本文關(guān)鍵詞：大鼠下丘腦腹外側(cè)視前區(qū)和結(jié)節(jié)乳頭體核的直接神經(jīng)纖維投射研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的 下丘腦腹外側(cè)視前區(qū)（ventrolateral preoptic nucleus，VLPO）與結(jié)節(jié)乳頭體核（tuberomammillary nucleus，TMN）分別是促睡眠中樞和促覺(jué)醒調(diào)節(jié)中樞之一。約80%的VLPO神經(jīng)元為γ-氨基丁酸（GABA）能神經(jīng)元和甘丙肽能神經(jīng)元，而TMN是腦中組胺能神經(jīng)元胞體集中聚集的區(qū)域。本實(shí)驗(yàn)采用腦立體定位技術(shù)，核團(tuán)內(nèi)微量注射、冰凍切片等方法研究VLPO與TMN之間是否具有雙向調(diào)節(jié)的直接通路。 方法 1.模型建立清潔級(jí)成年SD大鼠，雌雄不拘，體重250300g。戊巴比妥鈉（50mg·kg 1）腹腔注射麻醉后，無(wú)菌手術(shù)操作暴露顱骨，將兩個(gè)不銹鋼引導(dǎo)管（22gauge）插入VLPO（AP：0.36mm；R：1.30mm；H：7.00mm）和TMN（AP：3.96mm；R：1.50mm；H：7.70mm）。注射熒光探針后，逐層縫合，送回動(dòng)物室，自由飲水進(jìn)食。術(shù)后將大鼠置于記錄室中休息，待麻醉蘇醒后觀察動(dòng)物行為活動(dòng)。 2.動(dòng)物分組將SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組（TMN+ACSFVLPO+ACSF組）與實(shí)驗(yàn)組（TMN+ACSFVLPO+DiO組和TMN+DiOVLPO+ACSF組）。 3.藥物微量注射使用Hamilton微量注射器（針尖直徑26gauge）通過(guò)引導(dǎo)管向目的核團(tuán)注射ACSF（對(duì)照組）或含熒光探針Fast DiO（激發(fā)波長(zhǎng)488nm；發(fā)射波長(zhǎng)，499nm)（實(shí)驗(yàn)組）3l，注射速度為1l·min 1，注射完畢滯針3min防止藥液溢出。 4.組織學(xué)鑒定大鼠術(shù)后72h后，行戊巴比妥鈉（50mg·kg 1）腹腔注射麻醉并仰臥位固定于手術(shù)臺(tái)上，暴露心臟，從心尖處灌注250ml生理鹽水以及200ml4%多聚甲醛。灌注結(jié)束后完整取下腦組織并4%多聚甲醛固定24h，次日使用30%蔗糖PB溶液脫水至沉底。取各組大鼠的大腦的TMN和VLPO進(jìn)行冰凍切片，片厚2025m，光學(xué)顯微鏡下觀察引導(dǎo)管位置以及藥物注射位點(diǎn)，僅對(duì)定位準(zhǔn)確的大鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)。熒光顯微下觀察Fast DiO標(biāo)記的熒光效果并拍照。 結(jié)果 1.神經(jīng)損傷嚴(yán)重程度評(píng)分（neurological severityscore，NSS）采用雙盲法，在ACSF或熒光探針注入核團(tuán)后2h和24h對(duì)各組大鼠進(jìn)行NSS評(píng)分。麻醉良好的動(dòng)物在注射過(guò)程中沒(méi)有發(fā)生抽搐、呼吸紊亂等異常情況。術(shù)后24h所有大鼠評(píng)分已基本正常。 2.熒光標(biāo)記結(jié)果 2.1TMN+ACSFVLPO+ACSF組在TMN和VLPO腦區(qū)皆未檢測(cè)到綠色熒光標(biāo)記神經(jīng)元。 2.2TMN+ACSFVLPO+DiO組TMN腦區(qū)可見(jiàn)明顯的綠色熒光標(biāo)記神經(jīng)元，熒光均勻存在于細(xì)胞質(zhì)膜中，成像清晰。TMN之外的區(qū)域鮮見(jiàn)綠色熒光標(biāo)記。 2.3TMN+DiOVLPO+ACSF組VLPO腦區(qū)可見(jiàn)明顯的綠色熒光神經(jīng)元，熒光均勻存在于細(xì)胞質(zhì)膜中，神經(jīng)元細(xì)胞的熒光對(duì)比度高，容易辨認(rèn)，但成像的密度較低。VLPO之外腦區(qū)未見(jiàn)熒光。 結(jié)論 VLPO有神經(jīng)纖維投射至TMN，同時(shí)TMN有神經(jīng)纖維直接投射至VLPO腦區(qū)，，VLPO核團(tuán)與TMN核團(tuán)存在雙向直接聯(lián)系。
【關(guān)鍵詞】：腹外側(cè)視前區(qū) 結(jié)節(jié)乳頭體核 大鼠 突觸
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R338
【目錄】：

• 英文縮略詞5-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-11
• 前言11-15
• 材料與方法15-20
• 結(jié)果20-23
• 討論23-25
• 結(jié)論25-26
• 參考文獻(xiàn)26-30
• 附錄30-31
• 致謝31-32
• 綜述32-47
• 參考文獻(xiàn)40-47

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2 楊s

本文編號(hào)：319294