發(fā)布時間：2021-12-25 07:38

　　目的 建立定量黑猩猩腺病毒68型（chimpanzee adenovirus type 68,AdC68）含量的雙抗體夾心ELISA,并驗證其可行性。方法 用表達綠色熒光蛋白（green fluorescence protein,GFP）的非復制型AdC68（AdC68GFP）感染HEK293細胞,收獲病變細胞并進行超速離心純化AdC68GFP。用純化AdC68GFP免疫家兔制備抗AdC68GFP抗體。以抗AdC68GFP抗體為包被抗體,辣根過氧化物酶標記的抗腺病毒HEXON IgG為酶標抗體,建立雙抗體夾心ELISA,確定該法的線性范圍,并驗證該法的準確度、精密度、專屬性和適用性。結果 純化AdC68GFP的蛋白濃度為38.8 μg/ml,其中HEK293細胞蛋白濃度低于0.3 μg/ml。雙抗體夾心ELISA的最適包被抗體和酶標抗體濃度分別為1∶50和1∶500。該法的線性范圍為0.06～3.88 μg/ml,線性相關系數為0.999 6。高、低濃度AdC68GFP樣品的回收率分別為93.17%和94.33%,變異系數分別為6.72%和3.44%。該法可特異性檢測AdC68GFP抗... 

【文章來源】：國際生物制品學雜志. 2019,42(01)

【文章頁數】：5 頁


本文編號：3552055