本文關(guān)鍵詞：白香丹膠囊對(duì)PMDD肝氣逆證模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響及其機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：以PMDD肝氣逆證大鼠模型為載體考察該病證及白香丹膠囊對(duì)模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響，探討模型行為學(xué)表現(xiàn)下該病證對(duì)學(xué)習(xí)記憶功能的損傷及白香丹膠囊的干預(yù)效應(yīng)。 以模型為載體考察病證及白香丹膠囊對(duì)動(dòng)物海馬腦區(qū)NMDAR1受體亞基的分布與表達(dá)的影響，探討PMDD肝氣逆證的發(fā)病機(jī)制和白香丹膠囊干預(yù)該病癥的作用機(jī)理。 方法：⑴模型制備與評(píng)價(jià)：采用情志刺激為主多因素分段刺激法，制備PMDD肝氣逆證大鼠模型，并采用白香丹膠囊、氟西汀進(jìn)行藥物干預(yù)。采用曠場實(shí)驗(yàn)對(duì)PMDD肝氣逆證模型大鼠進(jìn)行行為學(xué)檢測(cè)，評(píng)價(jià)模型制備是否成功。 ⑵大鼠學(xué)習(xí)記憶功能評(píng)價(jià)：采用Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)、Y迷宮實(shí)驗(yàn)、物體識(shí)別實(shí)驗(yàn)對(duì)PMDD肝氣逆證模型動(dòng)物空間學(xué)習(xí)記憶能力和非空間學(xué)習(xí)記憶能力進(jìn)行檢測(cè)； ⑶大鼠的微觀指標(biāo)檢測(cè)：采用免疫熒光化學(xué)方法（IF）和免疫印跡法（westernblot）檢測(cè)正常組大鼠、PMDD肝氣逆證模型組大鼠、白香丹給藥組大鼠、氟西汀給藥組大鼠海馬NMDAR1含量變化，以及在CA1、CA3中NMDAR1受體亞基的分布情況。 結(jié)果：⑴模型制備與評(píng)價(jià)：曠場試驗(yàn)：與正常組大鼠相比，模型組大鼠總路程顯著增加（p0.05），進(jìn)入中央?yún)^(qū)次數(shù)及中央?yún)^(qū)停留時(shí)間均顯著降低（p0.01，p0.01）；與模型組相比較，白香丹組大鼠總路程顯著下降（p0.05），中央?yún)^(qū)停留時(shí)間及進(jìn)入中央?yún)^(qū)次數(shù)均顯著升高（p0.05，p0.05）；氟西汀組大鼠總路程顯著下降（p0.05）。 ⑵大鼠學(xué)習(xí)記憶功能評(píng)價(jià)：與正常組相比，模型組大鼠DI明顯下降（p0.05），白香丹組大鼠DI顯著升高（p0.05）；定位航行階段，模型組大鼠在第2、4天逃避潛伏期顯著上升（p0.05，p0.05）；與模型組相比，白香丹組大鼠在第2、4天的逃避潛伏期明顯降低（p0.05，p0.05）；空間探索階段，與正常組相比，，模型組大鼠逃避潛伏期顯著上升(p0.05)，而平臺(tái)穿越次數(shù)明顯減少(p0.05)，與模型組相比，白香丹組大鼠平臺(tái)穿越次數(shù)顯著增多(p0.05)。 ⑶大鼠的微觀指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果：免疫熒光標(biāo)記結(jié)果顯示，與正常組大鼠相比，模型組大鼠海馬CA1、CA3區(qū)細(xì)胞均排列稀疏雜亂，與模型組相比，白香丹組和氟西汀組大鼠海馬CA1、CA3區(qū)細(xì)胞分布排列無異常。免疫印記結(jié)果顯示，與正常組大鼠相比，模型組和氟西汀組NMDAR1蛋白表達(dá)含量顯著降低（p0.0001，p0.001）；與模型組相比較，白香丹組NMDAR1蛋白水平明顯升高（p0.0001）；與白香丹組相比較，氟西汀組NMDAR1蛋白水平顯著降低（p0.05）。 結(jié)論：⑴PMDD肝氣逆證模型學(xué)習(xí)記憶能力存在缺陷，白香丹膠囊能夠糾正模型大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力缺陷，且治療效果可能優(yōu)于氟西汀。 ⑵PMDD肝氣逆證的發(fā)生可引起大鼠海馬CA1、CA3區(qū)神經(jīng)細(xì)胞減少及NMDAR1受體亞基的表達(dá)活性降低，可能是PMDD肝氣逆證發(fā)生的機(jī)制之一；白香丹膠囊可以有效糾正模型大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞變化及其NMDAR1受體亞基表達(dá)下降的狀態(tài)，這可能是該藥治療PMDD肝氣逆證的作用途徑之一。
【關(guān)鍵詞】：白香丹膠囊 肝氣逆證 NMDAR1 學(xué)習(xí)記憶 認(rèn)知 海馬
【學(xué)位授予單位】：山東中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R-332;R285.5
【目錄】：

• 提要4-6
• Abstract6-13
• 引言13-15
• 研究一 PMDD 肝氣逆證大鼠模型制備及其學(xué)習(xí)記憶能力宏觀行為學(xué)檢測(cè)15-29
• 1 實(shí)驗(yàn)材料15
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物15
• 1.2 實(shí)驗(yàn)藥品15
• 1.3 實(shí)驗(yàn)儀器15
• 2 實(shí)驗(yàn)方法15-20
• 2.1 模型制備15-17
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物篩選15-16
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組16
• 2.1.3 模型制備16-17
• 2.1.4 給藥劑量及方法17
• 2.2 行為學(xué)數(shù)據(jù)采集及測(cè)定17-19
• 2.2.1 曠場實(shí)驗(yàn)（open filed OFT）17
• 2.2.2 Y 迷宮（YMaze）17
• 2.2.3 Morris 水迷宮（Morris water maze MWM）17-18
• 2.2.4 新物體識(shí)別實(shí)驗(yàn)18-19
• 2.3 統(tǒng)計(jì)處理19-20
• 結(jié)果20-24
• 1 曠場試驗(yàn)20-21
• 2 大鼠學(xué)習(xí)記憶能力行為學(xué)指標(biāo)表現(xiàn)21-24
• 2.1 Y 迷宮21
• 2.2 物體識(shí)別實(shí)驗(yàn)21-22
• 2.3 水迷宮22-24
• 討論24-28
• 1 PMDD 肝氣逆證大鼠模型24-26
• 1.1 關(guān)于 PMDD 大鼠肝氣逆證大鼠模型制備24
• 1.2 關(guān)于 PMDD 大鼠肝氣逆證大鼠模型評(píng)價(jià)24-26
• 1.2.1 關(guān)于大鼠曠場試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析25-26
• 2 PMDD 肝氣逆證模型大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力行為學(xué)分析26-27
• 2.1 水迷宮26-27
• 2.2 新物體識(shí)別實(shí)驗(yàn)27
• 2.3 Y 迷宮27
• 3 行為學(xué)方法檢測(cè)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的意義27-28
• 小結(jié)28-29
• 研究二 大鼠海馬腦區(qū) NMDAR1 受體分布與表達(dá)29-48
• 1.材料29-32
• 1.1 動(dòng)物29
• 1.2 藥品及試劑29
• 1.2.1 模型制備藥品與試劑29
• 1.2.2 免疫熒光實(shí)驗(yàn)藥品與試劑29
• 1.2.3 免疫印記藥品與試劑29
• 1.3 實(shí)驗(yàn)儀器29-30
• 1.3.1 免疫熒光實(shí)驗(yàn)儀器29-30
• 1.3.2 免疫印記實(shí)驗(yàn)儀器30
• 1.4 試劑配制30-32
• 1.4.1 免疫熒光30-31
• 1.4.2 免疫印跡試劑配制31-32
• 2 實(shí)驗(yàn)方法32-39
• 2.1 實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭苽浼敖o藥方法32
• 2.2 免疫熒光實(shí)驗(yàn)32-33
• 2.2.1 大鼠腦組織取材及腦組織切片的制備32
• 2.2.2 洗滌脫水32-33
• 2.2.3 透明浸蠟33
• 2.2.4 石蠟包埋33
• 2.2.5 石蠟切片33
• 2.3 NMDAR1 受體的免疫熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)33-34
• 2.3.1 石蠟切片脫蠟至水33-34
• 2.3.2 微波熱抗原修復(fù)34
• 2.3.3 山羊血清封閉34
• 2.3.4 一抗、二抗孵育（Antibody incubation）34
• 2.4 免疫熒光切片檢測(cè)及數(shù)據(jù)分析34
• 2.5 免疫印記化學(xué)實(shí)驗(yàn)34-35
• 2.5.1 組織取材34-35
• 2.6 蛋白的提取和測(cè)定35
• 2.6.1 蛋白的提取35
• 2.6.2. 蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線制定及蛋白測(cè)定35
• 2.6.3 檢測(cè)樣品蛋白含量35
• 2.7 免疫印記化學(xué)實(shí)驗(yàn)35-38
• 2.7.1 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳35-36
• 2.7.2 轉(zhuǎn)膜36-37
• 2.7.3 雜交反應(yīng)37
• 2.7.4 顯影與圖像分析37-38
• 2.8 統(tǒng)計(jì)方法38-39
• 結(jié)果39-42
• 1 各組大鼠海馬腦區(qū) NMDAR1 受體的分布及神經(jīng)元細(xì)胞形態(tài)變化39-40
• 2 海馬神經(jīng)細(xì)胞中 NMDAR1 蛋白表達(dá)水平檢測(cè)結(jié)果40-42
• 討論42-48
• 1 海馬42-43
• 1.1 海馬與情緒42
• 1.2 海馬與學(xué)習(xí)記憶42
• 1.3 應(yīng)激損傷大鼠海馬神經(jīng)元形態(tài)結(jié)構(gòu)42-43
• 2 NMDAR1 受體在海馬腦區(qū)分布與表達(dá)43-45
• 2.1 NMDAR1 受體結(jié)構(gòu)43
• 2.2 NMDA 受體變化與學(xué)習(xí)記憶43-44
• 2.4 NMDAR1 受體在海馬及突觸中的分布44-45
• 2.5 NMDAR1 受體在海馬腦區(qū)表達(dá)45
• 3 白香丹膠囊作用分析45-47
• 3.1 白香丹膠囊腦中樞作用分析46
• 3.2 白香丹膠囊對(duì) PMDD 肝氣逆證模型大鼠學(xué)習(xí)記憶功能的調(diào)節(jié)作用46-47
• 小結(jié)47-48
• 研究特色與不足48-49
• 1 本課題研究特色48
• 2 本課題研究不足48-49
• 結(jié)語49-50
• 綜述50-55
• 參考文獻(xiàn)55-65
• 致謝65-66
• 附錄：縮寫詞表66-67
• 論文著作67-68
• 詳細(xì)摘要68-71

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 袁勇貴,吳愛琴,張心保;從焦慮和抑郁的關(guān)系談共病的診斷[J];國外醫(yī)學(xué).精神病學(xué)分冊(cè);2001年01期

2 張莉;于瑋;韓太真;謝雯;羅禹;;NR1和GluR2在成年大鼠海馬結(jié)構(gòu)的共表達(dá)[J];四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2008年01期

3 柯尊記,姚志彬;空間學(xué)習(xí)記憶的行為模式及其分子神經(jīng)生物學(xué)基礎(chǔ)[J];解剖科學(xué)進(jìn)展;1998年01期

4 傅展燕,羅建紅,魏爾清;NMDA受體在培養(yǎng)海馬神經(jīng)元樹突樹上的表面表達(dá)及定位[J];解剖學(xué)報(bào);2002年04期

5 季建林,徐美勤;抑郁癥和精神分裂癥共患焦慮障礙的研究[J];臨床精神醫(yī)學(xué)雜志;2004年01期

6 馮玉;張惠云;;白香丹膠囊對(duì)經(jīng)前期綜合征肝氣逆證大鼠血清及大腦皮層中γ-氨基丁酸和谷氨酸的影響[J];遼寧中醫(yī)雜志;2010年04期

7 胡鏡清,溫澤淮,賴世隆;Morris水迷宮檢測(cè)的記憶屬性與方法學(xué)初探[J];廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào);2000年02期

8 洪岸;老年大鼠學(xué)習(xí)記憶減退的神經(jīng)基礎(chǔ)[J];生理科學(xué)進(jìn)展;1995年03期

9 梅鎮(zhèn)彤;若干有關(guān)學(xué)習(xí)和記憶神經(jīng)機(jī)制問題的討論[J];生理科學(xué)進(jìn)展;1996年02期

10 龔云;大鼠記憶保持能力與相關(guān)腦區(qū)突觸界面結(jié)構(gòu)的相關(guān)性[J];西北師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2000年04期

  本文關(guān)鍵詞：白香丹膠囊對(duì)PMDD肝氣逆證模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響及其機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：327121