目的探討磷酸二酯酶（PDE）5抑制劑對異丙腎上腺素（Iso）所致的乳鼠心肌細胞肥大的保護作用。方法分離大鼠乳鼠心肌細胞,分為對照（Con）組, Iso組及異丙腎上腺素+西地那非（Iso+Sil）組,通過檢測各組細胞活力及乳酸脫氫酶（LDH）含量,確定Sil的后續(xù)實驗濃度,通過RT-PCR檢測心肌肥大指標(biāo)心房鈉尿肽（ANP）和β-肌球蛋白重鏈（β-MHC） mRNA含量、流式細胞計數(shù)檢測凋亡情況及Western blot檢測內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白（GRP）78和CCAAT增強子結(jié)合蛋白同源蛋白（CHOP）水平。結(jié)果與Con組相比,Iso組細胞活力降低（P<0. 01）,LDH的釋放增加（P<0. 05）。與Iso組相比,一定濃度Sil預(yù)處理可以提高細胞活力及減少LDH的釋放（P<0. 05）,在5μmol/L Sil預(yù)處理時達到最大效應(yīng)。與Con組相比,Iso組增加ANP和β-MHC mRNA的表達、上調(diào)凋亡比率以及增加GRP78和CHOP的蛋白水平。與Iso組相比,Sil預(yù)處理可以降低ANP和β-MHC mRNA的表達,下調(diào)凋亡比率以及抑制GRP78和CHO... 

【文章來源】：心臟雜志. 2019,31(05)

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不同濃度PDE5抑制劑Sil對細胞活力和LDH的影響

/LPDE5抑制劑Sil預(yù)處理后，LDH含量的水平降低(P＜0.05)，見圖1B。2．2PDE5抑制劑Sil對心肌肥厚的影響與Con組相比，Iso組提高心肌細胞中ANP和β-MHC的mＲNA含量(P＜0.05)，與Iso組相比，Sil預(yù)處理后可降低心肌細胞ANP和β-MHC的mＲNA含量(P＜0.05)，見圖2。圖1不同濃度PDE5抑制劑Sil對細胞活力和LDH的影響1:Con組;2:Iso組;3:2.5μmol/LSil;4:5μmol/LSil;5:10μmol/LSil。n=6。與Con組比較，aP＜0.05，bP＜0.01;與Iso組比較，cP＜0.05圖2PDE5抑制劑Sil對ANP和β-MHCmＲNA的影響1:Con組;2:Iso組;3:Iso+Sil組。n=6。與Con組比較，aP＜0.05;與Iso組比較，cP＜0.052．3PDE5抑制劑Sil對凋亡的影響流式細胞結(jié)果顯示，與Con相比，Iso組增加細胞凋亡的比率(P＜0.05)，與Iso組相比，經(jīng)Sil預(yù)處理后可降低細胞的凋亡比率(P＜0.05)，見圖3。·215·心臟雜志(ChinHeartJ)2019，31(5)

圖3PDE5抑制劑Sil對凋亡的影響1:Con組;2:Iso組;3:Iso+Sil組n=6。與Con組比較，aP＜0.05;與Iso組比較，cP＜0.052．4PDE5抑制劑Sil對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的影響與Con相比，Iso處理細胞后增加內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白GＲP78和CHOP的表達(P＜0.05)，經(jīng)Sil預(yù)處理后可減少細胞內(nèi)GＲP78和CHOP蛋白的水平(P＜0.05)，見圖4。圖4PDE5抑制劑Sil對GＲP78和CHOP蛋白表達的影響1:Con組;2:Iso組;3:Iso+Sil組。n=6。與Con組比較，aP＜0.05;與Iso組比較，cP＜0.053討論心肌肥厚是心臟的代償性反應(yīng)，主要是對缺血缺氧、壓力或容量超負荷等的應(yīng)激反應(yīng)，其主要的表現(xiàn)為心肌細胞的肥大、凋亡的增多以及心肌組織纖維化［8］。PDE5存在于人冠狀血管和肺血管系統(tǒng)中，在正常生理條件下，PDE5在心臟中的表達較低，而在HF患者中左心室心肌中PDE5高度表達，其表達量約是正常心肌的4～5倍［9］，抑制PDE5可改善糖尿病心肌病，阿霉素誘導(dǎo)的心肌病以及壓力超負荷引起的肥大等［10～12］。Sil為PDE5有效的特異性抑制劑，在動物模型中，Sil可以提高心梗后HF的心功能以及左室構(gòu)型［13］;在細胞模型中，Sil可以緩解由于低氧損傷引起心肌細胞活力的降低以及凋亡的增加［14］。但是，PDE5的作用及PDE5在心肌肥大的病理生理過程中的機制仍然未知。在本次研究中，通過Iso處理心肌細胞建立體外肥大模型，結(jié)果發(fā)現(xiàn)Iso處理心肌細胞后，降低細胞活力，提高LDH水平，而經(jīng)一定濃度的PDE5抑制劑Sil預(yù)處理心肌細胞后，可提高細胞活力，降低LDH的釋放，且在5μmol/LSil預(yù)處理時達到最大效應(yīng)，提示一定濃度的PDE5抑制劑Sil對受損心肌細胞?

【參考文獻】：
期刊論文
[1]心肌肥厚和心力衰竭時左心室收縮力及鈣瞬變的變化[J]. 李行,楊梓琪,張光宇,常旦琪,錢成,王揚淦.  武漢大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2017(05)
[2]白藜蘆醇對心肌肥大細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激時GRP78和GRP94表達的影響[J]. 王珺,肖薇,李波,金莉,王國忠,林巖.  中國病理生理雜志. 2016(08)
[3]黃芪總皂苷對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)的心肌細胞肥大模型的保護作用[J]. 顧靜,李海龍,劉凱,李應(yīng)東,明海霞,李楊,吳紅彥.  中國老年學(xué)雜志. 2015(17)



本文編號：3570466