本文關(guān)鍵詞：SD乳鼠髁突軟骨細(xì)胞和鼻中隔軟骨細(xì)胞生物學(xué)特性的比較研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：[目的]建立SD乳鼠髁突軟骨細(xì)胞(mandibular condylar chondrocyte,mcc)和鼻中隔軟骨細(xì)胞(nasal septal chondrocyte, nsc)原代培養(yǎng)模型,觀察髁突軟骨細(xì)胞和鼻中隔軟骨細(xì)胞生物學(xué)特性的差異,為探討髁突軟骨和鼻中隔軟骨的形成過程和在頜面部生長(zhǎng)發(fā)育中的作用機(jī)制提供理論基礎(chǔ)。 [方法]用機(jī)械分離和酶聯(lián)消化法將出生1-3天SD乳鼠的髁突軟骨細(xì)胞和鼻中隔軟骨細(xì)胞在相同培養(yǎng)條件下進(jìn)行原代培養(yǎng),分別在培養(yǎng)第3天、5天、8天、15天在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)及生長(zhǎng)狀況。Ⅱ型膠原免疫組化染色和甲苯胺藍(lán)染色鑒定軟骨細(xì)胞并觀察兩種軟骨細(xì)胞外基質(zhì)的合成。噻唑藍(lán)(methyl hiazolyl tetraxolium, MTT)比色法繪制兩種細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線。劃痕實(shí)驗(yàn)觀察兩種細(xì)胞劃痕24h后細(xì)胞遷移的能力。實(shí)時(shí)熒光定量PCR (real time quantitative polymerase chain reaction, RT-PCR)方法檢測(cè)上述四個(gè)時(shí)間點(diǎn)軟骨細(xì)胞外基質(zhì)中Ⅱ型膠原(type Ⅱ collagen, Col Ⅱ)和聚集蛋白多糖(aggrecan, AGG) mRNA的表達(dá)。 [結(jié)果]采用相同的消化方式及培養(yǎng)條件成功培養(yǎng)出原代髁突軟骨細(xì)胞和鼻中隔軟骨細(xì)胞,其形態(tài)學(xué)和生物學(xué)特性均符合軟骨細(xì)胞特性。兩種軟骨細(xì)胞在第5天、8天、15天時(shí)進(jìn)行Ⅱ型膠原免疫組化染色和甲苯胺藍(lán)染色,染色結(jié)果均呈陽(yáng)性,證實(shí)培養(yǎng)的細(xì)胞為所需的軟骨細(xì)胞。兩種軟骨細(xì)胞染色陽(yáng)性率分別隨培養(yǎng)天數(shù)增加而逐漸增強(qiáng)；相同時(shí)間點(diǎn),兩種染色中鼻中隔軟骨細(xì)胞陽(yáng)性表達(dá)均高于髁突軟骨細(xì)胞。MTT比色法檢測(cè)出兩種軟骨細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線基本一致,鼻中隔軟骨細(xì)胞的增殖能力較髁突軟骨細(xì)胞強(qiáng)。兩種軟骨細(xì)胞劃痕后24h觀察到鼻中隔軟骨細(xì)胞遷移至劃痕處的數(shù)量明顯較髁突軟骨細(xì)胞多,說明鼻中隔軟骨細(xì)胞的遷移能力強(qiáng)于髁突軟骨細(xì)胞。兩種軟骨細(xì)胞在培養(yǎng)第3天、5天、8天、15天時(shí)對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)中的Ⅱ型膠原和aggrecan mRNA的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè),發(fā)現(xiàn)兩種軟骨細(xì)胞Ⅱ型膠原和aggrecan mRNA的表達(dá)量在前三個(gè)時(shí)間點(diǎn)均隨細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間的增加而增高,第15天時(shí)Ⅱ型膠原、aggrecan mRNA的表達(dá)量下降；相同時(shí)間點(diǎn)鼻中隔軟骨細(xì)胞合成Ⅱ型膠原、aggrecan的能力均高于髁突軟骨細(xì)胞。 [結(jié)論]1.本實(shí)驗(yàn)采用相同的消化方式及培養(yǎng)條件成功建立了SD乳鼠髁突軟骨細(xì)胞和鼻中隔軟骨細(xì)胞的原代培養(yǎng)模型；2.鼻中隔軟骨細(xì)胞的增殖和遷移能力均強(qiáng)于髁突軟骨細(xì)胞；3.髁突軟骨細(xì)胞和鼻中隔軟骨細(xì)胞Ⅱ型膠原和aggrecan mRNA的表達(dá)變化與體內(nèi)胚胎期軟骨形成過程中Ⅱ型膠原和aggrecan mRNA的表達(dá)變化基本一致,鼻中隔軟骨細(xì)胞Ⅱ型膠原和aggrecan的表達(dá)量多于髁突軟骨細(xì)胞,提示這兩種軟骨細(xì)胞外基質(zhì)的差異是導(dǎo)致兩種軟骨的功能特性及對(duì)局部生物力學(xué)的反應(yīng)不同的原因之一。髁突軟骨細(xì)胞和鼻中隔軟骨細(xì)胞在增殖、遷移以及細(xì)胞外基質(zhì)表達(dá)方面均存在差異,這些可能與髁突軟骨和鼻中隔軟骨形成機(jī)制和生長(zhǎng)特性的不同密切相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：髁突軟骨細(xì)胞 鼻中隔軟骨細(xì)胞 軟骨形成 生物學(xué)特性
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R329.2
【目錄】：

• 英文縮寫詞表5-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 引言10-13
• 第一部分 SD乳鼠髁突軟骨細(xì)胞和鼻中隔軟骨細(xì)胞的原代培養(yǎng)與鑒定13-27
• 材料13-14
• 方法14-16
• 結(jié)果16-23
• 討論23-26
• 結(jié)論26-27
• 第二部分 SD乳鼠髁突軟骨細(xì)胞和鼻中隔軟骨細(xì)胞的增殖和遷移27-33
• 材料27-28
• 方法28-29
• 結(jié)果29-31
• 討論31-32
• 結(jié)論32-33
• 第三部分 SD乳鼠髁突軟骨細(xì)胞和鼻中隔軟骨細(xì)胞Ⅱ型膠原、Aggrecan的表達(dá)差異33-44
• 材料34-35
• 方法35-38
• 結(jié)果38-41
• 討論41-43
• 結(jié)論43-44
• 全文總結(jié)44-45
• 參考文獻(xiàn)45-49
• 文獻(xiàn)綜述49-58
• 參考文獻(xiàn)54-58
• 發(fā)表文章58-59
• 致謝59-60
• 病例展示60-79

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 李艦;許艷華;;鼻中隔軟骨組織工程中細(xì)胞外基質(zhì)的研究[J];國(guó)際病理科學(xué)與臨床雜志;2013年02期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 魯艷平;HGF、ERK/MAPK、ESM和CNTF信號(hào)通路在大鼠肝再生中對(duì)肝細(xì)胞分化的調(diào)節(jié)作用研究[D];河南師范大學(xué);2013年

2 龔明福;GoldMag納米粒對(duì)HUVECs生物活性影響及體外MR成像研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

3 陳開杰;姜黃素衍生物C086抗腫瘤轉(zhuǎn)移作用及對(duì)裸鼠移植瘤生長(zhǎng)的影響[D];福建醫(yī)科大學(xué);2013年

4 楊磊;ELMO2在肝癌細(xì)胞遷移運(yùn)動(dòng)和侵襲中的功能[D];天津醫(yī)科大學(xué);2013年

  本文關(guān)鍵詞：SD乳鼠髁突軟骨細(xì)胞和鼻中隔軟骨細(xì)胞生物學(xué)特性的比較研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：349018