發(fā)布時(shí)間：2017-04-26 17:17

  本文關(guān)鍵詞：SREBP-1c對(duì)骨骼肌細(xì)胞IRS-1表達(dá)調(diào)控的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：探討固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1c (SREBP-1c)對(duì)大鼠骨骼肌細(xì)胞胰島素受體底物1(IRS-1)表達(dá)調(diào)控的影響。 方法：采用酶聯(lián)合消化法取2-3d SPF級(jí)雄性SD大鼠原代骨骼肌細(xì)胞,將原代細(xì)胞分為對(duì)照組(C)、對(duì)照+胰島素組(C+I)、高脂組(PA)及高脂+胰島素組(PA+I)。將L6骨骼肌細(xì)胞誘導(dǎo)分化直至肌管結(jié)構(gòu)出現(xiàn),將L6細(xì)胞分為對(duì)照組(C)、對(duì)照+胰島素組(C+I)、高脂組(PA)、高脂+胰島素組(PA+I)、高脂+二甲雙胍組(PA+MET)。將表達(dá)SREBP-1c腺病毒轉(zhuǎn)染L6細(xì)胞,根據(jù)感染復(fù)數(shù)(MOI)分為含綠色熒光蛋白陰性載體(GFP)組、MOI值為5、50、100、200組。將靶基因?yàn)镾REBP-1c的干擾RNA (siRNA)轉(zhuǎn)染L6細(xì)胞,并分為空白對(duì)照組、陰性siRNA組及SREBP-1c siRNA組。免疫熒光法鑒定原代骨骼肌細(xì)胞,油紅O染色法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積情況,Western blotting和實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)SREBP-1c、IRS-1、蛋白激酶B(Akt)、哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)基因及蛋白表達(dá)。多組資料比較采用方差分析,兩兩比較采用最小差異顯著差異法。 結(jié)果：(1)將原代細(xì)胞行結(jié)蛋白免疫熒光染色,90%以上的細(xì)胞胞漿染色陽性,證明培養(yǎng)的為骨骼肌細(xì)胞。高脂處理原代細(xì)胞24h后,行油紅O染色,骨骼肌細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)大量紅色脂滴。 (2)與C組相比,PA組SREBP-1c基因和蛋白水平升高(均P0.05),IRS-1基因和蛋白水平降低(均P0.05),絲氨酸磷酸化IRS-1蛋白表達(dá)升高,酪氨酸磷酸化IRS-1和絲氨酸磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表達(dá)下降(均P0.05)。 (3)與GFP組相比,MOI值為50、100和200組的SREBP-1c基因和蛋白表達(dá)呈劑量依賴性上升(均P0.05),IRS-1基因和蛋白表達(dá)水平呈劑量依賴性下降(均P0.05)。MOI值為50和100組酪氨酸磷酸化IRS-1和p-Akt蛋白表達(dá)均顯著下降(均P0.05)。 (4)與空白對(duì)照組和陰性siRNA組相比,SREBP-1c siRNA組SREBP-1c基因和蛋白水平降低(均P0.05),IRS-1蛋白表達(dá)升高(均P0.05) (5)與PA組相比,PA+I組和PA+MET組蘇氨酸磷酸化AMPK、酪氨酸磷酸化IRS-1和p-Akt蛋白表達(dá)均顯著上升(均P0.05),絲氨酸磷酸化mTOR口SREBP-1c蛋白水平降低(均P0.05)。 結(jié)論：SREBP-1c可抑制骨骼肌IRS-1胰島素信號(hào)通路,參與肌細(xì)胞胰島素抵抗的發(fā)生；另外,胰島素和二甲雙胍可抑制高脂時(shí)骨骼肌mTOR-SREBP-1c通路的表達(dá),改善脂毒性導(dǎo)致的胰島素抵抗。
【關(guān)鍵詞】：固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1c 胰島素受體底物1 胰島素抵抗 骨骼肌細(xì)胞 棕櫚酸
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R329
【目錄】：

• 目錄3-5
• 本文主要的英漢名詞~.略對(duì)照表5-8
• 摘要8-10
• Abstract10-13
• 前言13-15
• 一、實(shí)驗(yàn)材料15-22
• 二、實(shí)驗(yàn)方法22-28
• 三、結(jié)果28-41
• 第一部分28-34
• 第二部分34-37
• 第三部分37-39
• 第四部分39-41
• 四、討論41-44
• 五、結(jié)論44
• 參考文獻(xiàn)44-50
• 文獻(xiàn)綜述50-64
• 參考文獻(xiàn)57-64
• 附錄64-65
• 致謝65

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 鄧小華,侍堅(jiān),羅嗣瓊,何成,王成海,路長林;睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子對(duì)大鼠去神經(jīng)骨骼肌的營養(yǎng)作用[J];中國應(yīng)用生理學(xué)雜志;2001年02期

2 白躍宏,張龍海,史桂秋,歐陽頎;慢性骨筋膜室綜合征動(dòng)物模型的建立及骨骼肌病理變化的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國臨床康復(fù);2002年08期

3 張建國,孫強(qiáng),朱建軍,張兆祥;中藥對(duì)小白鼠骨骼肌切傷后再生影響的組織學(xué)觀察[J];中國骨傷;2002年07期

4 張彤云;運(yùn)動(dòng)與骨骼肌細(xì)胞的損傷[J];山西煤炭管理干部學(xué)院學(xué)報(bào);2005年02期

5 曾蓉;宋滇平;嚴(yán)新民;;核受體LXRs與骨骼肌糖脂代謝相關(guān)基因的關(guān)系[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2008年03期

6 周澤淵;于淑湘;史俊南;張建平;金巖;;誘導(dǎo)頜突外胚間充質(zhì)干細(xì)胞向骨骼肌細(xì)胞分化[J];牙體牙髓牙周病學(xué)雜志;2010年03期

7 李勇俊;;運(yùn)動(dòng)防治糖尿病骨骼肌病變的分子機(jī)制研究進(jìn)展[J];遼寧體育科技;2011年02期

8 馬春明,張宏;糖尿病骨骼肌病變發(fā)病機(jī)制[J];遼寧實(shí)用糖尿病雜志;2004年04期

9 王貴平;;自噬對(duì)骨骼肌體積維持的研究現(xiàn)狀[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2011年50期

10 李世光;趙建波;高前進(jìn);李世平;張佳;;運(yùn)動(dòng)誘導(dǎo)的骨骼肌信號(hào)機(jī)制[J];中國組織工程研究;2012年42期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 白躍宏;歐陽頎;楊遠(yuǎn)濱;張龍海;劉樹清;;慢性骨筋膜室綜合征動(dòng)物模型的建立及骨骼肌病理變化的實(shí)驗(yàn)研究[A];全國軟組織疼痛微創(chuàng)技術(shù)專題研討會(huì)論文匯編[C];2004年

2 張學(xué)林;高曉娟;史冀鵬;王瑞元;;骨骼肌超微結(jié)構(gòu)損傷累積與過勞性損傷關(guān)系的研究[A];2011年中國生理學(xué)會(huì)運(yùn)動(dòng)生理學(xué)專業(yè)委員會(huì)會(huì)議暨“運(yùn)動(dòng)與骨骼肌”學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2011年

3 孟艷;翁錫全;林文_";何曉龍;;間歇性爬坡運(yùn)動(dòng)對(duì)老年鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞激活通路中NO-NOS表達(dá)的影響[A];第九屆全國體育科學(xué)大會(huì)論文摘要匯編(4)[C];2011年

4 劉健;黃梅;;Ⅱ型糖原蓄積病患者骨骼肌的超微結(jié)構(gòu)觀察[A];第八次全國電子顯微學(xué)會(huì)議論文摘要集（Ⅰ）[C];1994年

5 白躍宏;歐陽頎;楊遠(yuǎn)濱;張龍海;劉樹清;;慢性骨筋膜室綜合征動(dòng)物模型的建立及骨骼肌病理變化的實(shí)驗(yàn)研究[A];第九屆全國軟組織疼痛學(xué)術(shù)會(huì)議暨首屆中華醫(yī)學(xué)會(huì)疼痛學(xué)會(huì)軟組織疼痛年會(huì)論文匯編[C];2004年

6 任振義;葉健;;COPD過氧化應(yīng)激所致的骨骼肌功能障礙[A];2006年浙江省呼吸系病學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2006年

7 宋淑華;熊開宇;;離子濃度改變對(duì)骨骼肌膜電位和骨骼肌疲勞的研究進(jìn)展[A];2007全國運(yùn)動(dòng)生理學(xué)論文報(bào)告會(huì)論文集[C];2007年

8 任振義;;COPD過氧化應(yīng)激所致的骨骼肌功能障礙[A];浙江省中西醫(yī)結(jié)合呼吸病診治進(jìn)展暨第五次學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2006年

9 賴顥;趙強(qiáng);虞勇;王克強(qiáng);;體外共同培養(yǎng)的鼠骨骼肌成肌細(xì)胞與心肌細(xì)胞間連接的形態(tài)研究[A];第八屆華東六省一市胸心血管外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2005年

10 蘇冠華;劉啟云;盧永昕;米少華;孫雨霏;劉曉明;帥欣欣;;犬骨骼肌成肌細(xì)胞體外分離、純化及培養(yǎng)方法改良探索[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第11次心血管病學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2009年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王文匯;血管緊張素Ⅱ受體與骨骼肌微循環(huán)胰島素抵抗[D];山東大學(xué);2012年

2 呂元軍;吡格列酮對(duì)STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠腎臟和骨骼肌免疫損傷的治療作用[D];天津醫(yī)科大學(xué);2009年

3 李愛春;富氫水對(duì)骨骼肌運(yùn)動(dòng)性氧化應(yīng)激損傷與選擇性抗氧化作用機(jī)制研究[D];蘇州大學(xué);2012年

4 高前進(jìn);骨骼肌熱休克蛋白保護(hù)作用及機(jī)制研究[D];北京體育大學(xué);2006年

5 朱海燕;參芪復(fù)方對(duì)KKAy小鼠糖尿病大血管病變骨骼肌差異基因表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2013年

6 李金茹;缺氧的脂肪細(xì)胞與巨噬細(xì)胞條件培養(yǎng)基對(duì)骨骼肌細(xì)胞胰島素作用的影響[D];天津醫(yī)科大學(xué);2010年

7 彭保衛(wèi);電脈沖介導(dǎo)的DNA疫苗骨骼肌內(nèi)免疫接種的轉(zhuǎn)基因長期表達(dá)和抗原遞呈機(jī)理的研究[D];上海交通大學(xué);2006年

8 孫婧瑜;CD36對(duì)骨骼肌脂肪酸代謝調(diào)控的機(jī)制研究[D];華東師范大學(xué);2014年

9 高宇;高脂飲食老年大鼠骨骼肌脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)與IR相關(guān)機(jī)制及藥物干預(yù)的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2008年

10 王心田;正常人骨骼肌運(yùn)動(dòng)狀態(tài)功能的磁共振動(dòng)態(tài)磷譜研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2008年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李粉;miR-23在小鼠骨骼肌中的表達(dá)及其對(duì)骨骼肌再生調(diào)節(jié)作用的初步研究[D];南京師范大學(xué);2011年

2 涂慧娟;血糖正常的2型糖尿病患者子女骨骼肌能量代謝研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2012年

3 陳博;缺氧誘導(dǎo)因子-1α基因體外轉(zhuǎn)染骨骼肌細(xì)胞及對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響[D];天津醫(yī)科大學(xué);2006年

4 楊寧寧;JNK在骨骼肌源脂聯(lián)素影響骨骼肌胰島素抵抗模型GLUT4表達(dá)中的作用研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2012年

5 秦阿妮;高住高練低訓(xùn)對(duì)骨骼肌氧利用能力的影響[D];北京體育大學(xué);2007年

6 李文惠;不同負(fù)荷間歇負(fù)重跑訓(xùn)練對(duì)老齡大鼠骨骼肌MG29蛋白的影響[D];河北師范大學(xué);2011年

7 鄭慶豐;腫瘤壞死因子—α對(duì)骨骼肌缺血—再灌注損傷作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2002年

8 梁森;豬骨骼肌特異性表達(dá)載體的構(gòu)建[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

9 何學(xué)影;失重性肌萎縮骨骼肌細(xì)胞介電特性研究[D];佳木斯大學(xué);2007年

10 王星果;雞脂肪組織和骨骼肌miRNA的篩選和表達(dá)研究[D];蘇州大學(xué);2010年

  本文關(guān)鍵詞：SREBP-1c對(duì)骨骼肌細(xì)胞IRS-1表達(dá)調(diào)控的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：328901