本文關鍵詞：Nischarin蛋白及其下游信號分子在大鼠腦發(fā)育過程中的表達及意義，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：腦發(fā)育過程中,長期精確的發(fā)育調控過程形成了腦獨特的構造.Nischarin是近年來發(fā)現(xiàn)的一種新型蛋白。在現(xiàn)階段,關于Nischarin的研究主要集中在抑制腫瘤細胞遷移、侵襲等功能,然而對于Nischarin在神經系統(tǒng)中所起作用方面的研究較少�；罨っ�(P21-activated kinases, PAK)和LIM激酶(LIM kinases, LIMK)是Rho-GTPases家族的下游分子,對神經系統(tǒng)的功能有重要影響。有研究發(fā)現(xiàn),Nischarin可以抑制PAKl和LIMK1的活性,并且通過Rho GTPase信號通路引發(fā)骨架蛋白重組,從而抑制腫瘤細胞遷移。近期研究還發(fā)現(xiàn),Nischarin在大鼠腦組織中高度表達,并且在腦區(qū)的分布呈現(xiàn)區(qū)域化。探索腦正常發(fā)育過程的分子機制,對于神經系統(tǒng)相關疾病的診斷和治療具有重要的意義。本實驗研究Nischarin及其下游PAK, LIMK、confilin在大鼠腦發(fā)育過程中的變化及其意義。方法：采用western blot、熒光定量RT-PCR技術檢測在鼠胚胎及出生后不同發(fā)育時間腦組織中Nischarin表達、PAK磷酸化、LIMK磷酸化及cofilin磷酸化水平的改變；免疫共沉淀等技術研究大腦皮層中Nischarin與PAK以及LIMK的互作關系；在Neuro-2a(小鼠腦神經瘤細胞)細胞上研究Nischarin磷酸化調控PAK、LIMK、cofilin的機制；通過細胞劃痕技術研究PC-12(腎上腺嗜鉻細胞瘤)細胞上Nischarin對細胞遷移能力的影響。結果：1)Nischarin的蛋白和mRNA水平在大鼠腦皮層、海馬和小腦中,呈現(xiàn)發(fā)育第四周增高的趨勢；2)PAK蛋白的磷酸化水平在大鼠腦皮層和海馬發(fā)育過程中,在出生后14天至28天呈現(xiàn)減少的趨勢；3)LIMK蛋白的磷酸化水平在大鼠腦皮層和海馬發(fā)育過程中,在出生后14天至28天隨發(fā)育進程呈現(xiàn)減少的趨勢；LIMK蛋白的磷酸化水平在大鼠小腦發(fā)育過程中,在出生后14天與28天下降；4)cofilin蛋白的磷酸化水平在大鼠腦皮層和海馬發(fā)育過程中,在出生后21天到28天磷酸化水平下降；5)大鼠大腦皮層中,存在PAK和Nischarin的穩(wěn)定結合以及LIMK和Nischarin的穩(wěn)定結合；6)Neuro-2a細胞上,Nischarin對PAK的磷酸化有直接抑制作用,但不能直接抑制LIMK和cofilin的磷酸化；7)在體外培養(yǎng)的神經細胞PC-12上Nischarin可抑制其遷移能力。結論：通過實驗我們認為Nischarin可能通過調控PAK及其下游LIMK和cofilin蛋白的磷酸化以及調節(jié)神經元的遷移,參與大鼠腦的正常發(fā)育過程。
【關鍵詞】：Nischarin 腦發(fā)育 磷酸化調控 Rho GTPases
【學位授予單位】：浙江大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R392
【目錄】：

• 致謝4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 縮寫、符號清單、術語9-10
• 目次10-11
• 1 引言11-15
• 2 材料和方法15-27
• 2.1 實驗材料15-19
• 2.2 實驗方法19-27
• 3 實驗結果27-45
• 3.1 Nischarin在腦發(fā)育不同階段的動態(tài)表達27-32
• 3.2 PAK蛋白的磷酸化水平在腦發(fā)育不同階段的動態(tài)變化32-34
• 3.3 LIMK蛋白的磷酸化水平在腦發(fā)育不同階段的動態(tài)變化34-37
• 3.4 cofilin蛋白的磷酸化水平在腦發(fā)育不同階段的動態(tài)變化37-39
• 3.5 大腦皮層中PAK和Nischarin蛋白的相互作用39-40
• 3.6 大腦皮層中LIMK和Nischarin蛋白的相互作用40-41
• 3.7 Nischarin對其下游蛋白PAK、LIMK及cofilin活性的調控41-43
• 3.8 Nischarin對體外培養(yǎng)神經細胞PC-12遷移性能的影響43-45
• 4 討論45-50
• 5 結論50-51
• 參考文獻51-55
• 綜述55-67
• 參考文獻63-67
• 作者簡歷67

【共引文獻】

中國期刊全文數據庫 前10條

1 李深;秦華民;藍曉艷;王蘇平;;神經細胞粘附分子通過P21活化激酶1促進神經突生長[J];中國組織化學與細胞化學雜志;2013年05期

2 余長松;賈剛;鄧秋紅;陳小玲;王康寧;;Ras同源蛋白A-Ras同源蛋白激酶信號轉導途徑對上皮細胞緊密連接的調節(jié)作用[J];動物營養(yǎng)學報;2013年09期

3 劉亞偉;李翠;何敏毅;趙亮;漆松濤;陳劍榮;;Limk1不同突變體HA融合表達載體構建及在細胞內定位[J];貴陽醫(yī)學院學報;2014年04期

4 Robert Brommage;Jeff Liu;Gwenn M Hansen;Laura L Kirkpatrick;David G Potter;Arthur T Ss;Brian Zambrowicz;David R Powell;Peter Vogel;;High-throughput screening of mouse gene knockouts identifies established and novel skeletal phenotypes[J];Bone Research;2014年03期

5 劉俊超;潘亞萍;;細胞周期依賴性激酶抑制蛋白和激酶抑制蛋白及其與口腔疾病[J];國際口腔醫(yī)學雜志;2014年06期

6 吳勇軍;唐儀;李箏;張漾;趙毅;伍鎮(zhèn)江;蘇琦;;胃癌中LIMK1的表達及其病理意義[J];臨床與實驗病理學雜志;2011年06期

7 劉齋;趙彥昭;何麗;任慶云;王偉秀;;大腦皮層發(fā)育畸形的磁共振成像診斷[J];臨床薈萃;2013年10期

8 章文賢;蔣詠梅;賀望興;郭文燕;黃曉菊;鄭素云;;靈芝14-3-3蛋白基因的電子克隆與表達分析[J];華北農學報;2013年05期

9 蔡輝;張培勇;董曉蕾;趙凌杰;趙智明;;Rho激酶抑制劑對壓力超負荷大鼠血管緊張素(1-7)的影響[J];醫(yī)學研究生學報;2013年11期

10 姜立敏;任鴻坤;高迎春;;PCI術后心肌損傷與Rho激酶抑制劑-法舒地爾[J];內蒙古醫(yī)學雜志;2014年02期

中國重要會議論文全文數據庫 前1條

1 蔡輝;趙凌杰;張靜;趙智明;沈思鈺;;法舒地爾升高壓力超負荷大鼠心肌血管緊張素轉化酶2的表達[A];第九次全國中西醫(yī)結合基礎理論研究學術研討會論文匯編[C];2013年

中國博士學位論文全文數據庫 前10條

1 張t ;羅格列酮抑制胃癌細胞系的增殖、侵襲與逆轉耐藥機制研究[D];南華大學;2011年

2 林汝仙;電離輻射相關分子的高通量篩選與驗證[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2007年

3 王楊;鈣離子介導的信號通路在人成骨肉瘤細胞遷移中的作用[D];吉林大學;2010年

4 董青;LIMK1/cofilin信號通路調控BDNF誘導的軸突生長和厭惡性記憶消退的機制研究[D];山東大學;2013年

5 周淑媛;低切應力對血管內皮屏障功能的調控及SL提取物的干預機制[D];中國中醫(yī)科學院;2013年

6 張磊;DMOG對鼠BMSCs凋亡與成骨分化影響及在兔激素性股骨頭壞死修復中作用的實驗研究[D];昆明醫(yī)科大學;2013年

7 邵敏;Caveolin-1在TNF-α誘導大鼠肺微血管內皮細胞通透性變化中的作用機制研究[D];安徽醫(yī)科大學;2013年

8 李大鵬;碘過量通過誘導Th17細胞分化促進橋本氏甲狀腺炎發(fā)病機制的研究[D];華中科技大學;2013年

9 馮飛躍;第七版國際肺癌TNM分期系統(tǒng)的應用和ROCK2在非小細胞肺癌中表達水平及其臨床意義的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2012年

10 孫丹妮;皮質發(fā)育畸形大鼠皮質神經元AIS的可塑性研究[D];中南大學;2013年

中國碩士學位論文全文數據庫 前10條

1 劉燦;羅格列酮抑制人胃癌細胞遷移轉移及可能機制[D];南華大學;2011年

2 史玲;二烯丙基二硫下調LIMK1抑制人結腸癌SW480細胞遷移與侵襲[D];南華大學;2011年

3 楊福春;ROCK亞型在血管平滑肌細胞遷移和增殖中的作用[D];大連醫(yī)科大學;2009年

4 張鵬;Rho激酶抑制劑對小鼠胚胎干細胞分離與生物學特性的影響[D];河北農業(yè)大學;2010年

5 顏鴻飛;組織芯片檢測LIMK1、uPAR在大腸癌中表達的臨床病理意義[D];南華大學;2009年

6 馬艷華;二烯丙基二硫下調LIMK1抑制人胃癌細胞增殖、遷移及侵襲[D];南華大學;2010年

7 麻曉燕;激素抵抗型哮喘治療反應性與外周血絲切蛋白cofilin-1表達的相關性分析[D];南方醫(yī)科大學;2012年

8 于曉云;骨髓間充質干細胞移植對慢性腦缺血大鼠海馬區(qū)Cdc42表達及認知功能的影響[D];鄭州大學;2013年

9 王曼;磁源性影像在局灶性鬧皮質發(fā)育不良患者癲癇灶定位中應用[D];河北醫(yī)科大學;2013年

10 王天魁;嗎啡依賴、戒斷大鼠不同腦區(qū)肌動蛋白重構及其機制研究[D];河北醫(yī)科大學;2013年

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