本文關(guān)鍵詞：不同濃度的胎牛血清對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞純度及周期的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的比較含有體積分?jǐn)?shù)為0.10、0.15、0.20的胎牛血清(FBS)的完全培養(yǎng)基對(duì)體外培養(yǎng)的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)純度及細(xì)胞周期的影響,尋求適宜干細(xì)胞培養(yǎng)的FBS濃度。方法用頸椎脫臼法處死SD大鼠,采用全骨髓貼壁法分離培養(yǎng)大鼠BMSCs。實(shí)驗(yàn)分為A、B、C 3組,分別為FBS體積分?jǐn)?shù)是0.10、0.15、0.20的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)的BMSCs,比較各組細(xì)胞在第2、3、4、5代(P2,P3,P4,P5)的CD45、CD29、CD90、CD44的表達(dá)情況;消化A組P3細(xì)胞,用3種不同濃度的完全培養(yǎng)基連續(xù)培養(yǎng)4 d,用流式細(xì)胞儀測(cè)其在培養(yǎng)后的24、48、72、96 h的細(xì)胞周期;收集P3 BMSCs制備細(xì)胞懸液接種到6塊96孔板,每塊板接種的BMSCs分別用FBS體積分?jǐn)?shù)是0.10、0.15、0.20的完全培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),每天取1塊培養(yǎng)板用CCK-8檢測(cè)其吸光度值(OD)。結(jié)果 CD45陰性表達(dá),CD29、CD90、CD44陽性表達(dá),3種完全培養(yǎng)基培養(yǎng)的BMSCs的表面標(biāo)志物在前2代時(shí)差別較大,但在P3,P4時(shí)差別已較少,P4時(shí)均可以獲得較純的BMSCs;細(xì)胞周期結(jié)果顯示,在同一時(shí)間點(diǎn),G0/G1期:A、B、C 3組隨著FBS濃度的增加,G0/G1期降低且差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;G2/M期:在培養(yǎng)后的24 h,A、B、C 3組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05,F=12.412),但隨著時(shí)間的延長(zhǎng),差異消失;S期,3組均無差別;S+G2/M期隨FBS濃度的增加而增高。細(xì)胞活力結(jié)果顯示,在24 h時(shí)A、B、C 3組的OD值依次增大,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05,F=5.002),隨時(shí)間的延長(zhǎng)3組之間無明顯差異。結(jié)論這3種培養(yǎng)基在P4能獲得較純的BMSCs;細(xì)胞周期及活力結(jié)果顯示,3種完全培養(yǎng)基均能促進(jìn)BMSCs的增長(zhǎng),3組之間不存在差異。體積分?jǐn)?shù)為0.10的FBS已滿足BMSCs的分離和擴(kuò)增,要想在短期內(nèi)獲得較純的BMSCs,原代培養(yǎng)使用體積分?jǐn)?shù)為0.15,傳代用0.10 FBS的完全培養(yǎng)基。
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院 安徽醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院 安徽省口腔疾病研究中心實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 胎牛血清 細(xì)胞周期 表面標(biāo)志
【基金】：國家自然科學(xué)基金(編號(hào):81371114) 安徽省自然科學(xué)基金(編號(hào):11040606M173) 安徽醫(yī)科大學(xué)博士科研資助基金(編號(hào):XJ201034) 安徽高校省級(jí)自然科學(xué)研究重點(diǎn)項(xiàng)目(編號(hào):KJ2013A154)
【分類號(hào)】：R329
【正文快照】： 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)是成熟體細(xì)胞的亞群,又稱為基質(zhì)干細(xì)胞,是治療中應(yīng)用間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymalstem cells,MSCs)的基礎(chǔ)。MSCs具有黏附能力并且能夠在體外擴(kuò)增;多分化潛能:在特定的生理或是實(shí)驗(yàn)條件下能分化為特定的功能細(xì)胞、組織、器官

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