目的·探討小鼠睪丸中SUMO特異肽酶3（SUMO specific peptidase 3,SENP3,又稱SUMO特異蛋白酶3）對(duì)自噬的調(diào)控作用。方法·采用免疫熒光法對(duì)SENP3在睪丸生精細(xì)胞和支持細(xì)胞（Sertoli cells,簡稱Sertoli細(xì)胞）中的定位進(jìn)行檢測(cè)。對(duì)Senp3野生型(Senp3^+/+)小鼠和Senp3基因敲除雜合子(Senp3^+/-)小鼠進(jìn)行饑餓處理,誘導(dǎo)自噬的發(fā)生。提取小鼠的睪丸組織蛋白質(zhì),采用Western blotting檢測(cè)自噬的程度。利用透射電子顯微鏡技術(shù)、免疫熒光法檢測(cè)睪丸組織切片中的細(xì)胞自噬,并區(qū)分睪丸生精細(xì)胞和Sertoli細(xì)胞自噬的程度。結(jié)果· SENP3主要定位于Sertoli細(xì)胞核。與Senp3^+/+小鼠相比,Senp3^+/-小鼠饑餓后,Sertoli細(xì)胞自噬增加。結(jié)論· SENP3能夠抑制營養(yǎng)缺乏時(shí)Sertoli細(xì)胞自噬,可能對(duì)細(xì)胞自噬的程度發(fā)揮控制作用。 

【文章來源】：上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2019,39(07)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1.1 研究對(duì)象
        1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 建立饑餓誘導(dǎo)自噬模型
        1.2.2 動(dòng)物取材和固定
        1.2.3 觀察組織超微結(jié)構(gòu)
        1.2.4 檢測(cè)組織樣品中蛋白質(zhì)的含量
        1.2.5 檢測(cè)組織切片中SENP3的定位
        1.2.6 檢測(cè)組織切片中的細(xì)胞自噬
        1.2.7 觀察睪丸組織的形態(tài)學(xué)改變
2 結(jié)果
    2.1 饑餓后小鼠睪丸中各類細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)和自噬改變
    2.2 SENP3在睪丸中的表達(dá)水平、定位及饑餓后的改變
    2.3 SENP3對(duì)Sertoli細(xì)胞自噬程度的影響
    2.4 SENP3抑制Sertoli細(xì)胞自噬對(duì)精子形成的影響
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]蛋白質(zhì)SUMO化修飾及其調(diào)控[J]. 肖寧,程金科.  生命的化學(xué). 2015(02)



本文編號(hào)：3264500