目的·探討小鼠睪丸中SUMO特異肽酶3（SUMO specific peptidase 3,SENP3,又稱SUMO特異蛋白酶3）對自噬的調(diào)控作用。方法·采用免疫熒光法對SENP3在睪丸生精細胞和支持細胞（Sertoli cells,簡稱Sertoli細胞）中的定位進行檢測。對Senp3野生型(Senp3^+/+)小鼠和Senp3基因敲除雜合子(Senp3^+/-)小鼠進行饑餓處理,誘導自噬的發(fā)生。提取小鼠的睪丸組織蛋白質(zhì),采用Western blotting檢測自噬的程度。利用透射電子顯微鏡技術、免疫熒光法檢測睪丸組織切片中的細胞自噬,并區(qū)分睪丸生精細胞和Sertoli細胞自噬的程度。結(jié)果· SENP3主要定位于Sertoli細胞核。與Senp3^+/+小鼠相比,Senp3^+/-小鼠饑餓后,Sertoli細胞自噬增加。結(jié)論· SENP3能夠抑制營養(yǎng)缺乏時Sertoli細胞自噬,可能對細胞自噬的程度發(fā)揮控制作用。 

【文章來源】：上海交通大學學報(醫(yī)學版). 2019,39(07)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實驗材料
        1.1.1 研究對象
        1.1.2 實驗試劑
    1.2 實驗方法
        1.2.1 建立饑餓誘導自噬模型
        1.2.2 動物取材和固定
        1.2.3 觀察組織超微結(jié)構(gòu)
        1.2.4 檢測組織樣品中蛋白質(zhì)的含量
        1.2.5 檢測組織切片中SENP3的定位
        1.2.6 檢測組織切片中的細胞自噬
        1.2.7 觀察睪丸組織的形態(tài)學改變
2 結(jié)果
    2.1 饑餓后小鼠睪丸中各類細胞的超微結(jié)構(gòu)和自噬改變
    2.2 SENP3在睪丸中的表達水平、定位及饑餓后的改變
    2.3 SENP3對Sertoli細胞自噬程度的影響
    2.4 SENP3抑制Sertoli細胞自噬對精子形成的影響
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]蛋白質(zhì)SUMO化修飾及其調(diào)控[J]. 肖寧,程金科.  生命的化學. 2015(02)



本文編號：3264500