本文關(guān)鍵詞：柚皮苷對(duì)D-半乳糖誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞衰老的保護(hù)作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的本研究旨在從細(xì)胞水平研究柚皮苷(Naringin)對(duì)D-半乳糖誘導(dǎo)的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)衰老的保護(hù)機(jī)制，探討P16，P21，，P53，tgfb1mRNA衰老相關(guān)基因在柚皮苷抗衰老中的重要作用，為今后柚皮苷作為延緩衰老治療提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法（1）通過全骨髓貼壁法體外分離、培養(yǎng)、純化大鼠BMSCs，通過形態(tài)學(xué)觀察，繪制其生長曲線，分別向成骨、成脂方向誘導(dǎo)分化。（2）建立衰老模型：取48163264g"L濃度的D-半乳糖分別作用于第3代BMSCs，用MTT法檢測(cè)細(xì)胞存活率，β-半乳糖苷酶染色觀察細(xì)胞衰老染色率。結(jié)合MTT實(shí)驗(yàn)及β-半乳糖苷酶染色法，確定以16g"L的D-半乳糖處理第3代BMSCs，培養(yǎng)至第6代，即為D-半乳糖誘導(dǎo)的大鼠MSCs衰老模型。（3）將BMSCs為對(duì)照組、16g"L D-半乳糖誘導(dǎo)的BMSCs為衰老組，衰老組分別加入10㧟7、10㧟6、10㧟5、10㧟4、10㧟3、10㧟2mmol／L濃度柚皮苷作為保護(hù)組。分別用MTT法檢測(cè)各干預(yù)組細(xì)胞增殖活力，β-半乳糖苷酶染色法檢測(cè)細(xì)胞衰老程度,總SOD檢測(cè)試劑盒檢測(cè)各組總SOD活性。用RT-PCR法檢測(cè)各組細(xì)胞中衰老相關(guān)基因P16，P21，P53，tgfb1mRNA的表達(dá)水平。 結(jié)果（1）大鼠BMSCs生長以梭形細(xì)胞為主，細(xì)胞生長良好，傳代后可連續(xù)穩(wěn)定傳代10代以上。測(cè)其生長曲線顯示大鼠BMSCs符合正常細(xì)胞生長特征且生長較旺盛。對(duì)其分別進(jìn)行成脂、成骨誘導(dǎo)后，油紅O染色、堿性磷酸酶染色和茜素紅染色均呈陽性。（2）48163264g"L的D-半乳糖處理年輕BMSCs后，與對(duì)照組相比較各組細(xì)胞存活率呈現(xiàn)不同程度下降(P0.05)。β-半乳糖苷酶染色法下48163264g"L濃度的D-半乳糖處理后細(xì)胞染色率均高于對(duì)照組(P0.05)。（3）衰老組分別加入10㧟7、10㧟6、10㧟5、10㧟4、10㧟3、10㧟2mmol／L濃度的柚皮苷保護(hù)后，柚皮苷保護(hù)組細(xì)胞存活率均高于衰老組(P0.05)。各濃度柚皮苷保護(hù)組β-半乳糖苷酶染色比衰老組均有所降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。各濃度柚皮苷保護(hù)組總SOD活性高于衰老組(P0.05)。10㧟7、10㧟6、10㧟5、10㧟4mmol／L濃度的柚皮苷能明顯下調(diào)p16的表達(dá)(P0.05)，10㧟7、10㧟6、10㧟5、10㧟4、10㧟3mmol／L濃度的柚皮苷能明顯下調(diào)p21的表達(dá)(P0.05)，各濃度的柚皮苷均能明顯下調(diào)P53、tgf β1的表達(dá)(P0.05)。 結(jié)論柚皮苷可以減緩BMSCs衰老進(jìn)程，其機(jī)制可能與抑制P16，P21，P53，tgf β1mRNA的表達(dá)有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：BMSCs 衰老機(jī)制 保護(hù)作用
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R329.2
【目錄】：

• 縮略詞表4-5
• 摘要5-7
• ABSTRACT7-10
• 前言10-12
• 實(shí)驗(yàn)材料12-14
• 實(shí)驗(yàn)方法14-17
• 試驗(yàn)步驟17-22
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果22-34
• 討論34-39
• 結(jié)論39-40
• 參考文獻(xiàn)40-43
• 文獻(xiàn)綜述43-59
• 參考文獻(xiàn)55-59
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄59-60
• 致謝60

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 翟遠(yuǎn)坤;牛銀波;潘亞磊;李晨睿;武祥龍;梅其炳;;柚皮苷對(duì)體外培養(yǎng)乳鼠顱骨成骨細(xì)胞增殖和分化成熟的影響[J];中國中藥雜志;2013年01期

2 阮清偉;俞卓偉;保志軍;馬永興;;免疫基因多態(tài)性與衰老和增齡相關(guān)疾病關(guān)系[J];遺傳;2013年07期

  本文關(guān)鍵詞：柚皮苷對(duì)D-半乳糖誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞衰老的保護(hù)作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：334908