本文關(guān)鍵詞：人胚胎干細(xì)胞無血清無飼養(yǎng)層培養(yǎng)體系的建立，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的擬建立人胚胎干細(xì)胞無血清無飼養(yǎng)層的培養(yǎng)體系。方法將干細(xì)胞分別置于Knockout培養(yǎng)基(第1組)、自制無血清培養(yǎng)基(第2組)和添加bFGF及肝素的改良無血清培養(yǎng)基(第3組)中培養(yǎng)25代后觀察比較3組干細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化、克隆數(shù)目及大小。并借助細(xì)胞免疫組化、流式細(xì)胞術(shù)和體外擬胚體形成等方法檢測干細(xì)胞的未分化狀態(tài)和全能性。結(jié)果傳代25次后,第2組克隆逐漸分化。第1組和第3組的干細(xì)胞均呈典型的人胚胎干細(xì)胞形態(tài)特征;細(xì)胞表達(dá)Nanog,Oct-4,Tra-1-60,SSEA-4,但不表達(dá)SSEA-1;流式檢測也顯示SSEA-4高表達(dá),SSEA-1低表達(dá);體外分化能形成擬胚體。通過單位視野下克隆個數(shù)及大小的比較,結(jié)果顯示第2組與第1組和第3組間的差異顯著。結(jié)論本研究通過改良本實(shí)驗(yàn)室已獲得國家專利的無血清培養(yǎng)基,初步建立了人胚胎干細(xì)胞無血清無飼養(yǎng)層培養(yǎng)體系,培養(yǎng)效果與公認(rèn)培養(yǎng)體系無明顯差異。
【作者單位】： 南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院血液科;南昌大學(xué)研究生院醫(yī)學(xué)部;南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院血液病研究所;
【關(guān)鍵詞】： 人胚胎干細(xì)胞 自制無血清 無飼養(yǎng)層 bFGF 肝素
【基金】：國家自然科學(xué)基金(30760261) 國家大學(xué)生創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)計劃(07-17) 江西省青年科學(xué)家培養(yǎng)對象計劃項(xiàng)目(2007DQ0014)
【分類號】：R329
【正文快照】： 人胚胎干細(xì)胞(human embryonic stem cells,HESc)自1998年在體外成功分離和建系以來[1],很多學(xué)者對其進(jìn)行了深入研究。傳統(tǒng)的HESc培養(yǎng)需要滅活的小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(mouse embryo fibro-blast,MEF)和胎牛血清的支持[1]。但由于飼養(yǎng)層制備繁瑣,分泌成分不明;血清中含有已知和

【相似文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：人胚胎干細(xì)胞無血清無飼養(yǎng)層培養(yǎng)體系的建立，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：324057