本文關(guān)鍵詞：線粒體調(diào)節(jié)劑C2的發(fā)現(xiàn)及作用機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：線粒體不僅為細(xì)胞提供能量,還參與細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、生長(zhǎng)與分化、凋亡等生命過程。肥胖及Ⅱ型糖尿病的發(fā)生發(fā)展都與能量代謝紊亂有著密切的關(guān)系。通過調(diào)節(jié)線粒體功能來尋找治療肥胖及Ⅱ型糖尿病的策略日益成為研究的熱點(diǎn)。因此,我們希望通過尋找靶向線粒體功能的調(diào)節(jié)劑來獲得改善糖脂代謝的先導(dǎo)化合物。 線粒體膜電位是線粒體功能的一個(gè)重要指針,利用L6肌管細(xì)胞線粒體膜電位的高通量篩選模型,我們篩選了國(guó)家新藥篩選中心近4000個(gè)化合物的小分子化合物庫(kù),經(jīng)過復(fù)篩、毒性及結(jié)構(gòu)分析,我們最終挑選了低毒且結(jié)構(gòu)新穎的線粒體調(diào)節(jié)劑C2進(jìn)行后續(xù)的研究。研究結(jié)果表明,C2可以劑量依賴地降低L6肌管細(xì)胞的線粒體膜電位,抑制人肝癌HepG2(?)小鼠肝原代細(xì)胞脂質(zhì)合成,劑量依賴地抑制大鼠肝原代細(xì)胞葡萄糖異生反應(yīng)。然而C2僅溫和地促進(jìn)L6肌管細(xì)胞、大鼠肝原代細(xì)胞及3T3-L1脂肪細(xì)胞的耗氧,且對(duì)不同代謝細(xì)胞ATP的總含量也沒有明顯的影響。動(dòng)物體內(nèi)藥效學(xué)研究表明,C2能夠在不影響攝食的情況下減少長(zhǎng)期給予高脂食物誘導(dǎo)的肥胖(DIO)小鼠的體重增長(zhǎng),明顯減少了DIO小鼠附睪、腎周及皮下脂肪與體重的比例。C2緩解了DIO小鼠的脂肪肝、降低DIO小鼠血漿膽固醇含量。腹腔注射葡萄糖耐量也進(jìn)一步表明C2提高了DIO小鼠對(duì)葡萄糖負(fù)荷后的清除能力,間接表明了C2治療改善了DIO小鼠的胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)。肝臟中脂肪合成相關(guān)基因SREBP1c及其下游基因的表達(dá)抑制以及糖輸出相關(guān)基因G6Pase和PEPCK的表達(dá)降低,表明C2改善DIO小鼠的糖脂代謝紊亂可能靶向于肝臟組織。 綜上我們得到了一個(gè)線粒體調(diào)節(jié)劑C2,該化合物在細(xì)胞水平及動(dòng)物水平對(duì)糖脂代謝均有明顯的改善功能,結(jié)果表明C2是新穎的治療肥胖及Ⅱ型糖尿病的先導(dǎo)化合物。具有改善糖脂代謝功能的線粒體調(diào)節(jié)劑C2的發(fā)現(xiàn)為尋找肥胖及Ⅱ型糖尿病的創(chuàng)新藥物研究領(lǐng)域提供了新穎的思路。
【關(guān)鍵詞】：線粒體調(diào)節(jié)劑 肥胖及Ⅱ型糖尿病 非酒精性脂肪肝
【學(xué)位授予單位】：華東師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R363
【目錄】：

• 摘要5-6
• ABSTRACT6-10
• 第一章 前言10-29
• 1 線粒體生物學(xué)11-15
• 1.1 線粒體的生物結(jié)構(gòu)11-12
• 1.2 線粒體的生物功能12-15
• 2 Ⅱ型糖尿病發(fā)生發(fā)展中的各外周代謝組織線粒體功能水平15-21
• 2.1 肌肉組織15-18
• 2.2 脂肪組織18-19
• 2.3 肝組織19-20
• 2.4 胰腺組織β細(xì)胞20-21
• 3 靶向線粒體的抗肥胖及Ⅱ型糖尿病藥物研發(fā)現(xiàn)狀及前景21-28
• 3.1 電子傳遞鏈抑制劑22-23
• 3.2 氧化磷酸化的解偶聯(lián)和抑制劑23-28
• 4 論文研究目的和策略28-29
• 第二章 線粒體調(diào)節(jié)劑C2的發(fā)現(xiàn)及機(jī)制研究29-46
• 1 實(shí)驗(yàn)材料29-30
• 1.1 細(xì)胞株及細(xì)胞培養(yǎng)液29
• 1.2 化合物及其它試劑29-30
• 1.3 主要耗材30
• 1.4 主要實(shí)驗(yàn)儀器30
• 1.5 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物30
• 2 實(shí)驗(yàn)方法30-38
• 2.1 細(xì)胞培養(yǎng)30-33
• 2.2 線粒體膜電位檢測(cè)33
• 2.3 磺酰羅丹明B法檢測(cè)化合物的細(xì)胞毒性33-34
• 2.4 細(xì)胞解偶聯(lián)呼吸速率的測(cè)定34
• 2.5 大鼠肝臟線粒體分離和線粒體耗氧速率測(cè)定34-35
• 2.6 細(xì)胞內(nèi)ATP、ADP、AMP含量測(cè)定方法35-36
• 2.7 細(xì)胞內(nèi)乳酸生成測(cè)定方法36
• 2.8 油紅染色及染料含量測(cè)定36
• 2.9 蛋白質(zhì)免疫印跡36-37
• 2.10 高通量篩選37-38
• 3 結(jié)果38-44
• 3.1 通過篩選我們得到了一個(gè)化學(xué)結(jié)構(gòu)新穎,對(duì)代謝型細(xì)胞毒性較低的線粒體調(diào)節(jié)劑C238-39
• 3.2 C2對(duì)不同細(xì)胞毒性的影響39-40
• 3.3 C2對(duì)不同的代謝細(xì)胞選擇性解偶聯(lián)作用40-41
• 3.4 C2對(duì)L6肌管細(xì)胞ATP生成的影響41-42
• 3.5 C2對(duì)不同細(xì)胞AMPK,ACC磷酸化的影響42-43
• 3.6 C2對(duì)不同細(xì)胞乳酸分泌量的影響43-44
• 4 討論44-46
• 第三章 線粒體調(diào)節(jié)劑C2的藥效學(xué)評(píng)價(jià)46-67
• 1 實(shí)驗(yàn)材料46-48
• 1.1 細(xì)胞株及細(xì)胞培養(yǎng)液46
• 1.2 化合物及其他試劑46-47
• 1.3 主要耗材47
• 1.4 主要實(shí)驗(yàn)儀器47
• 1.5 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物47-48
• 2 實(shí)驗(yàn)方法48-52
• 2.1 L6肌管細(xì)胞的葡萄糖攝取48
• 2.2 L6肌管細(xì)胞的脂肪酸氧化48-49
• 2.3 脂肪酸及膽固醇合成的測(cè)定49-50
• 2.4 鼠原代肝細(xì)胞葡萄糖輸出測(cè)定50
• 2.5 動(dòng)物給藥及給藥期間實(shí)驗(yàn)50
• 2.6 血漿生化指標(biāo)的測(cè)定50-51
• 2.7 肝臟和肌肉中甘油三酯和膽固醇含量的測(cè)定51
• 2.8 熒光定量PCR51-52
• 3 結(jié)果52-63
• 3.1 C2在細(xì)胞水平對(duì)糖脂代謝的影響52-57
• 3.2 C2慢性給藥可明顯改善DIO小鼠的糖脂代謝紊亂57-63
• 4 討論63-67
• 結(jié)論67-69
• 附錄69-70
• 縮略詞表70-73
• 參考文獻(xiàn)73-97
• 致謝97

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 ;Uncoupling protein 2 regulates glucagon-like peptide-1 secretion in L-cells[J];World Journal of Gastroenterology;2012年26期

  本文關(guān)鍵詞：線粒體調(diào)節(jié)劑C2的發(fā)現(xiàn)及作用機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：327042