乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）是一種閉合環(huán)狀DNA，能夠引起以淋巴單核細胞浸潤和枯否細胞過度增生為主要特征的急慢性肝炎。具有免疫功能的成年人的HBV感染常常導致自限性的、短暫的肝損傷和病毒清除。只有很少比例的感染者（5％～10％）形成與病毒持續(xù)感染相關的慢性肝炎。然而，當新生兒感染時，超過90％的感染者將轉成持續(xù)感染者，并形成不同程度的肝臟損傷。 DNA免疫是指將含有編碼某種特異抗原的外源基因及其必要表達調控元件的真核表達質粒直接導入機體內，以誘導機體表達編碼序列的蛋白，并經體內抗原呈遞細胞（APC）處理，刺激機體免疫系統(tǒng)產生保護性免疫應答，包括特異性CTL應答及特異抗體的產生等等。因此DNA疫苗被認為是一種極具發(fā)展?jié)摿Φ牡谌呙�，在許多疾病的治療和預防方面顯示出廣泛的應用前景。 HBV形成慢性感染的主要機制在于感染者不能產生強有力的細胞免疫應答以清除病毒。慢性HBV感染者體內雖然存在HBV抗原特異性T淋巴細胞，但對HBV抗原的反應性較低。與亞單位重組疫苗相比，DNA介導的免疫反應更能有效地激發(fā)機體對乙型肝炎表面抗原的免疫反應，有效誘導細胞免疫... 

【文章來源】：鄭州大學河南省 211工程院校

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PreSZ一S目的基因片段的擴增Figure4AmPlificationofPreSZ一5tetgene

3.3重組質粒pOD八兄占?心的DNA序列測定結果真核表達質粒pcD入%S2一S的D入只序列測定以T7引物及SP6引物雙向測序，測序結果表明，其序列與質粒圖譜(pBR322HBV/adr)一致，圖7示T7引物部

3.4.2重組RBsAg基因在培養(yǎng)細胞中的定量表達為了確定重組刀&月g基因在培養(yǎng)細胞中的傳代表達情況，將該載體電穿孔法轉染7721細胞并用以18篩選，然后進行免疫組化及認范sternblotting檢測其表達情況。結果見圖9，圖10l:7721eellh，犯strans丘ctedwithPcl〕蒯i貸一S2:7721transfeetedwlthPcl)蒯3.0圖91丸注〕刪52.5在7721細胞系中的表達FlgtiregTheexPressionofPcD入月S2一Sm772leelline33KDl:7721eellllneZ:7721trans眾冷tedwlthPcl〕漢刁3刀3:7721eelllinestransfeetedwithPcl〕州心一S4:10pgHBS刁g圖10兩邵叮e」。TheeXPreSSIwestemblot檢測月男3月g的表達onofP‘J〕刪月嘆2目S山tectedbyusingwesternblot結果顯示月百占月g蛋白在篩選后的7721細胞株傳代過程中可高效表達。分泌的顆粒用抗甲HBS抗體來確認(圖10)，以上結果都表明:構建的這種載體適合于作刀瓦」免疫。4正常BALB’/c小鼠的刀況刁免疫及抗.nBs的測定結果

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3450215