發(fā)布時間：2017-05-01 18:02

  本文關鍵詞：甘露糖受體在哮喘大鼠模型中作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：第一部分甘露糖受體在哮喘大鼠肺組織中的表達變化 研究目的 研究哮喘模型SD大鼠肺組織中甘露糖受體基因和蛋白表達水平的變化。 材料與方法 建立哮喘SD大鼠模型。應用免疫組織化學和Western-blot方法檢測肺組織中甘露糖受體（MR）蛋白表達水平。應用Real Time-PCR方法檢測肺組織中MR基因表達水平。 實驗結(jié)果 哮喘組大鼠肺組織中MR基因和蛋白表達水平均較對照組顯著升高（P＜0.05）。 結(jié)論 哮喘組大鼠肺組織中MR mRNA和蛋白表達均較對照組明顯增高，提示MR可能與哮喘的發(fā)病機制有關。 第二部分甘露糖受體在哮喘大鼠模型肺泡巨噬細胞和氣道平滑肌細胞中的表達變化及其對肺泡巨噬細胞內(nèi)吞活性的影響 研究目的 1、研究SD大鼠在哮喘狀態(tài)下，肺泡巨噬細胞（AMs）甘露糖受體的表達變化，及其對肺泡巨噬細胞內(nèi)吞活性的影響。 2、研究SD大鼠在哮喘狀態(tài)下，氣道平滑肌細胞（ASMCs）甘露糖受體的表達變化。 材料與方法 建立哮喘SD大鼠模型，麻醉后行支氣管肺泡灌洗，分離并培養(yǎng)肺泡灌洗液（BALF）中AMs，處死后培養(yǎng)原代氣道平滑肌細胞，取3~5代ASMCs。 實驗分組： （1）對照組（N組）：即為正常對照組大鼠細胞，無任何干預刺激； （2）哮喘組（A組）：即為哮喘組大鼠細胞，不加任何干預刺激； （3）哮喘+白細胞介素4（IL-4）組（A+I組）：哮喘組大鼠細胞加入10μg/ml重組大鼠IL-4刺激24小時； （4）哮喘+D-(+)-甘露糖（mannose）組（A+M組）：哮喘組大鼠細胞加入50μmol/ml D-(+)-mannose刺激24小時。 （5）哮喘+甘露糖受體小干擾RNA組（A+R組）：哮喘組大鼠細胞20μmol/mlMR siRNA刺激24小時； （6）哮喘+白細胞介素4+D-(+)-甘露糖（mannose）組（A+I+M組）：哮喘組大 鼠細胞同時加入10μg/ml IL-4和50μmol/ml D-(+)-mannose刺激24小時。應用免疫熒光方法檢測各組細胞中MR蛋白水平的表達；Real-Time PCR檢測各組ASMCs中MR基因水平的表達變化；流式細胞術(shù)檢測各組AMs內(nèi)吞活性的改變；ELISA檢測支氣管肺泡灌洗液（BALF）上清中IL-4的含量。 實驗結(jié)果 1、對比對照組，哮喘組大鼠BALF上清中IL-4的含量明顯升高，差異具有統(tǒng)計學意義（p＜0.01）。 2、對比對照組，哮喘組、哮喘+M組大鼠AMs MR蛋白水平表達均升高，差異均具有統(tǒng)計學意義（p＜0.05）；對比哮喘組大鼠，AMs經(jīng)IL-4干預后，MR蛋白水平表達較對照組AMs增加（p＜0.01）；經(jīng)D-(+)-mannose干預后AMsMR蛋白水平表達無明顯變化；經(jīng)MR siRNA干預后AMs MR蛋白水平的表達降低，且差異有統(tǒng)計學意義（p＜0.05）；經(jīng)D-(+)-mannose和IL-4干預后且AMs MR蛋白水平的表達增加，，但差異無統(tǒng)計學意義（p＞0.05）； 3、對比對照組大鼠，哮喘組大鼠AMs的內(nèi)吞活性升高，且差異有統(tǒng)計學意義（p＜0.05）；對比哮喘組大鼠，AMs經(jīng)IL-4干預后，內(nèi)吞活性升高（p＜0.05）；D-(+)-mannose干預后AMs的內(nèi)吞活性降低，且差異有統(tǒng)計學意義（p＜0.05）；經(jīng)MR siRNA干預后AMs的內(nèi)吞活性降低（p＜0.05）；經(jīng)D-(+)-mannose和IL-4干預后且AMs的內(nèi)吞活性降低，但差異無統(tǒng)計學意義（p＞0.05）。 4、對比對照組，哮喘組、哮喘+M組大鼠ASMCs MR基因和蛋白水平表達均升高，差異均具有統(tǒng)計學意義（p＜0.05）；對比哮喘組大鼠，ASMCs經(jīng)IL-4干預后，MR蛋白（p＜0.01）和基因水平（p＜0.05）表達均增加；經(jīng)D-(+)-mannose干預后ASMCs MR蛋白和基因水平的表達無明顯變化；經(jīng)MR siRNA干預后ASMCs MR的蛋白（p＜0.01）和基因（p＜0.05）水平表達降低；經(jīng)D-(+)-mannose和IL-4干預后且ASMCs MR的蛋白和基因水平表達增加，但差異無統(tǒng)計學意義（p＞0.05）。 結(jié)論 在大鼠哮喘狀態(tài)下，AMs、ASMCs中MR蛋白水平的表達均升高，ASMCsMR基因水平的表達升高；IL-4刺激可以上調(diào)MR基因和蛋白水平表達；AMs的內(nèi)吞活性較對照組升高，且MR與AMs的內(nèi)吞活性相關。以上結(jié)果提示，哮喘狀態(tài)下，MR的表達上調(diào)，可能參與AMs內(nèi)吞活性的調(diào)節(jié)，AMs、 ASMCs可能通過MR通路參與氣道的炎癥反應和氣道重塑，從而參與哮喘的發(fā)生發(fā)展過程。
【關鍵詞】：肺組織 甘露糖受體 哮喘 氣道平滑肌細胞 肺泡巨噬細胞 IL-4 甘露糖受體 內(nèi)吞活性 哮喘
【學位授予單位】：華中科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R-332;R562.25
【目錄】：

• 中英文縮略詞一覽表5-6
• 中文摘要6-10
• Abstract10-14
• 第一部分14-35
• 前言14-16
• 1 實驗材料16-17
• 2 實驗方法17-24
• 3 實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計學分析24-25
• 4 實驗結(jié)果25-26
• 5 討論26-28
• 6 附圖28-32
• 參考文獻32-35
• 第二部分35-58
• 前言35-37
• 1 實驗材料37-38
• 2 實驗方法38-42
• 3 實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計學分析42-43
• 4 實驗結(jié)果43-45
• 5 討論45-47
• 6 附圖47-55
• 參考文獻55-58
• 綜述58-66
• 參考文獻63-66
• 致謝66

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 初海鷹;楊佩滿;張嘉寧;;L-選擇素和甘露糖受體與腫瘤淋巴轉(zhuǎn)移的相關性[J];解剖科學進展;2006年03期

2 左大明,陳政良;巨噬細胞甘露糖受體的結(jié)構(gòu)與功能[J];免疫學雜志;2004年S1期

  本文關鍵詞：甘露糖受體在哮喘大鼠模型中作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：339359