本文關(guān)鍵詞：粒細(xì)胞集落刺激因子通過(guò)調(diào)節(jié)小膠質(zhì)細(xì)胞活化改善缺氧致腦室周圍白質(zhì)損傷，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：粒細(xì)胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor,G-CSF)是一類誘導(dǎo)定向祖細(xì)胞向中性粒細(xì)胞分化的造血生長(zhǎng)因子。作為治療先天性粒細(xì)胞減少癥、控制化療后粒細(xì)胞減少造成的感染的藥物,已被臨床使用二十年。臨床研究認(rèn)為,G-CSF安全有效,副作用小。最近的研究表明,G-CSF可以抗炎、抗凋亡,誘導(dǎo)神經(jīng)和血管再生,從而促進(jìn)神經(jīng)組織結(jié)構(gòu)和功能的恢復(fù),對(duì)于神經(jīng)細(xì)胞有營(yíng)養(yǎng)作用,對(duì)于神經(jīng)損傷有保護(hù)作用,但其神經(jīng)保護(hù)的具體機(jī)制尚不明確。 最新研究發(fā)現(xiàn),當(dāng)嚙齒類中樞神經(jīng)系統(tǒng)罹受缺血-再灌注損傷時(shí),神經(jīng)細(xì)胞上粒細(xì)胞集落刺激因子受體(granulocyte colony-stimulating factor receptor G-CSFR)表達(dá)上調(diào),G-CSF分泌也增加。國(guó)外研究顯示,在大鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育的各個(gè)階段,G-CSF和G-CSFR表達(dá)于各區(qū)域有不等量分布,并在小膠質(zhì)細(xì)胞有表達(dá)。這表明神經(jīng)損傷時(shí),G-CSF可能對(duì)其有修護(hù)功能,我們猜測(cè),這一功能可以通過(guò)影響小膠質(zhì)細(xì)胞來(lái)發(fā)揮。這也將為G-CSF治療神經(jīng)損傷有關(guān)疾病提供理論依據(jù)。 腦室周圍白質(zhì)損傷(periventricular white matter damage,PWMD)是早產(chǎn)兒腦損傷的最重要的一種病理類型,它包括腦室周圍白質(zhì)區(qū)出血梗死、腦室周圍白質(zhì)軟化和發(fā)生在晚期的腦室擴(kuò)張,極大地影響新生兒出生后的生命質(zhì)量。大量小膠質(zhì)細(xì)胞在發(fā)育中的腦室周圍白質(zhì)中分布,并在PWMD中起著至關(guān)重要的作用。當(dāng)中樞神經(jīng)系統(tǒng)遭受到傷害刺激時(shí),作為存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的固有免疫細(xì)胞,小膠質(zhì)細(xì)胞被迅速激活并發(fā)揮雙重作用。一方面,激活的小膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。另一方面,損傷和多種炎癥因子的刺激導(dǎo)致小膠質(zhì)細(xì)胞釋放細(xì)胞毒性物質(zhì),而后造成神經(jīng)功能紊亂、神經(jīng)元和少突膠質(zhì)細(xì)胞等細(xì)胞的死亡,進(jìn)一步加重機(jī)體損傷。根據(jù)Gordon S提出的分型理論,激活的巨噬細(xì)胞可分為經(jīng)典激活型(M1型)和選擇激活型(M2型),兩型細(xì)胞具有截然不同的免疫學(xué)表型,發(fā)揮的功能也大相徑庭。M1型細(xì)胞通過(guò)分泌細(xì)胞因子促進(jìn)炎癥的發(fā)生,并有抗腫瘤作用。M2型抑制炎癥反應(yīng)、促進(jìn)組織再生修復(fù)。本研究主要觀察粒細(xì)胞集落刺激因子通過(guò)影響小膠質(zhì)細(xì)胞的活化類型、改變M1型細(xì)胞和M2型細(xì)胞的數(shù)量和比例以產(chǎn)生的對(duì)缺氧導(dǎo)致的PWMD的保護(hù)作用,并初步探討其發(fā)揮作用的機(jī)制。 一、G-CSF對(duì)缺氧損傷后早期和長(zhǎng)期腦功能恢復(fù),以及損傷導(dǎo)致的腦發(fā)育異常的影響 將1d齡小鼠置入缺氧箱中,通入5%O2和95%N2,待箱內(nèi)氣體比例穩(wěn)定開(kāi)始計(jì)時(shí),缺氧時(shí)間為2h。治療組在腦室周圍白質(zhì)損傷動(dòng)物模型制造前2h予腹腔注射重組人粒細(xì)胞集落刺激因子,造模結(jié)束后2h后,治療組再給藥一次。之后每天給藥一次,連續(xù)7d。在小鼠出生后第5天和第10天對(duì)小鼠進(jìn)行平面翻正實(shí)驗(yàn),第8、10、12天進(jìn)行游泳實(shí)驗(yàn),第30、31、32天進(jìn)行曠場(chǎng)試驗(yàn)等神經(jīng)行為學(xué)檢測(cè),觀察其早期和長(zhǎng)期腦功能恢復(fù)情況。 結(jié)果表明,G-CSF能夠促進(jìn)小鼠早期和長(zhǎng)期運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù),對(duì)損傷導(dǎo)致的神經(jīng)發(fā)育異常及神經(jīng)行為缺陷有改善作用。 二、G-CSF對(duì)缺氧損傷后腦室周圍白質(zhì)小膠質(zhì)細(xì)胞的募集、激活以及細(xì)胞因子分泌的影響 在造模后第1、3、7天取全腦切片進(jìn)行免疫熒光雙標(biāo)檢測(cè)小膠質(zhì)細(xì)胞的募集以及炎性因子的分泌情況；取腦室周圍白質(zhì),采用酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)檢測(cè)炎性因子分泌水平；利用RT-PCR檢測(cè)兩類活化小膠質(zhì)細(xì)胞的數(shù)量和比例變化,以及小膠質(zhì)細(xì)胞致炎因子和抑炎因子的分泌情況。 結(jié)果表明,G-CSF使小膠質(zhì)細(xì)胞向腦室周圍白質(zhì)的募集增加,并使之激活,并能夠改變活化小膠質(zhì)細(xì)胞中M1型細(xì)胞和M2型細(xì)胞的數(shù)量和比例；使小膠質(zhì)細(xì)胞促炎性因子分泌降低,抑炎因子及神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子分泌增加。 總之,通過(guò)本研究我們發(fā)現(xiàn),利用G-CSF干預(yù)PWMD可以抗炎,并可以誘導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞向神經(jīng)保護(hù)方向轉(zhuǎn)化,調(diào)節(jié)炎性因子和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的分泌,并促進(jìn)損傷后早期和長(zhǎng)期腦功能的恢復(fù)。
【關(guān)鍵詞】：粒細(xì)胞集落刺激因子 小膠質(zhì)細(xì)胞 缺氧 腦室周圍白質(zhì)損傷 神經(jīng)保護(hù)作用
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R329
【目錄】：

• 中文摘要6-9
• ABSTRACT9-12
• 中英文~.寫(xiě)詞對(duì)照表12-14
• 前言14-16
• 一、 G-CSF對(duì)缺氧損傷后早期和長(zhǎng)期腦功能恢復(fù)以及損傷導(dǎo)致的腦發(fā)育異常的影響16-27
• 材料與方法16-19
• 結(jié)果19-20
• 討論20-21
• 結(jié)論21-22
• 附表22-25
• 附圖25-27
• 二、 G-CSF對(duì)缺氧損傷后腦室周圍白質(zhì)小膠質(zhì)細(xì)胞的募集、激活以及細(xì)胞因子分泌的影響27-46
• 材料與方法27-37
• 結(jié)果37-39
• 討論39-40
• 結(jié)論40-41
• 附表41-42
• 附圖42-46
• 參考文獻(xiàn)46-50
• 致謝50-52
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄52-53
• 附件53

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 高巖,金幼菊,鄒祥旺,陳華君;珍珠梅花揮發(fā)物對(duì)小鼠曠場(chǎng)行為及學(xué)習(xí)記憶能力的影響[J];北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2005年03期

  本文關(guān)鍵詞：粒細(xì)胞集落刺激因子通過(guò)調(diào)節(jié)小膠質(zhì)細(xì)胞活化改善缺氧致腦室周圍白質(zhì)損傷，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：348394