本文關(guān)鍵詞：鉤端螺旋體groEL基因原核表達(dá)及其產(chǎn)物免疫保護(hù)作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:構(gòu)建問號鉤端螺旋體(簡稱鉤體)黃疸出血群賴型賴株groEL基因原核重組表達(dá)系統(tǒng),了解重組表達(dá)的GroEL蛋白(rGroEL)對金地鼠的免疫保護(hù)作用。方法:采用高保真PCR擴(kuò)增問號鉤體賴株groEL基因并測序,常規(guī)方法構(gòu)建groEL基因原核表達(dá)系統(tǒng)。采用SDS-PAGE聯(lián)合Bio-Rad凝膠圖像分析系統(tǒng)檢查rGroEL表達(dá)情況及其可溶性,Ni-NTA親和層析法提純rGroEL。觀察rGroEL免疫金地鼠對問號鉤體賴株感染的保護(hù)率。采用MAT法檢測免疫動物血清與我國流行問號鉤體血清群交叉凝集效價。結(jié)果:所克隆的groEL基因核苷酸和氨基酸序列與GenBank中相應(yīng)基因完全相同。所構(gòu)建的groEL基因原核表達(dá)系統(tǒng)能表達(dá)可溶性rGroEL。100和200μgrGroEL對金地鼠的免疫保護(hù)率分別為50.0%和75.0%。rGroEL免疫金地鼠血清可不同程度地凝集各問號鉤體血清群。結(jié)論:GroEL蛋白是問號鉤體屬特異性保護(hù)性抗原,可用于制備通用性鉤體基因工程疫苗。
【作者單位】： 浙江中醫(yī)藥大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)系;
【關(guān)鍵詞】： 問號鉤端螺旋體 GroEL蛋白質(zhì)/遺傳學(xué) 重組 遺傳 基因表達(dá) 序列分析 DNA 免疫法 被動 groEL基因 原核表達(dá) 免疫保護(hù)
【基金】：傳染病國家科技重大專項(xiàng)資助項(xiàng)目(2008ZX10004-015)
【分類號】：R377.5
【正文快照】： 由致病性鉤端螺旋體(Leptospira)(簡稱鉤體)感染引起的鉤體病是全球流行的人獸共患傳染病,我國是該病的主要疫區(qū)之一[1-2]。鉤體病通過疫水迅速傳播,極易引起暴發(fā)流行,故鉤體病是我國重點(diǎn)監(jiān)控的傳染病之一。致病性鉤體自然宿主和血清群眾多,僅我國即有18個血清群,但各血清群之

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本文編號：345335