本文關(guān)鍵詞：HIMF在低氧誘導(dǎo)的大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：【目的】 研究低氧促有絲分裂原因子（HIMF）調(diào)節(jié)大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞（PASMCs）增殖影響，并探討Ca2+/PKC/MAPKs和PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路在此過程中的作用。 【方法】⑴將原代培養(yǎng)的大鼠PSAMCs隨機(jī)分為對(duì)照組和低氧組H3h,H6h,H12h,H24h,H48h后，用熒光實(shí)時(shí)定量PCR和Western blotting分別檢測(cè)每組的HIMFmRNA和蛋白表達(dá)變化；⑵構(gòu)建過表達(dá)HIMF病毒，并用EDU法觀察其對(duì)各組PASMCs增殖的影響；⑶過表達(dá)HIMF基因，將PSAMCs隨機(jī)分為正常對(duì)照組（A組），空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組（B組）和過表達(dá)HIMF組（C組）。每組都依次單獨(dú)加入EGTA（細(xì)胞外Ca2+螯合劑）、BAPTA-AM（細(xì)胞內(nèi)Ca2+螯合劑）、A23187（Ca2+載體激動(dòng)劑）、LY294002（PI3K抑制劑），Akt抑制劑檢測(cè)各組PASMCs的P-PI3k，P-AktThr308，P-AktSer473，P-mTOR蛋白水平的變化;⑷過表達(dá)HIMF基因，分組同上，每組都依次單獨(dú)加入EGTA（細(xì)胞外Ca2+螯合劑）、BAPTA-AM（細(xì)胞內(nèi)Ca2+螯合劑）、A23187（Ca2+載體激動(dòng)劑）、staurosporine（PKC抑制劑），檢測(cè)各組PASMCs的p-PKC，p-p44/42（Thr202/Tyr204），p-p38（Thr180/Tyr182）蛋白水平的變化。 【結(jié)果】 ⑴HIMF mRNA和蛋白在常氧組均少量表達(dá)，在低氧條件下，它們表達(dá)均明顯增加，與對(duì)照組比較均有顯著差異(P0.05)，H6h組時(shí)它們表達(dá)均達(dá)最高水平； ⑵Edu細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：過表達(dá)HIMF組，PASMCs的增殖明顯增加，，與正常對(duì)照組和空白對(duì)照組均有顯著差異(P0.05)； ⑶與正常對(duì)照組和空白對(duì)照組相比較，過表達(dá)HIMF組，p-PI3k,p-AktThr308,p-AktSer473, p-mTOR, p-PKC, p-p44/42, p-p38蛋白表達(dá)水平均增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 【結(jié)論】 ⑴低氧能促進(jìn)大鼠PASMCs的HIMF表達(dá)上調(diào)，并將其分泌到胞外的上清液中； ⑵HIMF在調(diào)節(jié)大鼠PASMCs增殖的過程中起重要的作用； ⑶Ca2+/PKC/MAPKs和PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路均在此過程中發(fā)揮重要的作用。
【關(guān)鍵詞】：低氧促有絲分裂原因子 信號(hào)通路 大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 增殖
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R363
【目錄】：

• 主要縮略語(yǔ)4-7
• 中文摘要7-9
• ABSTRACT9-11
• 前言11-13
• 材料與方法13-27
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果27-36
• 討論36-40
• 結(jié)論40-41
• 參考文獻(xiàn)41-44
• 附圖44-51
• 綜述51-63
• 參考文獻(xiàn)59-63
• 碩士期間科研成果63-64
• 致謝64-65

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前9條

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本文編號(hào)：317104