目的:觀察丹蛭降糖膠囊（DJC）對(duì)糖尿病大鼠肝臟胰島素抵抗的干預(yù)效果,并探討其緩解肝臟胰島素受體底物減少的機(jī)制。方法:選取12周齡符合糖尿病模型的SPF級(jí)雄性GK大鼠40只納入實(shí)驗(yàn),隨機(jī)分為模型組,DJC低、高劑量組,吡格列酮組,另設(shè)10只同周齡正常Wistar大鼠作為正常組。DJC低、高劑量組和吡格列酮組分別予以0.54、1.08g·kg-1·d-1 DJC和吡格列酮10mg·kg-1·d-1灌胃,模型組及正常組給予等量0.9%氯化鈉溶液。連續(xù)給藥6周后,測定各組大鼠的空腹血糖（FBG）、血清胰島素（FINS）,計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）,檢測肝臟病理染色和胰島素受體底物IRS1、IRS2的免疫組化結(jié)果,Western blot檢測mTOR通路蛋白p-mTOR、p-S6K1,AMPK通路蛋白LKB1、p-AMPK和IRS1、IRS2的表達(dá)。結(jié)果:與正常組比較,模型組大鼠具有血糖升高,胰島素抵抗特征,HE染色顯示有顯著的肝臟細(xì)胞脂肪變性;與模型組比較,DJC低、高劑量組的FBG、FINS和HOMA-IR均顯著改善（P<0.05）,肝臟脂肪病變和炎癥浸潤減輕;p-mTOR... 

【文章來源】：中華中醫(yī)藥雜志. 2019,34(09)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

各組大鼠相關(guān)蛋白電泳圖

對(duì)表達(dá)量*****00.51.5ABCDEp-AMPK相對(duì)表達(dá)量*****1.01.01.01.01.0圖2各組大鼠相關(guān)蛋白表達(dá)比較注：與正常組比較，**P＜0.01；與模型組比較，△△P＜0.01；與DJC低劑量組比較，▲P＜0.05。**********△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△▲△△▲△△▲△△▲4.肝臟外觀及組織病理形態(tài)結(jié)果各組大鼠肝臟外觀無明顯差異，均呈紅褐色，邊緣銳利，模型組肝臟體積略有增大。HE染色光鏡觀察結(jié)果見圖3，正常組大鼠可見清晰的肝細(xì)胞索排列結(jié)構(gòu)，細(xì)胞大小及形態(tài)正常，未見明顯病變；模型組大鼠肝索結(jié)構(gòu)模糊，肝細(xì)胞胞漿疏松化，部分細(xì)胞壞死并伴有炎癥浸潤，大量肝細(xì)胞見脂肪變性，呈現(xiàn)中度以上脂肪ABCDE圖3各組大鼠肝臟病理HE染色結(jié)果（×400）

水平升高，其中DJC高劑量組比DJC低劑量組效果更加顯著。結(jié)合前期研究和本研究結(jié)果，推測DJC可能通過抑制mTOR/S6K1信號(hào)通路的激活肝的征象；與模型組比較，DJC低劑量組的異常病理改變減少，細(xì)胞脂肪病變較輕，尚有部分肝細(xì)胞可見水腫和氣球樣變，胞漿淡染；相比DJC低劑量組，DJC高劑量組病變改善較明顯，未見明顯炎癥浸潤和細(xì)胞壞死，脂肪變性較模型組明顯減輕；吡格列酮組的形態(tài)結(jié)果與DJC高劑量組接近，肝細(xì)胞大多維持正常大小與形態(tài)，部分細(xì)胞見輕度脂肪變性。5.免疫組化顯示肝臟組織IRS1、IRS2的表達(dá)與分布情況見圖4，表2。正常組大鼠的IRS1和IRS2在肝臟組織中廣泛表達(dá)，散布均勻，其中IRS1比IRS2數(shù)量更多，主要分布在細(xì)胞膜，部分在細(xì)胞質(zhì)表達(dá)。與正常組比較，模型組大鼠IRS1、IRS2表達(dá)水平顯著降低（P＜0.01），主要分布于細(xì)胞質(zhì)，且部分脂肪變性的肝臟細(xì)胞中未見IRS1和IRS2表達(dá)；與模型組比較，各用藥組大鼠IRS1和IRS2表達(dá)水平顯著升高（P＜0.01），其中DJC高劑量組和吡格列酮組IRS1和IRS2表達(dá)水平顯著高于DJC低劑量組（P＜0.05）。A1B1C1D1E1A2B2C2D2E2圖4各組大鼠肝臟組織中IRS1、IRS2的表達(dá)及分布（DAB×400）注：A1~E1.IRS1；A2~E2.IRS2。A1B1D1E1表2各組大鼠肝臟IRS1、IRS2蛋白表達(dá)IOD值比較（x-±s，n=10）組別IRS1IRS2正常組5553.33±410.935224.67±255.94模型組1143.33±100.42**1198.67±148.26**DJC低劑量組2197.67±157.42△△2377.33±180.75△△DJC高劑量組3510.33±169.51△△▲3411.00±340.50△△▲吡格列酮組3195.67±175.65△△▲3276.33±150.44△△▲注：與正常組比較，**P＜0.01；與模型組比較，△△P＜0.01；與DJC

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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本文編號(hào)：3379545