本文關(guān)鍵詞：血紅素氧合酶1對AngⅡ誘導(dǎo)的大鼠心肌細(xì)胞凋亡的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景及目的 心力衰竭(heart failure)簡稱心衰,是由心臟結(jié)構(gòu)性或功能性疾病所導(dǎo)致的一種臨床綜合征,心肌損害引起心室充盈和(或)射血能力受損,最后導(dǎo)致心室泵血功能降低,即使在足夠靜脈回流條件下,心搏出量仍不能滿足機(jī)體代謝的需要,是冠心病、高血壓、先天性心臟病、心肌病和瓣膜病等許多心臟疾病的最終結(jié)局。隨著醫(yī)療技術(shù)的發(fā)展,介入治療的普及,冠心病及瓣膜病等心血管疾病患者存活期的延長,以及老齡化的加重,使得心哀患者的發(fā)病率逐漸增加。研究證實(shí),心肌細(xì)胞凋亡增加導(dǎo)致心肌細(xì)胞數(shù)量減少,是心力衰竭發(fā)生發(fā)展的重要根源之一,而神經(jīng)內(nèi)分泌過度激活、血管緊張素Ⅱ(angiotensin II, AngⅡ)的分泌增加是導(dǎo)致心衰患者細(xì)胞凋亡、左室重構(gòu)、心衰發(fā)展的重要機(jī)制。研究抑制AngⅡ引起的心肌細(xì)胞凋亡的靶點(diǎn),對于探討阻止心力衰竭的發(fā)生發(fā)展的新思路具有重要意義。血紅素氧合酶1(heme oxygenase-1, HO-1)廣泛存在于機(jī)體各組織細(xì)胞微粒體中,是催化血紅素降解的關(guān)鍵酶,通過分解血紅素生成一氧化碳(Carbon monoxide, CO)、膽綠素、亞鐵離子等產(chǎn)物,發(fā)揮抗氧化、抗炎癥、擴(kuò)張血管、調(diào)控細(xì)胞增殖與凋亡等重要作用。對于心血管系統(tǒng)的保護(hù)具有重要意義,但對于心肌細(xì)胞凋亡HO-1的影響如何國內(nèi)尚未見報(bào)道。 本實(shí)驗(yàn)通過AngⅡ誘導(dǎo)大鼠心肌細(xì)胞凋亡,HO-1誘導(dǎo)劑和抑制劑分別作用于AngⅡ誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞,觀察心肌細(xì)胞凋亡的變化,以探討HO-1對AngⅡ誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡的影響,為臨床治療心力衰竭探討新的思路和預(yù)后判斷提供理論基礎(chǔ)。 方法 1.原代培養(yǎng)新生1-2d Wistar大鼠心肌細(xì)胞,免疫熒光鑒定。 2.將心肌細(xì)胞隨機(jī)分為四組：①對照組(常規(guī)培養(yǎng))；②Angll組：加入AngⅡ;③AngII+hemin組：加入AngⅡ和氯化血紅素(hemin);④AngII+ZnppIX組：加入AngⅡ和鋅原卟-9(ZnppIX)。 3.Trizol法提取各組心肌細(xì)胞總RNA,以GAPDH為內(nèi)參照,通過實(shí)時(shí)定量PCR(Real Time-PCR)技術(shù)檢測HO-1mRNA的相對表達(dá)水平。 4.提取各組心肌細(xì)胞總蛋白,BCA法測蛋白濃度,以GAPDH為內(nèi)參照,Western blot檢測HO-1蛋白的相對表達(dá)水平。 5.流式細(xì)胞儀和原位末端標(biāo)記技術(shù)(TUNEL)檢測心肌細(xì)胞凋亡率。 結(jié)果 (1)各組心肌細(xì)胞HO-1mRNA表達(dá)：對照組、Angll組、AngⅡ+hemin組和AngⅡ+ZnppIX組HO-1mRNA相對表達(dá)水平分別為：1.00+0.00,3.40±1.29,8.89±2.26,1.244-0.44。①與對照組比較：AngⅡ組、AngⅡ+hemin組和AngⅡ+ZnppIX組心肌細(xì)胞HO-1mRNA表達(dá)均升高,AngⅡ組、AngⅡ+hemin組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)；AngⅡ+ZnppIX組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)；②與AngII組比較：AngⅡ+hemin組明顯升高,AngⅡ+ZnppIX組明顯下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 (2)各組心肌細(xì)胞HO-1蛋白相對表達(dá)：對照組、AngⅡ組、AngⅡ+hemin組和AngⅡ+ZnppIX組HO-1蛋白相對表達(dá)水平分別為：0.50±0.12,0.82+0.13,1.57±0.18,0.54±0.11。①與對照組比較：AngⅡ組、AngⅡ+hemin組和AngⅡ+ZnppIX組心肌細(xì)胞HO-1蛋白表達(dá)均升高,AngⅡ組、AngⅡ+hemin組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；AngⅡ+ZnppIX組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)；②與AngⅡ組比較：AngⅡ+hemin組明顯升高,AngⅡ+ZnppIX組明顯下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 (3)流式細(xì)胞儀技術(shù)測心肌凋亡率：對照組、AngⅡ組、AngⅡ+hemin組和AngⅡ+ZnppIX組心肌細(xì)胞凋亡率分別為：12.1%±1.8%,26.0%±2.9%,15.2%±2.1%,39.7%±2.3%。①與對照組比較心肌細(xì)胞凋亡率：AngⅡ組、AngⅡ+hemin組和AngⅡ+ZnppIX組均增加,AngII組和AngⅡ+ZnppIX組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；AngⅡ+hemin組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)；②與AngⅡ組比較心肌細(xì)胞凋亡率：AngⅡ+hemin組明顯下降,AngⅡ+ZnppIX組明顯升高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 (4)原位末端標(biāo)記技術(shù)(TUNEL)測凋亡指數(shù)：對照組、Angll組、AngⅡ+hemin組和AngⅡ+ZnppIX組心肌細(xì)胞凋亡率分別為：7.6%±2.5%,40.8%±8.2%,10.3%±2.7%,54.5%±6.3%。①與對照組比較心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)：AngⅡ組、AngⅡ+hemin組和AngⅡ+ZnppIX組均增加,AngⅡ組和AngⅡ+ZnppIX組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；AngⅡ+hemin組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)；②與AngⅡ組比較心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)：AngⅡ+hemin組明顯下降,AngⅡ+ZnppIX組明顯升高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論 AngⅡ誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡,HO-1對AngⅡ誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡具有抑制作用。
【關(guān)鍵詞】：血紅素氧合酶-1 血管緊張素Ⅱ 心肌細(xì)胞 凋亡
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R363
【目錄】：

• 中文摘要6-9
• Abstract9-12
• 符號說明12-13
• 前言13-15
• 材料與方法15-26
• 結(jié)果26-32
• 討論32-36
• 結(jié)論36-37
• 參考文獻(xiàn)37-42
• 綜述42-49
• 參考文獻(xiàn)47-49
• 攻讀學(xué)位期間待發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄49-50
• 致謝50-51
• 附件51

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 趙浦;孫玲娣;張鴻彥;;血紅素氧合酶-1在缺血再灌注大鼠腎臟的表達(dá)及意義[J];實(shí)用兒科臨床雜志;2006年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 曹海軍;陳淼;;HO-1對ARDS大鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞保護(hù)作用的研究進(jìn)展[A];貴州省醫(yī)學(xué)會重癥醫(yī)學(xué)分會第三屆學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2008年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前9條

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3 張煥榮;HO-1在UUO大鼠腎間質(zhì)纖維化保護(hù)作用的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2008年

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6 曹海軍;血紅素加氧酶-1對急性肺損傷大鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞抗氧化損傷的研究[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2009年

7 吳志蓮;AT受體在血管緊張素Ⅱ引起的內(nèi)皮祖細(xì)胞凋亡中的作用[D];山西醫(yī)科大學(xué);2010年

8 杜瑞;FoxO4在血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)的內(nèi)皮祖細(xì)胞凋亡中的機(jī)制研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2010年

9 盧新U

本文編號：323226