小鼠嗅皮層不同類神經(jīng)元功能可塑性在聯(lián)合式學(xué)習(xí)記憶中的作用
發(fā)布時(shí)間:2017-05-11 04:03
本文關(guān)鍵詞:小鼠嗅皮層不同類神經(jīng)元功能可塑性在聯(lián)合式學(xué)習(xí)記憶中的作用,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:建立小鼠聯(lián)合式學(xué)習(xí)記憶的動(dòng)物模型,通過(guò)T迷宮實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證信息提取是否具有互為性,采用電生理實(shí)驗(yàn)方法,研究小鼠嗅皮層谷氨酸能神經(jīng)元和GABA能神經(jīng)元內(nèi)在特性和突觸傳遞效應(yīng)的變化。 方法:1.條件反射模型的建立:選擇出生后10天的C57BL-6-gfp小鼠,以乙酸丁酯作為氣味源的無(wú)關(guān)刺激,經(jīng)過(guò)訓(xùn)練10天后變?yōu)闂l件刺激,非條件刺激是5Hz的觸須觸覺(jué)刺激,建立小鼠觸須觸覺(jué)和嗅覺(jué)的條件反射動(dòng)物模型。 2.行為學(xué)實(shí)驗(yàn):實(shí)驗(yàn)分為四組:空白對(duì)照組、嗅覺(jué)訓(xùn)練組、觸覺(jué)訓(xùn)練組、聯(lián)合訓(xùn)練組,應(yīng)用T迷宮檢測(cè)小鼠嗅覺(jué)功能變化,實(shí)驗(yàn)中給予小鼠5Hz的觸須觸覺(jué)刺激,小鼠回避乙酸丁酯的概率作為鑒別其嗅覺(jué)功能上調(diào)的指標(biāo)。 3.膜片鉗電生理實(shí)驗(yàn):實(shí)驗(yàn)分為聯(lián)合訓(xùn)練和空白對(duì)照兩組。取模型建立后小鼠和空白對(duì)照組小鼠,用異氟烷吸入麻醉,迅速將大腦分離,做冠狀切片(400μm),然后將腦片置于氧合的人工腦脊液(ASCF)中,25C下孵育1-2小時(shí)后轉(zhuǎn)移至灌流槽,31C下對(duì)腦片進(jìn)行灌流;采用IR-DIC光學(xué)顯微鏡(Nikon E600FN)熒光顯微鏡定位大腦嗅皮層谷氨酸能神經(jīng)元和GABA能神經(jīng)元;運(yùn)用Axoclamp-200B放大器,電流鉗和電壓鉗模式全細(xì)胞記錄方法研究小鼠大腦嗅皮層谷氨酸能神經(jīng)元和GABA能神經(jīng)元內(nèi)在特性(ARP;Vts;Vr;Input-Output;ISI)以及神經(jīng)元突觸傳遞效應(yīng)(sEPSC;sIPSC)的變化,數(shù)據(jù)輸入Clampex10.1進(jìn)行處理分析。 結(jié)果:1.行為學(xué)結(jié)果:(1)僅受嗅覺(jué)訓(xùn)練的小鼠實(shí)驗(yàn)中回避乙酸丁酯的概率高于空白對(duì)照組(P0.05)。(2)受觸須觸覺(jué)訓(xùn)練的小鼠實(shí)驗(yàn)中回避乙酸丁酯的概率與空白對(duì)照組比較無(wú)明顯差異(P0.05)。(3)小鼠在接受觸須-嗅覺(jué)聯(lián)合訓(xùn)練10天后能建立起以乙酸丁酯氣味刺激為條件刺激的條件反射。在給予非條件刺激時(shí),小鼠回避乙酸丁酯的概率明顯高于空白對(duì)照組(P0.01),且與嗅覺(jué)訓(xùn)練組相比有顯著性差異。 2.膜片鉗實(shí)驗(yàn)結(jié)果:(1)電流鉗模式實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),與空白對(duì)照組相比,受觸覺(jué)-嗅覺(jué)聯(lián)合訓(xùn)練的小鼠其谷氨酸能神經(jīng)元群集發(fā)放動(dòng)作電位的發(fā)放容量顯著增加,動(dòng)作電位間距ISI縮短(P0.05),閾電位(Vts)降低(P0.05),絕對(duì)不應(yīng)期縮短(P0.05),單位時(shí)間內(nèi)發(fā)放動(dòng)作電位的個(gè)數(shù)(Input and Output)增加(P0.05)。GABA能神經(jīng)元的群集發(fā)放動(dòng)作電位的發(fā)放容量顯著降低,動(dòng)作電位間距ISI延長(zhǎng)(P0.05),閾電位(Vts)升高(P0.05),絕對(duì)不應(yīng)期延長(zhǎng)(P0.05),單位時(shí)間內(nèi)發(fā)放動(dòng)作電位的個(gè)數(shù)(Input and Output)減少(P0.05)(2)電壓鉗模式實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),受觸覺(jué)-嗅覺(jué)聯(lián)合訓(xùn)練的小鼠與空白對(duì)照組相比,谷氨酸能神經(jīng)元的自發(fā)性興奮性突觸后電流sEPSCs的電流間距縮短(P0.05),電流幅度增加(P0.05),自發(fā)性抑制性突觸后電流sIPSCs的電流間距延長(zhǎng)(P0.05),電流幅度減小(P0.05)。GABA能神經(jīng)元的自發(fā)性興奮性突觸后電流sEPSCs的電流間距延長(zhǎng)(P0.05),電流幅度減小(P0.05)。 結(jié)論:1.小鼠受到重復(fù)嗅覺(jué)刺激后敏感性增加,可能發(fā)生了易化性的可塑性變化。 2.小鼠在受到聯(lián)合訓(xùn)練后,,形成了聯(lián)合記憶,在給予非條件刺激時(shí),小鼠回避乙酸丁酯的概率明顯省高,這說(shuō)明聯(lián)合式學(xué)習(xí)記憶中信息提取具有互為性。3.嗅皮層谷氨酸能神經(jīng)元功能上調(diào)和GABA能神經(jīng)元功能下調(diào)導(dǎo)致聯(lián)合訓(xùn)練組的小鼠嗅覺(jué)功能增強(qiáng)。
【關(guān)鍵詞】:聯(lián)合式學(xué)習(xí)記憶 條件反射 嗅皮層 谷氨酸能神經(jīng)元 GABA能神經(jīng)元 T迷宮 全細(xì)胞記錄
【學(xué)位授予單位】:蚌埠醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R338.1
【目錄】:
- 中文摘要5-7
- Abstract7-9
- 引言9-11
- 材料與方法11-17
- 結(jié)果17-36
- 討論36-40
- 結(jié)論40-41
- 參考文獻(xiàn)41-43
- 致謝43-44
- 附錄 A44-45
- 附錄 B45-47
- 附錄 C47-48
- 附錄 D48-55
- 參考文獻(xiàn)53-55
【參考文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條
1 李軒;范鄭麗;范蕊;隋建峰;;豚鼠雙任務(wù)眨眼條件反射中的聽(tīng)覺(jué)驚嚇?lè)瓷涮卣鲄?shù)及其對(duì)眨眼條件反射的影響[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2011年20期
2 張浪千;蔣政;胡博;隋建峰;;清醒制動(dòng)家貓條件化瞳孔擴(kuò)大反射的建立及其習(xí)得規(guī)律研究[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2013年20期
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本文關(guān)鍵詞:小鼠嗅皮層不同類神經(jīng)元功能可塑性在聯(lián)合式學(xué)習(xí)記憶中的作用,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號(hào):356180
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