本文關(guān)鍵詞：降鈣素基因相關(guān)肽對骨質(zhì)疏松大鼠骨髓基質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：研究體外降鈣素相關(guān)基因肽(Calcitonin gene-related peptide, CGRP)對骨質(zhì)疏松性大鼠的骨髓基質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)增殖及成骨分化能力的影響；并初步探明其促進(jìn)骨質(zhì)疏松性骨折愈合的細(xì)胞／分子作用機(jī)制。方法：取3月齡SD大鼠,行腹部切口雙側(cè)卵巢切除術(shù),術(shù)后所有動物常規(guī)喂養(yǎng)12周。術(shù)前與術(shù)后行骨密度檢測,確定建模成功后,處死大鼠。采用全血貼壁法分離骨髓基質(zhì)干細(xì)胞,并用流式細(xì)胞儀鑒定BMSCs。將細(xì)胞擴(kuò)增傳代至第三代,根據(jù)分組,培養(yǎng)基中加入含不同濃度(10-7mol/L～10-10mol/L)的CGRP。細(xì)胞的增殖能力用MTT法檢測;堿性磷酸酶染色及茜素紅染色法觀察CGRP對骨質(zhì)疏松性大鼠BMSCs的成骨分化及細(xì)胞外基質(zhì)礦化能力的影響。最后采用RT-PCR方法檢測堿性磷酸酶(ALP)、I型膠原(COLL-1)、 BMP-2、RunX2、骨粘連蛋白(Osteonectin)等成骨相關(guān)細(xì)胞基因mRNA的表達(dá)。結(jié)果：成功分離培養(yǎng)出骨質(zhì)疏松性大鼠的骨髓基質(zhì)干細(xì)胞,MTT法測定CGRP組各濃度均較對照組增加,且呈劑量依賴關(guān)系,差異有顯著性(P0.05)；堿性磷酸酶染色及鈣結(jié)節(jié)染色結(jié)果顯示,各CGRP組染色均呈陽性,而對照組無顯色。基因檢測結(jié)果提示,各CGRP組的基因表達(dá)較對照組升高(P0.05)。結(jié)論：適當(dāng)濃度(10-7mol/L～10-10mol/L)的CGRP可以促進(jìn)骨質(zhì)疏松性大鼠體外培養(yǎng)的BMSCs增殖,呈濃度依賴性,并可以提高其成骨分化的能力。為CGRP在治療骨質(zhì)疏松性骨折的骨修復(fù)中的作用提供細(xì)胞/分子學(xué)依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP) 骨質(zhì)疏松 骨髓基質(zhì)干細(xì)胞 成骨分化
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R329.2
【目錄】：

• 摘要4-5
• ABSTRACT5-6
• 前言6-7
• 1. 材料和方法7-14
• (1) 材料7-8
• (2) 分組與造模8-9
• (3) 骨質(zhì)疏松性SD大鼠BMSCs分離培養(yǎng)及鑒定9-10
• (4) 骨髓基質(zhì)干細(xì)胞增殖情況檢測10
• (5) 骨質(zhì)疏松性骨髓基質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞誘導(dǎo)分化情況檢測10-13
• (6) 統(tǒng)計學(xué)處理13-14
• 2. 結(jié)果14-20
• (1) 細(xì)胞表型特征鑒定14-15
• (2) 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察(HE染色)15-16
• (3) CGRP對細(xì)胞增殖率的影響16-17
• (4) 堿性磷酸酶染色情況17-18
• (5) 鈣結(jié)節(jié)染色情況18-19
• (6) CGRP對成骨細(xì)胞相關(guān)基因表達(dá)水平的影響19-20
• 3. 討論20-25
• 4. 結(jié)論25
• 參考文獻(xiàn)25-31
• 附錄1 中英文縮略詞表31-32
• 致謝32-33
• 綜述33-44
• 參考文獻(xiàn)41-44

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

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本文編號：333897