本文關(guān)鍵詞：MRI體外定量測(cè)定SPIO標(biāo)記兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：培養(yǎng)及鑒定兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（r-MSC）,測(cè)定SPIO標(biāo)記r-MSC的安全標(biāo)記濃度及最佳標(biāo)記濃度。 材料與方法：全骨髓貼壁法培養(yǎng)及擴(kuò)增r-MSC，流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞表面抗原及成脂誘導(dǎo)分化實(shí)驗(yàn)鑒定r-MSC；普魯士藍(lán)染色測(cè)定不同濃度SPIO標(biāo)記r-MSC的標(biāo)記陽性率，，透射電鏡檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鐵粒子的分布情況，原子分光光度儀測(cè)定標(biāo)記細(xì)胞鐵含量；臺(tái)盼藍(lán)染色及成脂誘導(dǎo)分化實(shí)驗(yàn)測(cè)定SPIO標(biāo)記r-MSC的安全標(biāo)記濃度。 結(jié)果：光學(xué)顯微鏡顯示r-MSC呈長梭形、柵欄樣排列；表面抗原測(cè)定高表達(dá)：CD90、CD44，低表達(dá)：CD14、CD45；成脂誘導(dǎo)分化實(shí)驗(yàn)鑒定r-MSC能夠分化為脂肪細(xì)胞。普魯士藍(lán)染色顯示SPIO濃度越高，標(biāo)記陽性率越高，SPIO為50.0μg/ml、25.0μg/ml、17.5μg/ml濃度下標(biāo)記率分別約為97.97%、94.56%、93.77%，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，p＞0.05。臺(tái)盼藍(lán)染色顯示SPIO濃度≤25.0μg/ml的細(xì)胞活力與未標(biāo)記細(xì)胞的細(xì)胞活力無顯著性差異，p＞0.05；成脂誘導(dǎo)分化實(shí)驗(yàn)測(cè)定SPIO濃度≤50.0μg/ml時(shí)分化能力與未標(biāo)記細(xì)胞未見明顯差異。 結(jié)論：全骨髓貼壁法在37℃、5%CO2條件下用L-DMEM培養(yǎng)基（含F(xiàn)BS15%，青鏈雙抗100U/ml）可體外擴(kuò)增r-MSC；SPIO標(biāo)記r-MSC的最佳標(biāo)記濃度為17.5μg/ml，SPIO標(biāo)記r-MSC的安全濃度為25.0μg/m（l細(xì)胞增殖及多向分化能力無影響），相對(duì)安全濃度為50.0μg/ml（細(xì)胞增殖稍有影響、多向分化能力無影響）。 目的：測(cè)定不同細(xì)胞濃度下MRI能夠發(fā)現(xiàn)SPIO標(biāo)記r-MSC的最低SPIO標(biāo)記濃度并尋找MRI體外定量測(cè)定SPIO標(biāo)記r-MSC的方法。 材料與方法：不同濃度SPIO（50.0μg/ml、25.0μg/ml、17.5μg/ml、10.0μg/ml、2.5μg/ml）標(biāo)記r-MSC孵化24h；制作含不同SPIO濃度及不同細(xì)胞濃度（1×106/ml、1×105/ml、1×104/ml、1×103/ml）的細(xì)胞懸液瓊脂凝膠標(biāo)本；3.0T MRI T2*W-GRE、T1-GRE、T2W-PROPELLER序列掃描上述標(biāo)本；測(cè)定平均信號(hào)衰減率（△SI（%）=（SI0-SISPIO）/SI0×100）。分析不同細(xì)胞濃度組，不同濃度SPIO標(biāo)記r-MSC的△SI與SPIO標(biāo)記濃度的相關(guān)關(guān)系。 結(jié)果：1×106/ml細(xì)胞濃度下，T2*W-GRE、T1-GRE、T2W-PROPELLER序列能夠發(fā)現(xiàn)的最低SPIO濃度分別為10.0μg/ml、25.0μg/ml、17.5μg/ml；1×105/ml細(xì)胞濃度下，T2*W-GRE、T2W-PROPELLER序列能夠發(fā)現(xiàn)的最低SPIO濃度分別為17.5μg/ml、25.0μg/ml，而T1-GRE序列不能發(fā)現(xiàn)標(biāo)記細(xì)胞；1×104/ml細(xì)胞濃度下，僅T2*W-GRE序列能夠發(fā)現(xiàn)50.0μg/mlSPIO標(biāo)記的r-MSC。直線回歸分析顯示T2*W-GRE序列，1×104/ml、1×105/ml、1×106/ml細(xì)胞濃度組△SI與SPIO濃度可建立線性回歸方程，相關(guān)系數(shù)R分別為0.571、0.939、0.949。 結(jié)論： MR T2*W-GRE、T1-GRE及T2W-PROPELLER三種掃描序列中T2*W-GRE序列監(jiān)測(cè)SPIO標(biāo)記r-MSC的效果最佳，T2*W-GRE序列監(jiān)測(cè)SPIO標(biāo)記r-MSC的效果最佳，T2*W-GRE序列能夠發(fā)現(xiàn)1×104/ml細(xì)胞濃度下的最低SPIO濃度為50.0μg/ml以及1×106/ml細(xì)胞濃度下的最低SPIO濃度為10.0μg/ml；適宜細(xì)胞濃度（≥1×105/ml），T2*W-GRE序列測(cè)定的平均信號(hào)衰減率(△SI)與SPIO標(biāo)記濃度回歸分析可用于近似定量預(yù)測(cè)SPIO標(biāo)記濃度。
【關(guān)鍵詞】：細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) 兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 磁共振成像 超順磁性氧化鐵粒子 T2*W-GRE序列
【學(xué)位授予單位】：川北醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R329.2;R445.1
【目錄】：

• 致謝4-6
• 摘要6-9
• Abstract9-14
• 第一部分 測(cè)定超順磁性氧化鐵（SPIO）標(biāo)記兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（R-MSC）的安全濃度及最佳標(biāo)記濃度14-34
• 前言14-15
• 材料與方法15-23
• 結(jié)果23-28
• 討論28-33
• 結(jié)論33-34
• 第二部分 MRI 定量評(píng)估超順磁性氧化鐵（SPIO）標(biāo)記兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞34-56
• 前言34
• 材料與方法34-38
• 結(jié)果38-48
• 討論48-55
• 結(jié)論55-56
• 附圖56-63
• 參考文獻(xiàn)63-68
• 綜述：干細(xì)胞移植的分子影像技術(shù)在神經(jīng)再生醫(yī)學(xué)的應(yīng)用68-78
• 參考文獻(xiàn)76-78
• 個(gè)人簡歷78
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文78

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  本文關(guān)鍵詞：MRI體外定量測(cè)定SPIO標(biāo)記兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：343813