為了加深對血腦屏障的認識與進一步對其研究,構(gòu)建血腦屏障的體外模型. 方法:原代分離培養(yǎng)SD大鼠乳鼠腦微血管內(nèi)皮細胞(brain microvascularendothelial cells, BMVEC),采用倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)和生長規(guī)律,用免疫組化檢測緊密連接蛋白claudin-5和ZO-1.內(nèi)皮細胞與原代培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細胞在Transwell小室上建立BBB體外實驗?zāi)P?用EVOM2觀察跨膜電阻(Trans-epitheliumelectrical resistant,TEER)的動態(tài)變化,探討血腦屏障模型建立以及特性. 結(jié)果:BMVEC培養(yǎng)至融合以后具有典型的“鋪路石”樣外觀,claudin-5與Z0-1免疫組化證實細胞間形成緊密連接,單獨培養(yǎng)BMVEC的TEER值為(161.5±1.96) Ω×cm2,共培養(yǎng)體外模型的TEER值為(185.4±3.25) Ω×cm~2. 結(jié)論:建立的BBB體外模型在形態(tài)學(xué).電阻方面具備了BBB的基本特性,并且在星膠存在下共培養(yǎng)模型使BBB形態(tài)結(jié)構(gòu)更完整. 目的:觀察單純培養(yǎng)BMEC及其與AS共培養(yǎng)兩種模型條件下,缺氧-復(fù)氧時的變化 方法:分別對單獨培養(yǎng)BMEC和AS與內(nèi)皮共培養(yǎng)兩個BBB兩個體外模型.進行缺氧-復(fù)氧處理(缺氧4h,復(fù)氧1h,3h,6h,12h,24h),觀察兩者TEER值與緊密連接蛋白的變化. 結(jié)果:單獨內(nèi)皮細胞培養(yǎng)時,缺氧后電阻值有顯著的下降,為(140.1±2.6) Ω*cm2 結(jié)論:缺氧后對單層BMEC的BBB模型有一定的破壞作用,在復(fù)氧后情況會有改善,但無法恢復(fù)到缺錢前狀態(tài).下一步進行共培養(yǎng)模型的實驗.
【關(guān)鍵詞】:腦微血管內(nèi)皮細胞 共培養(yǎng) 血腦屏障 體外模型 TEER BBB MODEL OGD TEER ZO-1
【學(xué)位授予單位】:華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R329.2
【目錄】:
- 全文縮略詞表5-6
- 前言6-10
- 參考文獻8-10
- 第一部分 體外血腦屏障的建立10-35
- 中文摘要10-11
- ABSTRACT11-12
- 引言12-13
- 材料與方法13-22
- 實驗結(jié)果22-28
- 討論28-32
- 參考文獻32-35
- 第二部分 缺氧-復(fù)氧對 BBB 體外模型的影響35-44
- 中文摘要35
- 英文摘要35-36
- 引言36-37
- 材料與方法37-38
- 結(jié)果38-40
- 討論40-42
- 參考文獻42-44
- 綜述一44-57
- 參考文獻50-57
- 綜述二57-63
- 參考文獻60-63
- 致謝63
【共引文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
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本文編號:357945
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