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探討人未成熟卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)成熟的價(jià)值

發(fā)布時(shí)間:2017-04-27 02:06

  本文關(guān)鍵詞:探討人未成熟卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)成熟的價(jià)值,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的: 研究來(lái)源于常規(guī)超排卵周期體外受精-胚胎移植或卵胞漿內(nèi)單精子注射(IVF/ICSI-ET)的未成熟卵母細(xì)胞,觀察其在商品化IVM培養(yǎng)液中以及人輸卵管液(HTF)中體外培養(yǎng)成熟、受精、胚胎發(fā)育及囊胚形成能力,探討人未成熟卵母細(xì)胞在體外成熟后的應(yīng)用價(jià)值。 方法: 選擇在我中心行常規(guī)超排卵周期IVF/ICSI-ET助孕的58例患者,將周期中獲得的未成熟卵母細(xì)胞按照不同培養(yǎng)液培養(yǎng)(IVM培養(yǎng)液和HTF培養(yǎng)液),不同開(kāi)始培養(yǎng)時(shí)間(取卵后4h.10h.24h),不同生長(zhǎng)階段(GV期和MI期),不同成熟來(lái)源(體內(nèi)和體外)等分組。將未成熟卵母細(xì)胞進(jìn)行體外成熟培養(yǎng),成熟卵子行ICSI授精后進(jìn)行胚胎培養(yǎng),第三天選擇1,2級(jí)胚胎進(jìn)行囊胚培養(yǎng)。比較分析上述分組的卵母細(xì)胞成熟率,受精率,卵裂率和1,2級(jí)胚胎率等情況。 結(jié)果: 1.兩組培養(yǎng)液中,IVM組成熟率,受精率,卵裂率,1,2級(jí)胚胎率均高于HTF組,受精率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(68.57%和36.73%,P<0.05)。 2.兩組培養(yǎng)液中開(kāi)始培養(yǎng)的時(shí)間D24h組與D4h組相比,成熟率,受精率,卵裂率均差于D4h組,受精率(P<0.05)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩種液體中D10h與D4h相比,成熟率,受精率,卵裂率雖較D4h組差,統(tǒng)計(jì)學(xué)是無(wú)差異的。 3.IVM培養(yǎng)液中,MI期卵母細(xì)胞的成熟率,受精率,卵裂率均高于GV期卵母細(xì)胞,,成熟率(80.36%和55.55%,P<0.01)和卵裂率(71.11%和64%,P<0.05)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在HTF培養(yǎng)液中,MI期卵母細(xì)胞的成熟率,受精率,卵裂率均高于GV期,其中成熟率(68.89%和43.9%,P<0.01)和受精率(41.93%和27.77%,P<0.05)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 4.體外的IVM組和HTF組與同源體內(nèi)組相比,卵裂率(77.08%,72.22%,92.71. P<0.05),1,2級(jí)胚胎率(59.45%,30.76%,79.84%.P<0.05)均低于同源體內(nèi)組,統(tǒng)計(jì)學(xué)差異具有顯著性。HTF組與同源體內(nèi)組相比受精率(36.73%和65.92%,P<0.05)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 5.187個(gè)未成熟卵母細(xì)胞經(jīng)體外培養(yǎng)成熟后得到的26個(gè)1,2級(jí)胚胎進(jìn)行囊胚培養(yǎng)共形成5個(gè)囊胚。 結(jié)論: 1.控制性超排卵周期中獲得的未成熟卵母細(xì)胞能夠在體外發(fā)育成熟并形成正常受精的胚胎。 2.未成熟卵母細(xì)胞在IVM培養(yǎng)液比在HTF培養(yǎng)液中培養(yǎng)更有利于卵母細(xì)胞的發(fā)育。 3.IVM開(kāi)始培養(yǎng)的時(shí)間可以選在取卵后10h內(nèi)進(jìn)行。 4.正常超排卵周期獲得的MI期的卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)比GV期的卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)更容易成熟且得到質(zhì)量較好的胚胎。 5.未成熟卵母細(xì)胞經(jīng)體外培養(yǎng)成熟后仍有形成囊胚的潛能。
【關(guān)鍵詞】:未成熟卵母細(xì)胞 體外培養(yǎng) 卵胞漿內(nèi)單精子顯微注射 囊胚
【學(xué)位授予單位】:南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R329.2
【目錄】:
  • 摘要3-5
  • ABSTRACT5-10
  • 第1章 前言10-14
  • 第2章 材料與方法14-22
  • 2.1 研究對(duì)象與分組14-15
  • 2.1.1 研究對(duì)象14
  • 2.1.2 分組情況14-15
  • 2.1.3 周期入選標(biāo)準(zhǔn)15
  • 2.2 主要儀器,試劑及試劑的配制15-17
  • 2.2.1 主要儀器15
  • 2.2.2 主要使用的試劑15-16
  • 2.2.3 主要試劑的配置16-17
  • 2.3 方法17-21
  • 2.3.1 常規(guī)促排卵及取卵17
  • 2.3.2 篩卵17
  • 2.3.3 未成熟卵母細(xì)胞的獲取17-18
  • 2.3.4 未成熟卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)以及其成熟觀察18
  • 2.3.5 精液的洗滌18-19
  • 2.3.6 ICSI 授精19-20
  • 2.3.7 觀察受精情況20
  • 2.3.8 胚胎培養(yǎng)及胚胎評(píng)估20
  • 2.3.9 囊胚培養(yǎng)及冷凍20-21
  • 2.4 成熟率、受精率、卵裂率等的計(jì)算21
  • 2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法21-22
  • 第3章 結(jié)果22-26
  • 3.1 入選周期的資料22
  • 3.2 兩組不同培養(yǎng)液的臨床資料結(jié)果22-23
  • 3.3 未成熟卵在兩種培養(yǎng)液中體外培養(yǎng)成熟情況23
  • 3.4 兩組培養(yǎng)液中三個(gè)時(shí)間段開(kāi)始培養(yǎng)的未成熟卵母細(xì)胞體外成熟的情況23-24
  • 3.5 兩種培養(yǎng)液中不同生長(zhǎng)階段的未成熟卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)成熟的情況24-25
  • 3.6 體內(nèi)成熟與體外成熟的卵母細(xì)胞情況對(duì)比25-26
  • 第4章 討論26-32
  • 4.1 IVM 前期體內(nèi) Gn 的應(yīng)用26-27
  • 4.2 培養(yǎng)液對(duì) IVM 的影響27
  • 4.3 培養(yǎng)液中不同生長(zhǎng)階段成熟的卵子的情況27-28
  • 4.4 開(kāi)始培養(yǎng)的時(shí)間對(duì) IVM 的影響28
  • 4.5 精液對(duì) IVM 的影響28-29
  • 4.6 胚胎發(fā)育以及形成囊胚的能力29-30
  • 4.7 IVM 過(guò)程中存在的問(wèn)題30-32
  • 第5章 結(jié)論32-33
  • 致謝33-34
  • 參考文獻(xiàn)34-38
  • 附圖38-42
  • 攻讀學(xué)位期間的研究成果42-43
  • 綜述43-50
  • 參考文獻(xiàn)48-50

  本文關(guān)鍵詞:探討人未成熟卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)成熟的價(jià)值,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):329681

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