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基于ERK1/2通路探討高壓氧對(duì)MCAO大鼠大腦皮質(zhì)損傷的作用及其機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2022-01-05 10:55
  目的:腦缺血后的梗死邊緣區(qū)組織供血供氧低下、能量缺失而將導(dǎo)致其中的神經(jīng)元死亡,為增強(qiáng)邊緣區(qū)組織的血氧供應(yīng),人們?cè)噲D使用高壓氧(Hyperbaricoxygen,HBO)作為一種供氧方案,然而其療效卻存在一定風(fēng)險(xiǎn),尚有一定爭(zhēng)論,并且其具體作用機(jī)制還不清楚。本研究通過觀察高壓氧對(duì)大腦中動(dòng)脈梗阻/再灌注(MCAO/R)大鼠模型的作用,檢測(cè)大腦皮質(zhì)梗死邊緣區(qū)的自噬發(fā)生情況,通過分析組織的氧化應(yīng)激與MAPK信號(hào)通路的活化對(duì)自噬的調(diào)節(jié)作用和Mcl-1的表達(dá),探討高壓氧對(duì)腦缺血損傷的作用機(jī)制。方法:將Wistaar大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(sham),MCAO模型對(duì)照組(MCAO)和高壓氧治療組(HBO)。采用線栓法制作腦缺血模型,造成1.5h缺血后拔出栓線進(jìn)行再灌注,并經(jīng)Longa評(píng)分達(dá)3分者進(jìn)入實(shí)驗(yàn)。HBO組于再灌注3h時(shí)給予絕對(duì)大氣壓(ATA)為3.0的純氧高壓并維持1h(不包含之前的10min升壓和之后的20min降壓),HBO與MCAO組于再灌注24h時(shí)處死。大鼠大腦組織冠狀切片經(jīng)紅四氮唑(TTC)染色和蘇木精-伊紅(H&E)染色法分別用于測(cè)量大腦梗死面積比和大腦受損情況;取大鼠大腦皮... 

【文章來(lái)源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:55 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
主要英文縮寫詞表
第1章 緒論
    1.1 腦缺血后梗死邊緣區(qū)神經(jīng)細(xì)胞損傷的經(jīng)典機(jī)制
        1.1.1 胞內(nèi)能量衰竭
        1.1.2 興奮性毒性
        1.1.3 氧化應(yīng)激
        1.1.4 缺血后炎癥
    1.2 自噬與腦缺血邊緣區(qū)神經(jīng)元損傷
    1.3 ERK1/2 與腦缺血邊緣區(qū)神經(jīng)元損傷
    1.4 高壓氧作為一種供氧方案的利與弊
    1.5 展望
第2章 材料與方法
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組
        2.1.3 主要藥品與來(lái)源
        2.1.4 主要儀器與來(lái)源
        2.1.5 主要溶液與配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 大鼠 MCAO 模型的制備
        2.2.2 高壓氧處理
        2.2.3 ERK1/2 特異性抑制劑 U0126 的使用
        2.2.4 紅四氮唑(TTC)染色
        2.2.5 H&E 染色
        2.2.6 Western Blotting
        2.2.7 RT-PCR
    2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 高壓氧對(duì) MCAO 大鼠腦組織的作用
        3.1.1 1%TTC 染色測(cè)得各組梗死面積比
        3.1.2 H&E 染色觀察各組腦皮質(zhì)形態(tài)學(xué)變化
    3.2 高壓氧對(duì) MCAO 大鼠腦皮質(zhì)組織自噬的影響
    3.3 高壓氧對(duì) MCAO 大鼠腦皮質(zhì)組織 ERK1/2 表達(dá)的影響
    3.4 高壓氧對(duì) MCAO 大鼠腦皮質(zhì)組織抗氧化相關(guān)蛋白的影響
    3.5 使用 ERK1/2 抑制劑 U0126 后高壓氧對(duì) MCAO 大鼠的作用
        3.5.1 大腦梗死面積變化情況
        3.5.2 腦皮質(zhì)組織中 ERK1/2 活化情況
        3.5.3 腦皮質(zhì)組織中自噬水平變化情況
    3.6 高壓氧對(duì) MCAO 大鼠腦皮質(zhì)中 Mcl-1 表達(dá)的影響
第4章 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介及科研成果
致謝



本文編號(hào):3570224

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