本文關(guān)鍵詞：裸鼠小肝綜合征模型的建立和肝細(xì)胞再生特點(diǎn)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：通過(guò)肝大部切除術(shù)建立裸鼠小肝綜合征模型。通過(guò)生存曲線、肝功能檢測(cè)、肝臟活檢及病理學(xué)檢測(cè)，對(duì)模型進(jìn)行評(píng)價(jià)。探討小肝綜合征模型建立的方法、可行性、條件及其肝細(xì)胞再生特性。方法：先取10只裸鼠進(jìn)行肝臟解剖，對(duì)其進(jìn)行在體及離體肝臟解剖學(xué)觀察。了解肝臟解剖結(jié)構(gòu)、裸鼠肝臟與體重的百分比和各肝葉占肝臟的比重。制定肝葉切除方法，熟練肝大部切除術(shù)。將40只幼齡裸鼠（5周齡,體重22.3±1.8g）隨機(jī)分為4組，每組10只，進(jìn)行不同比例的肝部分切除術(shù)。分別為組1：切除25%肝組織；組2：切除50%肝組織；組3：切除75%肝組織；組4：切除80%肝組織。觀察裸鼠術(shù)后的生存狀況、生存時(shí)間(d），統(tǒng)計(jì)其生存曲線；手術(shù)前1h和手術(shù)后1、4、7、14、21、28d各組裸鼠經(jīng)心臟穿刺取血0.1ml，測(cè)定血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶（Alanine transaminase,ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（aspartate aminotransferase,AST）、總膽紅素（totalbilirubin,TBIL）、白蛋白（albumin,ALB）值。術(shù)中切除的正常肝組織及手術(shù)后2、7、28、60d時(shí)行裸鼠肝組織活檢（死亡裸鼠及時(shí)尸解和肝組織標(biāo)本取檢），行蘇木精-伊紅染色法(hematoxylin and eosin stain,HE)染色、病理組織學(xué)光鏡觀察；同時(shí)，標(biāo)本行肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(hepatocytegrowth factor,HGF)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)的免疫組化檢測(cè)。組間數(shù)據(jù)的比較采用重復(fù)測(cè)量方差分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)а=0.05，P0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果：①裸鼠肝臟大致分為六葉，約占體重的（3.63±0.05）%，其中左葉占肝臟比例為（38.44±0.41）%，中葉占（26.44±0.59）%，三角葉占（14.08±0.33）%，，尾狀葉占（11.84±0.53）%，右上葉占（3.49±0.28）%，右下葉占（5.71±0.22）%。②組1、2、3、4裸鼠術(shù)后60d存活率分別為100%、100%、70%和20%。③肝組織大體觀察：術(shù)前裸鼠肝臟色澤紅潤(rùn)，質(zhì)地柔軟。肝葉切除術(shù)后死亡裸鼠進(jìn)行解剖尸檢可見(jiàn)剩余肝臟組織色澤黃，呈淤膽狀態(tài)，不同程度的脂肪變性，淤血腫脹，體積增大，質(zhì)地較正常肝組織稍硬，腹腔可見(jiàn)少量腹水。術(shù)后第2d，組1、2肝組織色澤紅潤(rùn),質(zhì)地軟；組3、4術(shù)后肝組織顏色稍暗，質(zhì)地稍硬，其中組4腹腔中有少量腹水。術(shù)后第7d，組1、2肝組織紅潤(rùn),質(zhì)地柔軟，肝臟組織體積再生；組3、4可見(jiàn)肝臟組織顏色較之前紅潤(rùn)，質(zhì)地較正常肝組織稍硬，但有部分裸鼠殘留肝組織外觀有脂肪肝樣變化。術(shù)后28d可見(jiàn)組1、2、3、4肝臟組織體積幾乎與術(shù)前肝臟體積相等,組3、4肝臟組織顏色較之前紅潤(rùn)，質(zhì)地柔軟。術(shù)后第60d處死裸鼠后切取肝臟，可見(jiàn)各組肝臟體積較術(shù)前明顯增大，重量較術(shù)前平均值增加，肝重占比明顯增加。④組1術(shù)前、術(shù)后ALT、AST、IBIL值無(wú)明顯變化。組2術(shù)后1d ALT、AST、IBIL均輕度升高，術(shù)后第4d逐漸下降，術(shù)后第7d成穩(wěn)定狀態(tài)。術(shù)后第1d,組3、4裸鼠ALT、AST、IBIL值均明顯升高。組4ALT達(dá)到520.42±28.35U/L、AST447.10±56.45U/L、TBIL9.10±0.35umol/L。術(shù)后第1d,組3、4ALB值明顯下降,組4裸鼠ALB最低，為32.42±1.83U/L。⑤HE染色：術(shù)前所取得正常肝臟組織行HE染色示:中央靜脈清晰,肝細(xì)胞胞質(zhì)及胞核清晰,無(wú)炎細(xì)胞浸潤(rùn)。組1、2術(shù)后第2d獲取的肝組織標(biāo)本HE染色顯示:中央靜脈輕度淤血,間質(zhì)稍水腫、肝細(xì)胞漿疏松,中央靜脈和肝竇輕度擴(kuò)張,匯管區(qū)有少量炎細(xì)胞浸潤(rùn)；術(shù)后第60d基本恢復(fù)正常肝臟組織結(jié)構(gòu)。組3術(shù)后第2d肝臟活檢HE染色示:中央靜脈中度淤血,間質(zhì)水腫,竇內(nèi)有明顯的血栓形成,散在的肝細(xì)胞壞死，少量細(xì)胞空泡化，匯管區(qū)存在較多炎細(xì)胞浸潤(rùn)。術(shù)后60d可見(jiàn)肝竇稍擴(kuò)張，胞質(zhì)及細(xì)胞核清晰。組4術(shù)后第2d肝臟活檢HE染色示中央靜脈重度淤血、大片的肝細(xì)胞壞死。術(shù)后60d可見(jiàn)少許肝細(xì)胞空泡化呈氣球樣變、細(xì)胞脂肪變性，但有明顯肝細(xì)胞再生。⑥術(shù)前取得的正常的肝組織標(biāo)本中無(wú)IL-6免疫陽(yáng)性物表達(dá),而組1術(shù)后肝細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)可見(jiàn)少量棕黃色I(xiàn)L-6免疫陽(yáng)性物表達(dá)；組2、3術(shù)后第2d可見(jiàn)少量的IL-6免疫陽(yáng)性物表達(dá)，術(shù)后7d可見(jiàn)大量的IL-6免疫陽(yáng)性物表達(dá)，術(shù)后28、60d IL-6免疫陽(yáng)性物表達(dá)逐漸下降；組4術(shù)后第2、7d可見(jiàn)IL-6陽(yáng)性表達(dá)，術(shù)后28、60d陽(yáng)性表達(dá)下降，死亡的裸鼠肝組織中可見(jiàn)少量的IL-6免疫陽(yáng)性物表達(dá)。⑦HGF在術(shù)前的正常裸鼠肝組織內(nèi)表達(dá)很少。而在術(shù)后組1裸鼠肝組織中可見(jiàn)HGF少量的表達(dá)；組2術(shù)后第2d、7d裸鼠肝組織中可見(jiàn)HGF大量表達(dá)，術(shù)后28、60d表達(dá)逐漸降低；組3、4中術(shù)后2d、7d可見(jiàn)大量的HGF表達(dá)的同時(shí)可見(jiàn)肝組織碎片狀壞死，術(shù)后28d、60d HGF陽(yáng)性表達(dá)下降。 結(jié)論：1．切除80%裸鼠肝臟可成功建立小肝綜合征裸鼠模型。2．裸鼠肝臟切除后IL-6、HGF表達(dá)增加，與肝細(xì)胞再生有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：裸鼠 肝臟 小肝綜合征 模型
【學(xué)位授予單位】：瀘州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R657.3;R-332
【目錄】：

• 目錄3-4
• 摘要4-7
• ABSTRACT7-11
• 前言11-13
• 材料與方法13-18
• 結(jié)果18-34
• 討論34-39
• 結(jié)論39-40
• 參考文獻(xiàn)40-43
• 英漢縮略詞對(duì)照表43-44
• 致謝44-45
• 綜述45-62
• 參考文獻(xiàn)55-62

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 楊永平;;肝細(xì)胞移植:臨床應(yīng)用及實(shí)驗(yàn)室研究[J];傳染病信息;2005年03期

2 徐葵花;趙守松;;肝細(xì)胞移植治療肝功能衰竭的研究進(jìn)展[J];實(shí)用肝臟病雜志;2006年03期

3 呂春燕;馬躍榮;;小鼠心臟穿刺采血并存活的幾點(diǎn)注意事項(xiàng)[J];瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2006年03期

  本文關(guān)鍵詞：裸鼠小肝綜合征模型的建立和肝細(xì)胞再生特點(diǎn)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：329324