本文關(guān)鍵詞：吉蘭—巴雷綜合征源空腸彎曲菌致周圍神經(jīng)病Hartley豚鼠模型建立，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：建立吉蘭-巴雷綜合征源空腸彎曲菌感染致周圍神經(jīng)病Hartley豚鼠模型，為進(jìn)一步探討以空腸彎曲菌為感染源，經(jīng)胃腸道自然感染，引起繼發(fā)性免疫相關(guān)性疾病的發(fā)病模式，為研究吉蘭-巴雷綜合征的感染途徑，發(fā)病機(jī)制及其神經(jīng)病理奠定研究模型基礎(chǔ)。 方法： 1.培養(yǎng)空腸彎曲菌：選取河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院神經(jīng)病學(xué)實(shí)驗(yàn)室-80℃冰箱保存的吉蘭-巴雷綜合征（Guillain-Barre syndrome, GBS）患者分離培養(yǎng)出的空腸彎曲菌菌株lulei株，室溫溶化后取100ul菌液加入到含5ml布氏肉湯培養(yǎng)基的無菌西林瓶內(nèi)，置于三氣培養(yǎng)箱，42℃微需氧（10%CO2、5%O2、85%N2）培養(yǎng)24小時(shí)。傳代至含7%無菌脫纖維羊血的哥倫比亞血平板培養(yǎng)基，相同條件培養(yǎng)24小時(shí)，純化后制備菌懸液。 2.鑒定空腸彎曲菌：革蘭染色、過氧化物試驗(yàn)、馬尿酸水解試驗(yàn)。 3.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組：采用4-6周齡，體重為250-300g，雌雄各半的SPF級(jí)健康Hartley豚鼠48只,隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組36只和對(duì)照組(D組)12只，實(shí)驗(yàn)組分為活菌灌喂組(A組)、死菌灌喂組(B組)、免疫灌喂組(C組)，每組各12只。 4.給菌途徑及濃度：實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物均經(jīng)口服灌喂3×108cfu/ml菌懸液2ml；對(duì)照組動(dòng)物口服灌喂生理鹽水2ml，灌喂前均禁食12小時(shí)不禁水，灌胃后即給食水。 5.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物觀察：自灌喂當(dāng)日起每日觀察Hartley豚鼠的臨床癥狀：飲食、大便，體重及肢體活動(dòng)等情況。 6.糞便培養(yǎng):各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均于灌喂前，灌喂24小時(shí)后連續(xù)糞便培養(yǎng)、分離空腸彎曲菌。 7.解剖實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：稱重后用4%水合氯醛(10ul/g)腹腔注射麻醉動(dòng)物，常規(guī)皮膚消毒后打開胸腔，暴露心臟后以4%多聚甲醛灌注泵灌注，灌注后取雙側(cè)坐骨神經(jīng)，臂叢神經(jīng)，腦，，脊髓組織，所有組織均用4%多聚甲醛固定24小時(shí)后二次取材進(jìn)行神經(jīng)病理檢查，實(shí)驗(yàn)結(jié)束交予河北神經(jīng)病學(xué)實(shí)驗(yàn)室統(tǒng)一處理實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。 8.神經(jīng)病理檢查：采用HE染色，免疫組化，鋨酸染色觀察神經(jīng)病變。 結(jié)果： 1.臨床觀察：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物A3組（連續(xù)攻毒4周），A4組(連續(xù)攻毒5周)各有一只出現(xiàn)活動(dòng)減少，食欲減退，體重減輕癥狀，占總數(shù)的5.6%（2/36）；余實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組動(dòng)物未出現(xiàn)明顯臨床癥狀。 2.周圍神經(jīng)病變： 活菌灌喂組（A組）：顯示連續(xù)灌喂2周，3周，4周各分組中3只豚鼠周圍神經(jīng)均出現(xiàn)病理改變，表現(xiàn)為HE染色可見神經(jīng)纖維結(jié)構(gòu)多樣，軸索腫脹。免疫組織化學(xué)染色：鼠抗人神經(jīng)細(xì)絲蛋白單克隆抗體示：神經(jīng)絲粗細(xì)不等，節(jié)段性萎縮；兔抗人髓磷脂堿性蛋白：髓鞘厚度均一，未見脫髓鞘樣改變。鋨酸染色：可見神經(jīng)皺縮、髓鞘塌陷。連續(xù)灌喂5次分組中有一只出現(xiàn)上述病理改變，余兩只HE染色示正常神經(jīng)纖維結(jié)構(gòu)，未見明顯病理改變。 死菌灌喂組（B組）：各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物神經(jīng)病理染色未見明顯改變。 免疫灌喂組（C組）：再次免疫2周，3周實(shí)驗(yàn)組中各有一只出現(xiàn)上述病理改變，再免4周組中3只全部出現(xiàn)病理改變，余未出明顯病理改變。 空白對(duì)照組（D組）：各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物神經(jīng)病理染色未見明顯改變。 3.糞便培養(yǎng)：各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物于實(shí)驗(yàn)前糞便培養(yǎng)空腸彎曲菌均為陰性；A組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物于灌喂后24小時(shí)連續(xù)每天糞便培養(yǎng)可見空腸彎曲菌，余各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物灌喂后24小時(shí)培養(yǎng)空腸彎曲菌為陰性。 結(jié)論： 1.SPF級(jí)健康Hartley豚鼠胃腸道內(nèi)無空腸彎曲菌。 2.吉蘭-巴雷綜合征源空腸彎曲菌口服灌喂感染Hartley豚鼠可導(dǎo)致周圍神經(jīng)病�；罹辔菇M優(yōu)于免疫灌喂組，單純死菌灌喂Hartley豚鼠不導(dǎo)致周圍神經(jīng)病。Hartley豚鼠可以作為吉蘭巴雷綜合癥的研究模型動(dòng)物。
【關(guān)鍵詞】：空腸彎曲菌 周圍神經(jīng)病 吉蘭-巴雷綜合征 Hartley 豚鼠 動(dòng)物模型
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R-332;R745.43
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-9
• 前言9
• 材料與方法9-18
• 結(jié)果18-20
• 附圖20-24
• 討論24-26
• 結(jié)論26
• 參考文獻(xiàn)26-28
• 綜述 吉蘭-巴雷綜合征的研究進(jìn)展28-37
• 參考文獻(xiàn)35-37
• 致謝37-38
• 個(gè)人簡歷38

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

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本文編號(hào)：346574