本文關鍵詞：SD乳鼠髁突軟骨細胞和鼻中隔軟骨細胞生物學特性的比較研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：[目的]建立SD乳鼠髁突軟骨細胞(mandibular condylar chondrocyte,mcc)和鼻中隔軟骨細胞(nasal septal chondrocyte, nsc)原代培養(yǎng)模型,觀察髁突軟骨細胞和鼻中隔軟骨細胞生物學特性的差異,為探討髁突軟骨和鼻中隔軟骨的形成過程和在頜面部生長發(fā)育中的作用機制提供理論基礎。 [方法]用機械分離和酶聯(lián)消化法將出生1-3天SD乳鼠的髁突軟骨細胞和鼻中隔軟骨細胞在相同培養(yǎng)條件下進行原代培養(yǎng),分別在培養(yǎng)第3天、5天、8天、15天在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)及生長狀況。Ⅱ型膠原免疫組化染色和甲苯胺藍染色鑒定軟骨細胞并觀察兩種軟骨細胞外基質(zhì)的合成。噻唑藍(methyl hiazolyl tetraxolium, MTT)比色法繪制兩種細胞的生長曲線。劃痕實驗觀察兩種細胞劃痕24h后細胞遷移的能力。實時熒光定量PCR (real time quantitative polymerase chain reaction, RT-PCR)方法檢測上述四個時間點軟骨細胞外基質(zhì)中Ⅱ型膠原(type Ⅱ collagen, Col Ⅱ)和聚集蛋白多糖(aggrecan, AGG) mRNA的表達。 [結果]采用相同的消化方式及培養(yǎng)條件成功培養(yǎng)出原代髁突軟骨細胞和鼻中隔軟骨細胞,其形態(tài)學和生物學特性均符合軟骨細胞特性。兩種軟骨細胞在第5天、8天、15天時進行Ⅱ型膠原免疫組化染色和甲苯胺藍染色,染色結果均呈陽性,證實培養(yǎng)的細胞為所需的軟骨細胞。兩種軟骨細胞染色陽性率分別隨培養(yǎng)天數(shù)增加而逐漸增強；相同時間點,兩種染色中鼻中隔軟骨細胞陽性表達均高于髁突軟骨細胞。MTT比色法檢測出兩種軟骨細胞的生長曲線基本一致,鼻中隔軟骨細胞的增殖能力較髁突軟骨細胞強。兩種軟骨細胞劃痕后24h觀察到鼻中隔軟骨細胞遷移至劃痕處的數(shù)量明顯較髁突軟骨細胞多,說明鼻中隔軟骨細胞的遷移能力強于髁突軟骨細胞。兩種軟骨細胞在培養(yǎng)第3天、5天、8天、15天時對細胞外基質(zhì)中的Ⅱ型膠原和aggrecan mRNA的表達進行檢測,發(fā)現(xiàn)兩種軟骨細胞Ⅱ型膠原和aggrecan mRNA的表達量在前三個時間點均隨細胞培養(yǎng)時間的增加而增高,第15天時Ⅱ型膠原、aggrecan mRNA的表達量下降；相同時間點鼻中隔軟骨細胞合成Ⅱ型膠原、aggrecan的能力均高于髁突軟骨細胞。 [結論]1.本實驗采用相同的消化方式及培養(yǎng)條件成功建立了SD乳鼠髁突軟骨細胞和鼻中隔軟骨細胞的原代培養(yǎng)模型；2.鼻中隔軟骨細胞的增殖和遷移能力均強于髁突軟骨細胞；3.髁突軟骨細胞和鼻中隔軟骨細胞Ⅱ型膠原和aggrecan mRNA的表達變化與體內(nèi)胚胎期軟骨形成過程中Ⅱ型膠原和aggrecan mRNA的表達變化基本一致,鼻中隔軟骨細胞Ⅱ型膠原和aggrecan的表達量多于髁突軟骨細胞,提示這兩種軟骨細胞外基質(zhì)的差異是導致兩種軟骨的功能特性及對局部生物力學的反應不同的原因之一。髁突軟骨細胞和鼻中隔軟骨細胞在增殖、遷移以及細胞外基質(zhì)表達方面均存在差異,這些可能與髁突軟骨和鼻中隔軟骨形成機制和生長特性的不同密切相關。
【關鍵詞】：髁突軟骨細胞 鼻中隔軟骨細胞 軟骨形成 生物學特性
【學位授予單位】：昆明醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R329.2
【目錄】：

• 英文縮寫詞表5-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 引言10-13
• 第一部分 SD乳鼠髁突軟骨細胞和鼻中隔軟骨細胞的原代培養(yǎng)與鑒定13-27
• 材料13-14
• 方法14-16
• 結果16-23
• 討論23-26
• 結論26-27
• 第二部分 SD乳鼠髁突軟骨細胞和鼻中隔軟骨細胞的增殖和遷移27-33
• 材料27-28
• 方法28-29
• 結果29-31
• 討論31-32
• 結論32-33
• 第三部分 SD乳鼠髁突軟骨細胞和鼻中隔軟骨細胞Ⅱ型膠原、Aggrecan的表達差異33-44
• 材料34-35
• 方法35-38
• 結果38-41
• 討論41-43
• 結論43-44
• 全文總結44-45
• 參考文獻45-49
• 文獻綜述49-58
• 參考文獻54-58
• 發(fā)表文章58-59
• 致謝59-60
• 病例展示60-79

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 李艦;許艷華;;鼻中隔軟骨組織工程中細胞外基質(zhì)的研究[J];國際病理科學與臨床雜志;2013年02期

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 魯艷平;HGF、ERK/MAPK、ESM和CNTF信號通路在大鼠肝再生中對肝細胞分化的調(diào)節(jié)作用研究[D];河南師范大學;2013年

2 龔明福;GoldMag納米粒對HUVECs生物活性影響及體外MR成像研究[D];第三軍醫(yī)大學;2013年

3 陳開杰;姜黃素衍生物C086抗腫瘤轉移作用及對裸鼠移植瘤生長的影響[D];福建醫(yī)科大學;2013年

4 楊磊;ELMO2在肝癌細胞遷移運動和侵襲中的功能[D];天津醫(yī)科大學;2013年

  本文關鍵詞：SD乳鼠髁突軟骨細胞和鼻中隔軟骨細胞生物學特性的比較研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：349018