本文關(guān)鍵詞：甘露糖受體在哮喘大鼠模型中作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：第一部分甘露糖受體在哮喘大鼠肺組織中的表達(dá)變化 研究目的 研究哮喘模型SD大鼠肺組織中甘露糖受體基因和蛋白表達(dá)水平的變化。 材料與方法 建立哮喘SD大鼠模型。應(yīng)用免疫組織化學(xué)和Western-blot方法檢測(cè)肺組織中甘露糖受體（MR）蛋白表達(dá)水平。應(yīng)用Real Time-PCR方法檢測(cè)肺組織中MR基因表達(dá)水平。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 哮喘組大鼠肺組織中MR基因和蛋白表達(dá)水平均較對(duì)照組顯著升高（P＜0.05）。 結(jié)論 哮喘組大鼠肺組織中MR mRNA和蛋白表達(dá)均較對(duì)照組明顯增高，提示MR可能與哮喘的發(fā)病機(jī)制有關(guān)。 第二部分甘露糖受體在哮喘大鼠模型肺泡巨噬細(xì)胞和氣道平滑肌細(xì)胞中的表達(dá)變化及其對(duì)肺泡巨噬細(xì)胞內(nèi)吞活性的影響 研究目的 1、研究SD大鼠在哮喘狀態(tài)下，肺泡巨噬細(xì)胞（AMs）甘露糖受體的表達(dá)變化，及其對(duì)肺泡巨噬細(xì)胞內(nèi)吞活性的影響。 2、研究SD大鼠在哮喘狀態(tài)下，氣道平滑肌細(xì)胞（ASMCs）甘露糖受體的表達(dá)變化。 材料與方法 建立哮喘SD大鼠模型，麻醉后行支氣管肺泡灌洗，分離并培養(yǎng)肺泡灌洗液（BALF）中AMs，處死后培養(yǎng)原代氣道平滑肌細(xì)胞，取3~5代ASMCs。 實(shí)驗(yàn)分組： （1）對(duì)照組（N組）：即為正常對(duì)照組大鼠細(xì)胞，無任何干預(yù)刺激； （2）哮喘組（A組）：即為哮喘組大鼠細(xì)胞，不加任何干預(yù)刺激； （3）哮喘+白細(xì)胞介素4（IL-4）組（A+I組）：哮喘組大鼠細(xì)胞加入10μg/ml重組大鼠IL-4刺激24小時(shí)； （4）哮喘+D-(+)-甘露糖（mannose）組（A+M組）：哮喘組大鼠細(xì)胞加入50μmol/ml D-(+)-mannose刺激24小時(shí)。 （5）哮喘+甘露糖受體小干擾RNA組（A+R組）：哮喘組大鼠細(xì)胞20μmol/mlMR siRNA刺激24小時(shí)； （6）哮喘+白細(xì)胞介素4+D-(+)-甘露糖（mannose）組（A+I+M組）：哮喘組大 鼠細(xì)胞同時(shí)加入10μg/ml IL-4和50μmol/ml D-(+)-mannose刺激24小時(shí)。應(yīng)用免疫熒光方法檢測(cè)各組細(xì)胞中MR蛋白水平的表達(dá)；Real-Time PCR檢測(cè)各組ASMCs中MR基因水平的表達(dá)變化；流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組AMs內(nèi)吞活性的改變；ELISA檢測(cè)支氣管肺泡灌洗液（BALF）上清中IL-4的含量。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 1、對(duì)比對(duì)照組，哮喘組大鼠BALF上清中IL-4的含量明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.01）。 2、對(duì)比對(duì)照組，哮喘組、哮喘+M組大鼠AMs MR蛋白水平表達(dá)均升高，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05）；對(duì)比哮喘組大鼠，AMs經(jīng)IL-4干預(yù)后，MR蛋白水平表達(dá)較對(duì)照組AMs增加（p＜0.01）；經(jīng)D-(+)-mannose干預(yù)后AMsMR蛋白水平表達(dá)無明顯變化；經(jīng)MR siRNA干預(yù)后AMs MR蛋白水平的表達(dá)降低，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05）；經(jīng)D-(+)-mannose和IL-4干預(yù)后且AMs MR蛋白水平的表達(dá)增加，，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＞0.05）； 3、對(duì)比對(duì)照組大鼠，哮喘組大鼠AMs的內(nèi)吞活性升高，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05）；對(duì)比哮喘組大鼠，AMs經(jīng)IL-4干預(yù)后，內(nèi)吞活性升高（p＜0.05）；D-(+)-mannose干預(yù)后AMs的內(nèi)吞活性降低，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05）；經(jīng)MR siRNA干預(yù)后AMs的內(nèi)吞活性降低（p＜0.05）；經(jīng)D-(+)-mannose和IL-4干預(yù)后且AMs的內(nèi)吞活性降低，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＞0.05）。 4、對(duì)比對(duì)照組，哮喘組、哮喘+M組大鼠ASMCs MR基因和蛋白水平表達(dá)均升高，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05）；對(duì)比哮喘組大鼠，ASMCs經(jīng)IL-4干預(yù)后，MR蛋白（p＜0.01）和基因水平（p＜0.05）表達(dá)均增加；經(jīng)D-(+)-mannose干預(yù)后ASMCs MR蛋白和基因水平的表達(dá)無明顯變化；經(jīng)MR siRNA干預(yù)后ASMCs MR的蛋白（p＜0.01）和基因（p＜0.05）水平表達(dá)降低；經(jīng)D-(+)-mannose和IL-4干預(yù)后且ASMCs MR的蛋白和基因水平表達(dá)增加，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＞0.05）。 結(jié)論 在大鼠哮喘狀態(tài)下，AMs、ASMCs中MR蛋白水平的表達(dá)均升高，ASMCsMR基因水平的表達(dá)升高；IL-4刺激可以上調(diào)MR基因和蛋白水平表達(dá)；AMs的內(nèi)吞活性較對(duì)照組升高，且MR與AMs的內(nèi)吞活性相關(guān)。以上結(jié)果提示，哮喘狀態(tài)下，MR的表達(dá)上調(diào)，可能參與AMs內(nèi)吞活性的調(diào)節(jié)，AMs、 ASMCs可能通過MR通路參與氣道的炎癥反應(yīng)和氣道重塑，從而參與哮喘的發(fā)生發(fā)展過程。
【關(guān)鍵詞】：肺組織 甘露糖受體 哮喘 氣道平滑肌細(xì)胞 肺泡巨噬細(xì)胞 IL-4 甘露糖受體 內(nèi)吞活性 哮喘
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R-332;R562.25
【目錄】：

• 中英文縮略詞一覽表5-6
• 中文摘要6-10
• Abstract10-14
• 第一部分14-35
• 前言14-16
• 1 實(shí)驗(yàn)材料16-17
• 2 實(shí)驗(yàn)方法17-24
• 3 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析24-25
• 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果25-26
• 5 討論26-28
• 6 附圖28-32
• 參考文獻(xiàn)32-35
• 第二部分35-58
• 前言35-37
• 1 實(shí)驗(yàn)材料37-38
• 2 實(shí)驗(yàn)方法38-42
• 3 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析42-43
• 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果43-45
• 5 討論45-47
• 6 附圖47-55
• 參考文獻(xiàn)55-58
• 綜述58-66
• 參考文獻(xiàn)63-66
• 致謝66

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 初海鷹;楊佩滿;張嘉寧;;L-選擇素和甘露糖受體與腫瘤淋巴轉(zhuǎn)移的相關(guān)性[J];解剖科學(xué)進(jìn)展;2006年03期

2 左大明,陳政良;巨噬細(xì)胞甘露糖受體的結(jié)構(gòu)與功能[J];免疫學(xué)雜志;2004年S1期

  本文關(guān)鍵詞：甘露糖受體在哮喘大鼠模型中作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：339359