發(fā)布時間：2017-04-26 23:12

  本文關鍵詞：拉祜族人群PARL基因Leu262Val多態(tài)性與糖代謝異常的相關性研究及其與漢族人群的比較，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的探討聚合酶鏈反應—限制性片段長度多態(tài)性分析方法(PCR-RFLP)檢測PARL基因Leu262Val多態(tài)性的最佳實驗條件。方法運用降落PCR(touchdown PCR, TD-PCR)方法優(yōu)化PCR條件；對影響PARL基因實驗條件的主要因素諸如：退火溫度、引物濃度、酶切體系、酶切時間等,分別設定系列梯度進行研究。設定不同溫度梯度對普通PCR和降落PCR進行比較分析；對引物設定0.2umol/L、0.4umol/L、0.6umol/L和0.8umol/L四個終濃度梯度進行擴增；在酶切體系中,內切酶量不變,PCR產物量分別設定為5μl、7.5μl、10μl、12.5μl、15μl,酶切時間分別為12h過夜酶切和4h酶切,通過凝膠電泳觀察結果。結果(1)降落PCR方法優(yōu)于普通PCR退火溫度的過程,非特異性產物量少,產物量較多易于識別,擴增片段長度為545bp。(2)引物濃度為0.4μmol/L時,擴增出的目的條帶清晰,且引物二聚體少。(3)酶切體系中加入10μl擴增產物,可以獲得清晰的酶切條帶。(4)溫度為37℃經過4小時酶切后,電泳結果清晰。結論降落PCR擴增效率優(yōu)于普通PCR,其引物最適濃度為0.41μmol/L,實驗循環(huán)數為32個循環(huán)；20μl的酶切體系中加入10μl擴增產物和1μl(10U)內切酶,酶切時間為4h時酶切效果最佳。 目的探討PARL基因Leu262Val多態(tài)性與中國云南臨滄地區(qū)拉祜族人群糖尿病前期及糖尿病的相關性。方法運用聚合酶鏈反應-限制性片段長度多態(tài)性(PCR-RFLP)分析技術,對108例糖尿病前期(PD)患者、52例糖尿病(DM)患者和308例健康對照者(NC)進行PARL基因Leu262Val多態(tài)性檢測。比較分析各組間基因型和等位基因頻率分布及相關臨床生化指標,并根據問卷調查,運用Logistic回歸評估拉祜族糖尿病前期和糖尿病的相關危險因素。結果(1)拉祜族健康對照組、糖尿病前期組和糖尿病組三組間PARL基因Leu262Val多態(tài)性位點基因型和等位基因頻率分布無顯著差異(P0.05)；該位點基因型頻率和等位基因頻率在男性和女性的分布亦無統計學差異(P0.05)。(2)PD組的女性比例、年齡、SBP、DBP、ALT、AST、BUN、CREA、UA、TC、HDL、LDL-C、FPG均高于NC組(P0.05)；DM組女性比例、年齡、ALT、AST、BUN、CREA、UA、TC、HDL-C、LDL-C、FPG均高于NC組(P0.05)；DM組CREA、FPG高于PD組(P0.05)。(3)NC組、PD組和DM組中攜帶PARL基因Leu262Val多態(tài)性不同基因型者的各項臨床指標比較均無顯著差異(P0.05)。(4)Logistic回歸分析表明：在拉祜族人群中,年齡、BMI、高血壓、食物烹調油、文化程度、家庭人均年收入可能是PD和DM發(fā)生的相關因素。結論PARL基因Leu262Val多態(tài)性可能與中國云南臨滄地區(qū)拉祜族人群糖尿病前期及糖尿病的發(fā)生無明顯相關；ALT、AST、BUN、CREA、TC、LDL-C等可能和拉祜族人群PD及DM發(fā)生有關；年齡、BMI、高血壓、食物烹調油、文化程度、家庭人均年收入可能是PD和DM發(fā)生的相關因素。 目的探討PARL基因Leu262Val多態(tài)性和中國云南昆明地區(qū)漢族人群2型糖尿病的相關性。方法運用聚合酶鏈反應-限制性片段長度多態(tài)性(PCR-RFLP)分析技術,對145例糖尿病患者和111例健康對照者進行PARL基因Leu262Val多態(tài)性檢測,對各組間基因型和等位基因分布頻率進行比較,并評價相關臨床資料和生化指標。結果(1)糖尿病組和健康對照組兩組間三種基因型分布和等位基因頻率比較無統計學差異(P0.05)；該位點基因型和等位基因頻率在男性和女性的分布亦無統計學差異(P0.05)。(2)NC組年齡、BMI、SBP、DBP、TG、LDL-C、 CREA、ALT、FPG水平均低于DM組,HDL-C水平高于DM組(P0.05)。(3)分別比較NC組和DM組中攜帶該多態(tài)性位點不同基因型的臨床及生化指標,指標在GG型和CC+GC型兩組間比較無統計學差異(P0.05)。結論昆明地區(qū)漢族人群中PARL基因Leu262Val多態(tài)性可能與2型糖尿病的發(fā)生無相關性；SBP、DBP、TG、LDL-C等可能和IT2DM發(fā)生相關。 目的對PARL基因Leu262Val多態(tài)性在中國云南臨滄地區(qū)拉祜族和昆明地區(qū)漢族人群中是否存在異質性進行探討。方法根據之前的研究,選取360例拉祜族人群(其中308例健康對照人群,52例糖尿病人群)、256例漢族人群(其中111例健康對照人群,145例糖尿病人群)。比較分析兩民族間PARL基因Leu262Val多態(tài)性位點的基因型和等位基因分布頻率、并評價相關臨床資料和生化指標。結果(1)拉祜族和漢族總體人群的基因型及等位基因分布頻率不同,差異有顯著性統計學意義(P0.001)。(2)拉祜族與漢族健康對照人群基因型和等位基因分布頻率不同,差異有顯著性統計學意義(P0.001)。(3)拉祜族與漢族糖尿病人群基因型和等位基因分布頻率不同,有統計學意義(P0.05)。(4)兩民族正常人群中,漢族年齡、ALT、BUN、CREA、TC、HDL-C、LDL-C水平均高于拉祜族(P0.05)。(5)兩民族糖尿病人群中,漢族ALT、TG水平高于拉祜族,SBP、AST、CREA、UA水平低于拉祜族,(P0.05)。結論拉祜族人群和漢族人群PARL基因Leu262Val多態(tài)性位點的基因型頻率及等位基因分布頻率可能存在種族差異。
【關鍵詞】：聚合酶鏈反應 限制性片段長度多態(tài)性 實驗條件 早老素相關菱形樣蛋白(PARL) 拉祜族 PARL基因 多態(tài)性 糖尿病前期 2型糖尿病 糖尿病 2型 PARL基因 多態(tài)性 糖尿病 2型 PARL基因 種族差異 遺傳異質性
【學位授予單位】：昆明醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R587.1;R3416
【目錄】：

• 文中主要英文縮寫6-8
• 第一部分8-10
• 摘要8-9
• Abastract9-10
• 第二部分10-13
• 摘要10-11
• Abastract11-13
• 第三部分13-15
• 摘要13-14
• Abastract14-15
• 第四部分15-17
• 摘要15-16
• Abastract16-17
• 第一部分 PCR-RFLP方法檢測PARL基因Leu262Val多態(tài)性的實驗研究17-30
• 第二部分 拉祜族人群中PARL基因Leu262Val多態(tài)性與糖尿病前期和糖尿病的相關性研究30-43
• 第三部分 漢族人群中PARL基因Leu262Val多態(tài)性與2型糖尿病相關性研究43-52
• 第四部分 拉祜族和漢族人群中PARL基因Leu262Val多態(tài)性的比較52-61
• 綜述61-71
• 參考文獻68-71
• 攻讀學位期間發(fā)表文章情況71-72
• 致謝72

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前1條

1 唐偉;高遠;俞丹;楊濤;;中老年血脂異常人群易患糖代謝異常的研究[J];實用老年醫(yī)學;2011年02期

  本文關鍵詞：拉祜族人群PARL基因Leu262Val多態(tài)性與糖代謝異常的相關性研究及其與漢族人群的比較，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：329432