本文關(guān)鍵詞：畢赤酵母STE13基因敲除對GGH表達及其生物活性的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:重組畢赤酵母GS115/pPIC9K-GGH表達的人胰高血糖素樣肽-1-人血清白蛋白融合蛋白[(GLP-1 A2G)2-HSA,GGH]的細胞活性測評結(jié)果顯示生物活性較低,這可能與其表達過程中蛋白降解有一定關(guān)聯(lián)。通過對畢赤酵母GS115 STE13基因的敲除,獲得一株完整表達蛋白GGH的畢赤酵母宿主,并進一步提高其表達產(chǎn)物GGH的生物活性。方法:采用基于PCR技術(shù)介導的Cre-Loxp系統(tǒng)重組技術(shù)成功敲除宿主菌GS115的STE13基因,得到一株STE13缺陷型菌株GS115/D13,并通過細胞活性測評系統(tǒng)檢測GS115/D13表達產(chǎn)物GGH的生物活性。結(jié)果:通過對STE13基因缺陷型菌株GS115/D13與出發(fā)菌株GS115/W發(fā)酵表達對比,顯示GS115/D13菌株表達融合蛋白GGH生物活性有明顯提升,且表達量提高了25.8%,兩菌株生長無明顯差異。結(jié)論:STE13基因的敲除成功緩解了GGH表達過程中的降解問題,并相對出發(fā)菌株GS115/W大幅度提高了蛋白生物活性。
【作者單位】： 江南大學藥學院制藥工程實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 畢赤酵母 GLP- STE 生物活性
【基金】：國家自然科學基金(31000016) 江蘇省科技支撐計劃(BE2009629)
【分類號】：Q78
【正文快照】： 胰高糖素樣多肽-1(Glucagon-like peptide-1,GLP-1)是由腸道L細胞合成和分泌的30肽,不僅具有保護胰島β細胞并抑制其凋亡、促進胰島素合成和分泌的作用,還可作用于胰島α細胞,強烈抑制胰高血糖素的釋放,此外還可以作用于胰島δ細胞,促進生長抑素的分泌,而后者又可作為旁分泌

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本文編號：334969