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OGD對(duì)BBB體外模型中內(nèi)皮細(xì)胞緊密連接蛋白及TEER的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-05-11 20:04

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【摘要】:目的:為了加深對(duì)血腦屏障的認(rèn)識(shí)與進(jìn)一步對(duì)其研究,構(gòu)建血腦屏障的體外模型. 方法:原代分離培養(yǎng)SD大鼠乳鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞(brain microvascularendothelial cells, BMVEC),采用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)和生長(zhǎng)規(guī)律,用免疫組化檢測(cè)緊密連接蛋白claudin-5和ZO-1.內(nèi)皮細(xì)胞與原代培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞在Transwell小室上建立BBB體外實(shí)驗(yàn)?zāi)P?用EVOM2觀察跨膜電阻(Trans-epitheliumelectrical resistant,TEER)的動(dòng)態(tài)變化,探討血腦屏障模型建立以及特性. 結(jié)果:BMVEC培養(yǎng)至融合以后具有典型的“鋪路石”樣外觀,claudin-5與Z0-1免疫組化證實(shí)細(xì)胞間形成緊密連接,單獨(dú)培養(yǎng)BMVEC的TEER值為(161.5±1.96) Ω×cm2,共培養(yǎng)體外模型的TEER值為(185.4±3.25) Ω×cm~2. 結(jié)論:建立的BBB體外模型在形態(tài)學(xué).電阻方面具備了BBB的基本特性,并且在星膠存在下共培養(yǎng)模型使BBB形態(tài)結(jié)構(gòu)更完整. 目的:觀察單純培養(yǎng)BMEC及其與AS共培養(yǎng)兩種模型條件下,缺氧-復(fù)氧時(shí)的變化 方法:分別對(duì)單獨(dú)培養(yǎng)BMEC和AS與內(nèi)皮共培養(yǎng)兩個(gè)BBB兩個(gè)體外模型.進(jìn)行缺氧-復(fù)氧處理(缺氧4h,復(fù)氧1h,3h,6h,12h,24h),觀察兩者TEER值與緊密連接蛋白的變化. 結(jié)果:單獨(dú)內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),缺氧后電阻值有顯著的下降,為(140.1±2.6) Ω*cm2 結(jié)論:缺氧后對(duì)單層BMEC的BBB模型有一定的破壞作用,在復(fù)氧后情況會(huì)有改善,但無(wú)法恢復(fù)到缺錢前狀態(tài).下一步進(jìn)行共培養(yǎng)模型的實(shí)驗(yàn).
【關(guān)鍵詞】:腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 共培養(yǎng) 血腦屏障 體外模型 TEER BBB MODEL OGD TEER ZO-1
【學(xué)位授予單位】:華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R329.2
【目錄】:
  • 全文縮略詞表5-6
  • 前言6-10
  • 參考文獻(xiàn)8-10
  • 第一部分 體外血腦屏障的建立10-35
  • 中文摘要10-11
  • ABSTRACT11-12
  • 引言12-13
  • 材料與方法13-22
  • 實(shí)驗(yàn)結(jié)果22-28
  • 討論28-32
  • 參考文獻(xiàn)32-35
  • 第二部分 缺氧-復(fù)氧對(duì) BBB 體外模型的影響35-44
  • 中文摘要35
  • 英文摘要35-36
  • 引言36-37
  • 材料與方法37-38
  • 結(jié)果38-40
  • 討論40-42
  • 參考文獻(xiàn)42-44
  • 綜述一44-57
  • 參考文獻(xiàn)50-57
  • 綜述二57-63
  • 參考文獻(xiàn)60-63
  • 致謝63

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 奚卉;;冰片促進(jìn)血腦屏障開(kāi)放機(jī)制的探討[J];安徽醫(yī)學(xué);2009年06期

2 彭鏡;尹飛;甘娜;張紅媛;;體外血腦屏障模型的建立[J];中國(guó)當(dāng)代兒科雜志;2005年06期

3 楊蓬勃;劉勇;;代謝型谷氨酸受體與神經(jīng)發(fā)生關(guān)系的研究進(jìn)展[J];神經(jīng)損傷與功能重建;2009年04期

4 夏蓉;劉曉東;馬長(zhǎng)清;;血腦屏障與藥物轉(zhuǎn)運(yùn)方法的研究進(jìn)展[J];貴州醫(yī)藥;2008年10期

5 汪灝;胡廣奮;謝飚;楊慧;喻寧芬;;基質(zhì)金屬蛋白酶及其抑制劑在RSV感染誘發(fā)哮喘中的作用[J];廣州醫(yī)藥;2013年06期

6 趙康峰;王,

本文編號(hào):357945


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