本文關(guān)鍵詞：P13Kp85、p-Akt在人血管瘤裸鼠移植模型中的表達(dá)及調(diào)控，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：觀察磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B (Akt)在人血管瘤裸鼠移植模型中的表達(dá),并對(duì)其進(jìn)行藥物干預(yù),探討PI3K/Akt信號(hào)通路在小兒血管瘤的發(fā)生、發(fā)展及消退過(guò)程中的作用。 方法：選用3-4周大小的裸小鼠18只,雌雄不拘,體重17.0-22.0g,將手術(shù)切除的1例1歲3月齡女嬰左胸部增生期毛細(xì)血管瘤制成組織塊,轉(zhuǎn)種于裸小鼠雙側(cè)腋下、頸部、腰背部、腹股溝處,每只6處,共108處。生長(zhǎng)45天后,將移植成功標(biāo)本隨機(jī)分成：①對(duì)照組：每個(gè)瘤體內(nèi)注射生理鹽水0.05ml。②干預(yù)組分四組：a組：每個(gè)瘤體內(nèi)注射0.5umol/L的胰島素樣生長(zhǎng)因子0.05ml；b組：每個(gè)瘤體內(nèi)注25μmol/L的LY2940020.05ml；c組：每個(gè)瘤體內(nèi)注射10nmol/L的雷帕霉素0.05ml；d組：每個(gè)瘤體內(nèi)注射糖皮質(zhì)激素(1g/L的曲安縮松)0.05ml。于藥物注射當(dāng)日(用藥前)、注射后3日、1周、2周肉眼大體觀察移植瘤形態(tài)變化,光鏡觀察移植瘤組織結(jié)構(gòu)變化,免疫組化檢測(cè)PI3Kp85、p-Akt蛋白的分布及表達(dá)情況,RT-PCR檢測(cè)p-Akt mRNA的表達(dá)情況。 結(jié)果： 1.裸鼠及移植瘤存活情況：飼養(yǎng)60天,所有裸鼠均存活。成瘤率為76.77%(83/108),移植瘤在移植前30天內(nèi)均不同程度的縮小,30天后開始緩慢生長(zhǎng),移植45天到60天之間生長(zhǎng)迅速。 2.大體形態(tài)學(xué)觀察：用藥前到用藥后兩周內(nèi),對(duì)照組移植瘤體積逐漸增大,質(zhì)軟,顏色逐漸變紅；胰島素生長(zhǎng)因子組移植瘤生長(zhǎng)較快,體積增大明顯,質(zhì)軟,于皮外觀察呈紫藍(lán)色；LY294002、雷帕霉素、曲安奈德組移植瘤逐漸停止生長(zhǎng),體積逐漸變小,質(zhì)軟,顏色逐漸發(fā)白。 3.組織病理學(xué)表現(xiàn)：對(duì)照組及胰島素樣生長(zhǎng)因子組較用藥前血管瘤細(xì)胞團(tuán)界限清楚,細(xì)胞核大、染色深,細(xì)胞間質(zhì)和血管內(nèi)皮細(xì)胞都增多,并可見微血管。其中胰島素生長(zhǎng)因子組毛細(xì)血管管腔密集,有血竇生成,內(nèi)可見紅細(xì)胞。LY294002、雷帕霉素、曲安奈德組血管瘤細(xì)胞核較小呈固縮狀,染色淺間隔組織多,并呈現(xiàn)空泡狀,無(wú)明顯的血管腔樣結(jié)構(gòu),多被纖維結(jié)締組織和脂肪組織替代。 4.免疫組化結(jié)果：LY294002、雷帕霉素、曲安奈德組PI3K p85陽(yáng)性表達(dá)率分別為80%,80%及86.67%,p-Akt陽(yáng)性表達(dá)率分別為86.67%,73.33%及80%。對(duì)照組及胰島素生長(zhǎng)因子組P13K p85及p-Akt陽(yáng)性表達(dá)率均為100%。用藥3天后,雷帕霉素組p85及p-Akt蛋白的IOD值分別為p85(83.172±10.76)、p-Akt(79.578±11.745),較對(duì)照組p85(143.584±26.954)、p-Akt(111.776±10.916)下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。用藥一周后LY294002、雷帕霉素、曲安奈德p85及p-Akt蛋白的IOD值分別為p85(81.042±11.451)/p-Akt(65.99±6.313)、p85(93.784±17.345)/p-Akt(72.096±18.01)、(89.6±19.719)/p-Akt(82.566±15.268),較對(duì)照組p85(135.396±31.714)/p-Akt(115.096±19.595)下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P0.05),用藥一周后,胰島素樣生長(zhǎng)因子組p85及p-Akt蛋白的IOD值為p85(169.178±7.765)/p-Akt(145.054±12.631),較對(duì)照組p85(135.396±31.714)/p-Akt(115.096±19.595)升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。用藥兩周后,雷帕霉素、LY294002、曲安奈德p85及p-Akt蛋白的IOD值分別為p85(58.684±20.057)/p-Akt(49.596±14.186)、p85(58.788±20.314)/p-Akt(55.698±12.744)、 p85(64.594±25.911)/p-Akt(64.078±20.922),表達(dá)較對(duì)照組p85(145.374±26.125)/p-Akt(115.498±19.381)下降,差異具有顯著性(P＜0.01);用藥兩周后,胰島素樣生長(zhǎng)因子p85及p-Akt蛋白的IOD值為p85(179.322±20.893)/p-Akt(162.43±13.409),表達(dá)較對(duì)照組p85(145.374±26.125)/p-Akt(115.498±19.381)增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。 5. Rt-PCR結(jié)果：用藥3天后,LY294002、雷帕霉素、曲安奈德組p85及p-Akt蛋白的mRNA表達(dá)值分別為p85(0.04±0.014)/p-Akt(0.058±0.017)、p85(0.039±0.01)/p-Akt (0.059±0.011)、p85(0.042±0.012)/p-Akt(0.053±0.021),較對(duì)照組p85(0.077±0.011)/p-Akt(0.121±0.031)下降,差異具有顯著性(P＜0.01)。用藥一周后,雷帕霉素、LY294002、曲安奈德p85及p-Akt蛋白的IOD值分別為p85(0.034±0.012)/p-Akt(0.028±0.011)、 p85(0.029±0.012)/p-Akt(0.043±0.018)、p85(0.027±0.007)/p-Akt(0.046±0.016),較對(duì)照組p85(0.085±0.025)/p-Akt(0.12±0.03)下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)),用藥一周后,胰島素樣生長(zhǎng)因子組p85及p-Akt蛋白的IOD值為p85(0.131±0.042)/p-Akt(0.238±0.082),較對(duì)照組p85(0.085±0.025)/p-Akt(0.12±0.03)升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。用藥兩周后,雷帕霉素、LY294002、曲安奈德p85及p-Akt蛋白的IOD值分別為p85(0.026±0.008)/p-Akt(0.028±0.009)、p85(0.025±0.009)/p-Akt(0.027±0.009)、p85(0.022±0.009)/p-Akt(0.027±0.01),表達(dá)較對(duì)照組p85(0.096±0.014)/p-Akt(0.134±0.039)下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；用藥兩周后,胰島素樣生長(zhǎng)因子p85及p-Akt蛋白的IOD值為p85(0.188±0.066)/p-Akt(0.309±0.105),表達(dá)較對(duì)照組p85(0.096±0.014)/p-Akt(0.134±0.039)增高,差異具有顯著性(P＜0.01)。 結(jié)論： 1.人血管瘤裸鼠移植模型中血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞中有PI3Kp85、p-Akt表達(dá)。 2. PI3K/Akt信號(hào)通路可能參與人血管瘤裸鼠移植模型血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的調(diào)控。 3.LY294002、雷帕霉素、曲安奈德及胰島素樣生長(zhǎng)因子可能通過(guò)干預(yù)PI3K/Akt信號(hào)通路中相應(yīng)的靶點(diǎn),抑制或激活PI3K/Akt信號(hào)通路來(lái)促使瘤體消退及增生。
【關(guān)鍵詞】：血管瘤 移植模型/裸鼠 p85 p-Akt 調(diào)控
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R725.4;R-332
【目錄】：

• 英文縮略詞表3-5
• 中文摘要5-8
• Abstract8-12
• 前言12-14
• 材料與方法14-23
• 結(jié)果23-35
• 討論35-38
• 結(jié)論38-39
• 參考文獻(xiàn)39-41
• 綜述：PI3/Akt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與血管瘤41-48
• 參考文獻(xiàn)46-48
• 致謝48-49
• 作者簡(jiǎn)介49

【參考文獻(xiàn)】

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1 岳文濤;王小敏;王s，

本文編號(hào)：337514