機(jī)械循環(huán)壓力對(duì)3D培養(yǎng)的脊柱終板軟骨細(xì)胞的影響
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【摘要】:目的一系列的研究表明Ank基因在軟骨的鈣化過程中起到十分重要的作用,我們過去的實(shí)驗(yàn)結(jié)果也表明對(duì)體外培養(yǎng)的終板軟骨細(xì)胞加載機(jī)械循環(huán)張力能促進(jìn)其的鈣化,同時(shí)也能改變Ank基因的表達(dá),但對(duì)于壓力刺激的結(jié)果是否相同仍是未知。我們推測(cè)力學(xué)刺激對(duì)Ank基因表達(dá)的影響是通過改變TGF-β1的表達(dá)量實(shí)現(xiàn)的。本實(shí)驗(yàn)通過體外對(duì)終板軟骨細(xì)胞加載機(jī)械循環(huán)壓力,探究壓力對(duì)其Ank基因表達(dá)的影響,并探討其機(jī)制。 方法大鼠終板軟骨細(xì)胞的分離,制備大鼠終板軟骨細(xì)胞瓊脂糖模板進(jìn)行培養(yǎng),然后通過FX-5000T對(duì)大鼠終板軟骨細(xì)胞瓊脂糖模板加載機(jī)械循環(huán)壓力。通過活死染色對(duì)細(xì)胞進(jìn)行活死分析,通過RT-PCR和Western blotting檢測(cè)Ank基因表達(dá),通過RT-PCR和ELISA檢測(cè)TGF-β1的表達(dá),,通過激光共聚焦檢測(cè)細(xì)胞的形態(tài)變化跟免疫熒光。 結(jié)果大鼠終板軟骨細(xì)胞加載機(jī)械循環(huán)壓力后實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的Ank基因和TGF-β1表達(dá)量均降低了。實(shí)驗(yàn)組中添加了TGF-β1的組Ank基因表達(dá)量上調(diào),而添加了SB431542的組Ank基因表達(dá)量下降。加載機(jī)械循環(huán)壓力的實(shí)驗(yàn)組跟實(shí)驗(yàn)對(duì)照組活死染色沒有顯著改變。 結(jié)論目前的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,壓力刺激下終板軟骨ank基因表達(dá)量的變化可能是通過改變TGF-β1表達(dá)量進(jìn)行調(diào)控的,這個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可能在椎間盤退變的治療中提供一種新的方法。
【關(guān)鍵詞】:椎間盤 終板軟骨細(xì)胞 短時(shí)間機(jī)械循環(huán)壓力 Ank基因
【學(xué)位授予單位】:皖南醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R329.2
【目錄】:
- 中英文縮略詞對(duì)照表5-8
- 摘要8-9
- Abstract9-11
- 前言11-14
- 研究?jī)?nèi)容和材料14-25
- 1. 研究?jī)?nèi)容14-15
- 2. 材料15-17
- 3. 方法17-25
- 4. 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法25
- 結(jié)果25-31
- 討論31-35
- 結(jié)論35-36
- 參考文獻(xiàn)36-42
- 附 錄42-46
- 綜述46-56
- 參考文獻(xiàn)51-56
- 作者簡(jiǎn)介及讀研期間主要科研成果56-57
- 致謝57
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3 張e
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