本文關(guān)鍵詞：日本血吸蟲蟲卵抗原誘導(dǎo)產(chǎn)生調(diào)節(jié)性B細(xì)胞的特性研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：在我國,日本血吸蟲的感染和流行仍然是當(dāng)今主要的公共衛(wèi)生問題之一。血吸蟲病是一種典型的慢性感染性疾病,在血吸蟲感染過程的不同時(shí)期機(jī)體免疫系統(tǒng)針對(duì)血吸蟲各發(fā)育階段的不同抗原產(chǎn)生不同的優(yōu)勢(shì)免疫應(yīng)答。日本血吸蟲成蟲抗原(SWAP)和蟲卵抗原(SEA)是血吸蟲感染過程中最主要的兩種抗原成分。調(diào)節(jié)性B細(xì)胞(Bregs)是一類具有負(fù)性調(diào)節(jié)作用的B細(xì)胞亞群,可以分泌IL-10和/或TGF-p等細(xì)胞因子,在自身免疫病、慢性炎癥、腫瘤及寄生蟲感染等疾病中發(fā)揮著重要的作用。但SEA和SWAP是否能夠誘導(dǎo)Bregs產(chǎn)生,及誘導(dǎo)產(chǎn)生的Bregs的特性仍不十分清楚。本研究目的是：(1)通過體內(nèi)、體外動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究日本血吸蟲SEA和SWAP是否可以誘導(dǎo)Bregs的產(chǎn)生及其機(jī)制；(2)進(jìn)一步研究日本血吸蟲SEA誘導(dǎo)產(chǎn)生的Bregs的特性。本研究用SEA、SWAP和LPS分別體外刺激小鼠脾臟單個(gè)核細(xì)胞和磁珠分選后的脾臟CD19+B細(xì)胞,72h后用ELISA法檢測(cè)培養(yǎng)上清中IL-10、IL-4、IFN-γ、TGF-β的水平,用流式細(xì)胞術(shù)分別檢測(cè)細(xì)胞表面CD80.CD86及CD40的表達(dá)和CD19+IL-10+B細(xì)胞比例。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)用SEA、SWAP、PBS分別和不完全弗氏佐劑以1：1比例混合免疫小鼠,1次/周,共3次,末次免疫后7天取小鼠脾臟,用ELISA法檢測(cè)培養(yǎng)上清中IL-10、IL-4、IFN-γ、TGF-β的水平,同時(shí)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CD19+IL-10+B細(xì)胞比例。之后用ERK.JNK.p38MAPK和NF-κB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑檢測(cè)Bregs細(xì)胞分泌細(xì)胞因子IL-10水平的變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)SEA在體內(nèi)、外均能刺激小鼠脾臟CDl9+B細(xì)胞分泌IL-10,而且可誘導(dǎo)脾臟CD19+B細(xì)胞分化為CD19+IL-10+B細(xì)胞,而SWAP在體內(nèi)、外均不能刺激脾臟CD19+B細(xì)胞分泌IL-10,但是SWAP在體內(nèi)可刺激小鼠脾臟CD19+B細(xì)胞分泌IFN-γ。此外,SWAP體內(nèi)外條件均不能誘導(dǎo)脾臟細(xì)胞分化為CD19+IL-10+B細(xì)胞。SEA可以通過NF-κB.ERK.JNK和p38MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路刺激小鼠B細(xì)胞分泌細(xì)胞因子IL-10。 同時(shí),本研究用SEA、LPS刺激小鼠脾臟CD19+B細(xì)胞,72h后,磁珠分選出分泌IL-10的B細(xì)胞,將此細(xì)胞和磁珠分選出的CD4+T細(xì)胞共孵育,同時(shí)加入Anti-CD3、Anti-CD28,72h后,用ELISA法檢測(cè)細(xì)胞上清中活化的CD4+T分泌的IL-4和IFN-γ細(xì)胞因子的變化,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CD4+CD25+Foxp3+T、CD4+IL-4+T、CD4+IFN-γ+T細(xì)胞的比例。結(jié)果表明分泌IL-10的B細(xì)胞可誘導(dǎo)活化的CD4+T細(xì)胞分泌IL-4,且能夠增加CD4+CD25+Foxp3+T細(xì)胞、CD4+IL-4+T細(xì)胞的數(shù)量。我們認(rèn)為,通過小鼠體內(nèi)、外試驗(yàn),可以實(shí)現(xiàn)對(duì)日本血吸蟲SEA可誘導(dǎo)Bregs產(chǎn)生及其特性的研究,研究結(jié)果將有助于我們深入了解日本血吸蟲感染過程中Bregs所發(fā)揮的負(fù)向免疫調(diào)節(jié)作用,從而為血吸蟲感染免疫調(diào)控機(jī)制的深入研究提供新的免疫學(xué)依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：日本血吸蟲 可溶性蟲卵抗原 可溶性成蟲抗原 調(diào)節(jié)性B細(xì)胞 T細(xì)胞 IL-10
【學(xué)位授予單位】：揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R383.24
【目錄】：

• 中文摘要3-4
• ABSTRACT4-7
• 縮略詞表7-9
• 前言9-13
• 參考文獻(xiàn)10-13
• 第一部分 日本血吸蟲蟲卵抗原誘導(dǎo)分泌IL-10的B細(xì)胞產(chǎn)生及活化B細(xì)胞的機(jī)制13-31
• 1 實(shí)驗(yàn)材料13-15
• 2 儀器與耗材15-16
• 3 實(shí)驗(yàn)方法16-20
• 4 統(tǒng)計(jì)分析20
• 5 結(jié)果20-28
• 6 討論28-29
• 參考文獻(xiàn)29-31
• 第二部分 日本血吸蟲蟲卵抗原誘導(dǎo)產(chǎn)生分泌IL-10的B細(xì)胞的特性研究31-39
• 1 實(shí)驗(yàn)材料31
• 2 實(shí)驗(yàn)方法31-34
• 3 統(tǒng)計(jì)分析34-35
• 4 結(jié)果35-37
• 5 討論37-38
• 參考文獻(xiàn)38-39
• 文獻(xiàn)綜述39-48
• 參考文獻(xiàn)44-48
• 致謝48-49
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄49-50

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

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本文編號(hào)：346792