FcγRⅡb是免疫球蛋白G受體（FcγR）中唯一的抑制型受體,在免疫反應(yīng)的負(fù)性調(diào)節(jié)方面發(fā)揮重要作用.為了篩選sFcγRⅡb的蛋白結(jié)合肽,以重組sFcγRⅡb蛋白為靶分子,采用噬菌體肽庫展示技術(shù)對(duì)sFcγRⅡb結(jié)合肽進(jìn)行篩選.利用ELISA鑒定每輪洗脫噬菌體與sFcγRⅡb蛋白親和力,經(jīng)過4輪篩選,挑取40個(gè)噬菌體克隆進(jìn)行序列測定,獲得28種不同的12肽序列.經(jīng)ELISA法鑒定噬菌體與sFcγRⅡb蛋白結(jié)合活性,得到sFcγRⅡb蛋白高特異性、高親和力結(jié)合肽FHKMPWYMSMYY,為進(jìn)一步研究FcγRⅡb的作用機(jī)制和探索結(jié)合肽的功能提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ). 

【文章來源】：河北大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2019,39(04)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 噬菌體肽庫的生物淘選
        1.2.2 噬菌體滴度測定
        1.2.3 噬菌斑擴(kuò)增
        1.2.4 單鏈?zhǔn)删wDNA的提取
        1.2.5 單鏈?zhǔn)删wDNA序列測定
        1.2.6 ELISA 法挑選噬菌體陽性克隆
        1.2.7 對(duì)獲取序列的生物信息學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 噬菌體肽庫的篩選與富集
    2.2 sFcγRⅡb與噬菌體結(jié)合活性的鑒定
    2.3 單鏈?zhǔn)删wDNA的純化
    2.4 噬菌體DNA序列分析
    2.5 ELISA法鑒定噬菌體單克隆與sFcγRⅡb蛋白的親和力作用
    2.6 對(duì)獲取序列的生物信息學(xué)分析結(jié)果
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]人可溶型FcγRIIb的制備及其功能初步研究[J]. 張雷,曹秀琴,楊志偉.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2012(09)
[2]腦膜炎大腸桿菌IbeA蛋白結(jié)合肽序列的親和篩選[J]. 曹虹,林琳,劉北一,陳麗丹,楊軍,貢樹基,李明.  微生物學(xué)通報(bào). 2006(05)
[3]人膀胱癌P-糖蛋白結(jié)合肽的篩選[J]. 王祥衛(wèi),郭應(yīng)祿,張立新,楊唐俊,那彥群,葉剛,楊清浩.  中華泌尿外科雜志. 2003(12)



本文編號(hào)：3477650