本文關(guān)鍵詞：Axin1在小鼠卵母細胞成熟中的作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：哺乳動物的初級卵母細胞通過減數(shù)分裂而形成一個單倍體的卵子。卵母細胞的減數(shù)分裂過程有著嚴格精明的調(diào)控機制。Axin1是Wnt信號通路的一個負調(diào)控因子,是一個有多重功能的骨架蛋白,在有絲分裂過程中參與了中心體的分離、紡錘體組裝等過程。但是Axin1在減數(shù)分裂中,特別是哺乳動物減數(shù)分裂中的作用目前還不是很清楚。本研究用小鼠卵母細胞為研究對象,對Axin1在哺乳動物減數(shù)分裂進程中的定位特點和功能進行了研究。首先采用免疫熒光檢測了小鼠卵母細胞中的Axin1定位。Axin1在減數(shù)分裂過程中都定位在染色體周圍。為了研究Axin1在卵母細胞發(fā)育過程中的生物學功能,我們采用了siRNA注射的方法降調(diào)Axin1的表達,通過Real time qPCR實驗,結(jié)果顯示Axin1具有較高的干涉效率。降調(diào)Axin1表達后,我們發(fā)現(xiàn)異常形態(tài)的紡錘體比例升高,主要為單極、多極及無極,還有拉長的紡錘體等；同時還發(fā)現(xiàn)染色體排列紊亂；第一極體排出率降低,以及MTOC相關(guān)蛋白y-tubulin從紡錘體兩極脫落。并且小鼠卵母細胞減數(shù)分裂進程受到影響,紡錘體檢驗點蛋白試驗發(fā)現(xiàn)Axin1降調(diào)后激活了紡錘體檢驗點蛋白的活性。通過以上研究得出,小鼠卵母細胞中的Axin1可能作為微管組織中心相關(guān)蛋白,調(diào)控著紡錘體組裝和穩(wěn)定以及紡錘體極的形成,和影響卵母細胞減數(shù)分裂進程。
【關(guān)鍵詞】：Axin1 小鼠卵母細胞 減數(shù)分裂 紡錘體
【學位授予單位】：廈門大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R321
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-10
• 第一章 前言10-24
• 第二章 材料與方法24-35
• 2.1 實驗動物24
• 2.2 試劑與儀器24-26
• 2.2.1 藥品與試劑24-26
• 2.2.2 主要儀器26
• 2.3 小鼠卵母細胞的獲取及體外培養(yǎng)26-27
• 2.4 卵母細胞免疫熒光染色27-29
• 2.5 卵母細胞顯微注射29-30
• 2.6 實時定量PCR實驗30-34
• 2.6.1 卵母細胞總RNA的抽提30-32
• 2.6.2 總RNA的逆轉(zhuǎn)錄PCR反應32-33
• 2.6.3 Real time qPCR反應33-34
• 2.7 統(tǒng)計學分析34-35
• 第三章 實驗結(jié)果35-42
• 3.1 小鼠卵母細胞減數(shù)分裂成熟過程中Axin1的定位35-36
• 3.2 Axin1 siRNA干涉效率驗證36
• 3.3 降調(diào)Axin1會導致紡錘體組裝和染色體排列不正常36-39
• 3.4 降調(diào)Axin1導致小鼠卵母細胞極體排放率下降39
• 3.5 降調(diào)Axin1的表達會導致γ-tubulin從紡錘體的兩極脫落39-40
• 3.6 降調(diào)Axin1的表達激活紡錘體檢驗點活性40-42
• 第四章 討論42-44
• 第五章 結(jié)論44-45
• 附錄45-46
• 參考文獻46-58
• 致謝58

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

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本文編號：330875