本文關(guān)鍵詞：小鼠胃癌模型中T淋巴細(xì)胞與NK細(xì)胞的改變，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的： 本研究通過建立胃癌小鼠模型，檢測(cè)小鼠脾臟中T淋巴細(xì)胞、CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）、自然殺傷（NK）細(xì)胞活化受體NKG2D的表達(dá)水平和NK細(xì)胞的殺傷活性，探討T淋巴細(xì)胞、調(diào)節(jié)性T細(xì)胞和NK細(xì)胞活化受體NKG2D在胃癌發(fā)展過程中的變化以及在腫瘤免疫逃逸機(jī)制中的作用。 方法： 1.通過615小鼠頸背部皮下種植不同濃度的小鼠前胃癌（MFC）細(xì)胞株建立胃癌小鼠模型，建模后經(jīng)病理學(xué)檢驗(yàn)。 2.建模成功后，小鼠分為胃癌組（n=20）和正常組(n=20)，取小鼠脾細(xì)胞，制成懸液，采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)小鼠脾臟T淋巴細(xì)胞及CD4+CD25+Treg的含量；并用RT-PCR法檢測(cè)Treg細(xì)胞特異性標(biāo)志物Foxp3mRNA基因的相對(duì)表達(dá)量； 3.同法，取小鼠脾細(xì)胞懸液，，用流式細(xì)胞儀檢測(cè)NK細(xì)胞活化受體NKG2D的表達(dá)水平；脾淋巴細(xì)胞作為效應(yīng)細(xì)胞，Yac-1作為靶細(xì)胞（小鼠NK細(xì)胞的靶細(xì)胞，其細(xì)胞表面無MHC-I類分子表達(dá)），用LDH酶法檢測(cè)共培養(yǎng)后NK細(xì)胞的免疫活性。 結(jié)果： 1.所有小鼠皮下種植MFC細(xì)胞株均可成瘤。 2.胃癌組小鼠脾CD3+T、CD8+T較正常組升高有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）；CD4+T/CD8+T細(xì)胞比值較正常組降低有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 3.胃癌組小鼠脾Treg細(xì)胞及其特異性蛋白Foxp3的表達(dá)量較正常組升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 4.胃癌組小鼠脾NK細(xì)胞表面活性受體NKG2D的表達(dá)水平及NK細(xì)胞殺傷活性較正常組降低，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 結(jié)論： 1.615小鼠皮下種植小鼠前胃癌細(xì)胞能成功建立胃癌小鼠模型。 2.在胃癌發(fā)展過程中，胃癌細(xì)胞所引起的細(xì)胞免疫造成T細(xì)胞總數(shù)和CD8+T細(xì)胞水平升高，CD4+T細(xì)胞的比例會(huì)降低，從而引起CD4+T/CD8+T細(xì)胞比值降低。 3.在胃癌發(fā)展過程中，Treg細(xì)胞水平及其特異性蛋白Foxp3的表達(dá)量升高，推測(cè)在抗腫瘤免疫中，Treg細(xì)胞通過某些途徑抑制機(jī)體的免疫反應(yīng)。 4.在胃癌發(fā)展過程中，NK細(xì)胞表面活性受體NKG2D表達(dá)減少，NK細(xì)胞活性降低，推測(cè)腫瘤細(xì)胞可能通過某些途徑逃避機(jī)體免疫殺傷作用。
【關(guān)鍵詞】：胃癌 T細(xì)胞亞群 Treg細(xì)胞 Foxp3 NK細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：石河子大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R735.2;R-332
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-9
• 縮略語表9-10
• 前言10-13
• 第一部分：胃癌小鼠模型的建立13-19
• 1.材料13-14
• 1.1 小鼠前胃癌細(xì)胞（MFC）株13
• 1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物13
• 1.3 實(shí)驗(yàn)試劑13
• 1.4 主要儀器13-14
• 2.方法14-16
• 2.1 胃癌小鼠模型的建立14
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法14
• 2.3 MFC 細(xì)胞和胃癌小鼠腫瘤病理學(xué)檢查14-16
• 3.結(jié)果16-18
• 3.1 小鼠成瘤情況及 HE 染色16-18
• 4.討論18-19
• 第二部分：胃癌小鼠模型中脾臟 T 淋巴細(xì)胞的變化19-28
• 1.材料19-20
• 1.1 胃癌細(xì)胞株和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物19
• 1.2 實(shí)驗(yàn)試劑19
• 1.3 主要儀器19-20
• 2.方法20-23
• 2.1 實(shí)驗(yàn)方法20
• 2.2 小鼠脾細(xì)胞懸液制備20
• 2.3 流式細(xì)胞儀檢測(cè) T 細(xì)胞亞群及 Treg 細(xì)胞的變化20-21
• 2.4 RT-PCR 檢測(cè)脾細(xì)胞 Foxp3 m RNA 的相對(duì)表達(dá)量21-22
• 2.5 PCR 反應(yīng)22-23
• 2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析23
• 3.結(jié)果23-25
• 3.1 小鼠脾細(xì)胞 T 淋巴細(xì)胞亞群變化23-24
• 3.2 小鼠脾細(xì)胞 Treg 細(xì)胞的變化24-25
• 4.討論25-28
• 4.1 小鼠脾細(xì)胞 T 淋巴細(xì)胞亞群的變化25-26
• 4.2 小鼠脾細(xì)胞 Treg 細(xì)胞及 Foxp3 mRNA 的變化26-28
• 第三部分：胃癌小鼠模型中 NK 細(xì)胞的變化28-32
• 1.材料28
• 2.方法28-30
• 2.1 實(shí)驗(yàn)方法28
• 2.2 用流式細(xì)胞儀檢測(cè) NK 細(xì)胞表面受體 NKG2D 的變化28
• 2.3 用 LDH 酶法檢測(cè)胃癌細(xì)胞對(duì)小鼠 NK 細(xì)胞的活性的影響28-29
• 2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析29-30
• 3.結(jié)果30
• 3.1 胃癌組和正常組小鼠脾臟中 NK 細(xì)胞活性的變化30
• 3.2 胃癌組和正常組小鼠脾臟中 NK 細(xì)胞表面 NKG2D 的變化30
• 4.討論30-32
• 結(jié)論32-33
• 參考文獻(xiàn)33-36
• 文獻(xiàn)綜述36-44
• 參考文獻(xiàn)41-44
• 致謝44-45
• 作者簡(jiǎn)介45-46
• 導(dǎo)師評(píng)閱表46

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 劉平,趙志泉,張小勇,潘世揚(yáng),楊國平,丁小健;人胃癌細(xì)胞懸液裸小鼠原位移植模型建立及其部分生物學(xué)特性[J];南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2000年06期

2 梁艷;鄧安梅;仲人前;;NK細(xì)胞識(shí)別和殺傷機(jī)制研究進(jìn)展[J];中國免疫學(xué)雜志;2007年03期

  本文關(guān)鍵詞：小鼠胃癌模型中T淋巴細(xì)胞與NK細(xì)胞的改變，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：316901