肌肉組織的發(fā)育及其功能由多種基因控制，基因功能失常則引發(fā)相應的疾病。肌肉發(fā)育相關基因的發(fā)現(xiàn)為肌肉疾病的診斷和治療提供潛在的靶點，同時也為肌肉干細胞的增殖、分化及其應用提供指導，具有重要的理論價值和實際意義。小鼠伴肌動蛋白相關錨定蛋白（nebulin related anchoring protein，N-RAP）特異表達于骨骼肌和心肌組織，是肌纖維組裝的引發(fā)中心。它在MLP（muscle LIM protein，MLP）敲除和tropomodulin轉基因小鼠中的表達都上調，提示有可能作為擴張型心肌�。╠ilated cardiomyopathy，DCM）的早期標志。 我們獲得了一條在胎兒和成人骨骼肌中差異表達的與小鼠N-RAP有86％相似性的新EST序列（GenBank登錄號為BQ091951），它可能代表小鼠N-RAP基因在人類中的同源物。本研究利用生物信息學分析工具和分子生物學技術，從成人骨骼肌噬菌體cDNA文庫中成功地克隆了人N-RAP基因的全長cDNA序列。人N-RAP基因cDNA序列含有一個5088bp的開放讀碼框，多聚腺苷酸加尾信號在第5375位（ATTAAA），第... 

【文章來源】：中國人民解放軍軍事科學院北京市

【文章頁數(shù)】：92 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

用小鼠N~RAP基因全長cDNA序列搜索人類基因組數(shù)據(jù)庫的結果

體序列有高度相似性，說明人類確實存在與小鼠入八尺通尸同源的基因(圖1.1)。用小鼠入入尺通尸基因全長。DNA序列搜索人類EST數(shù)據(jù)庫，發(fā)現(xiàn)有多條EST序列與小鼠刃場MP基因高度相似(圖1.2)。根據(jù)對應的基因組序列、EST序列和我們獲得的新EST序列，我們設計2對引物Pl、P2和P3、P4。用PCR方法，從成人骨骼肌噬菌體cDNA文庫中分別獲得了約Zkb(上游片段)和1.skb(下游片段)的特異條帶，測序后拼接，發(fā)現(xiàn)并沒有完整的開放讀碼框(ORF)。為此，將獲得的約3.7kb片段搜索人類EST數(shù)據(jù)庫(圖1.3)和nr數(shù)據(jù)庫(圖1.4)，進行電子延伸，得到約5.4kb的電子延伸產物。據(jù)此設計引物P5、P6、P7和P8，進行巢式PCR

P2和P3、P4。用PCR方法，從成人骨骼肌噬菌體cDNA文庫中分別獲得了約Zkb(上游片段)和1.skb(下游片段)的特異條帶，測序后拼接，發(fā)現(xiàn)并沒有完整的開放讀碼框(ORF)。為此，將獲得的約3.7kb片段搜索人類EST數(shù)據(jù)庫(圖1.3)和nr數(shù)據(jù)庫(圖1.4)，進行電子延伸，得到約5.4kb的電子延伸產物。據(jù)此設計引物P5、P6、P7和P8，進行巢式PCR，從成人骨骼肌噬菌體。DNA文庫中獲得了約5.Ikb的特異條帶(圖1.5)。

【參考文獻】：
碩士論文
[1]吉富羅非魚肝臟FAS、CAT基因的克隆及脂肪和膽堿、投飼率和投飼水平對其表達的影響[D]. 程遠.廣西大學 2015



本文編號：3477386