本文關(guān)鍵詞：肺炎支原體LAMPs激活Nrf2及其對HO-1和NQO1表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：肺炎支原體（Mycoplasma pneumoniae，Mp）感染所引起的一系列炎癥反應(yīng)很大程度上是其細(xì)胞膜上的脂質(zhì)相關(guān)膜蛋白（lipid-associated membraneproteins, LAMPs）所致。本研究旨在探討MP LAMPs能否激活人單核細(xì)胞系THP-1中的核因子NF-E2相關(guān)因子2（Nuclear factor erythroid2-related factor2，NF-E2-related factor2，Nrf2），誘導(dǎo)血紅素氧合酶-1（Hemeoxygenase，HO-1）和醌氧化還原酶（NADPH: quinine oxidoreductase，NQO1）的表達(dá)。 方法：培養(yǎng)Mp M129菌株至對數(shù)生長期，離心收集沉淀，抽提LAMPs，BCA法測定LAMPs濃度。體外培養(yǎng)THP-1細(xì)胞，CCK-8檢測LAMPs的細(xì)胞毒性；Western blot檢測LAMPs刺激THP-1細(xì)胞表達(dá)HO-1及NQO1的劑量依賴性及時間依賴性；比色法分析HO-1酶活性改變情況；Western blot及免疫熒光技術(shù)檢測LAMPs刺激THP-1后Nrf2在細(xì)胞核及胞漿中的表達(dá)以了解Nrf2的核轉(zhuǎn)位。實時定量逆轉(zhuǎn)錄PCR（qRT-PCR）檢測LAMPs刺激Nrf2siRNA預(yù)處理的THP-1細(xì)胞HO-1和NQO1mRNA的表達(dá)水平。 結(jié)果： 1. LAMPs的濃度為1.029mg/mL. 2.用CCK-8檢測LAMPs對THP-1細(xì)胞的毒性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)PBS組和各濃度LAMPs作用組450nm波長光吸收值差異無顯著性（P＞0.05）。 3. LAMPs可刺激THP-1細(xì)胞表達(dá)HO-1和NQO1，，且NQO1表達(dá)水平與LAMPs濃度呈劑量依賴性，HO-1的表達(dá)在LAMPs濃度為0~10μg/mL范圍內(nèi)先上升后遞減，5.0μg/mL LAMPs刺激表達(dá)的HO-1最高。 4. HO-1和NQO1的蛋白表達(dá)隨LAMPs刺激時間均呈先上升后下降的趨勢，作用12h表達(dá)水平最高。 5.5.0μg/mL的LAMPs作用THP-1細(xì)胞12h后HO-1酶活性為（1.278±0.171）nmol/mg/h，較PBS組顯著增高（P＜0.01），與LPS處理組差異無顯著性（P＞0.05）。 6. LAMPs刺激THP-1細(xì)胞，胞漿內(nèi)Nrf2表達(dá)水平逐漸減少，而細(xì)胞核內(nèi)蛋白表達(dá)逐漸增高。 7. Nrf2siRNA可降低THP-1細(xì)胞Nrf2mRNA的表達(dá)。LAMPs刺激Nrf2siRNA預(yù)處理的THP-1細(xì)胞，HO-1的mRNA表達(dá)水平顯著減少，NQO1mRNA表達(dá)水平無明顯變化。 結(jié)論： 1. Mp LAMPs可誘導(dǎo)人THP-1細(xì)胞表達(dá)HO-1和NQO1。 2. Mp LAMPs刺激THP-1細(xì)胞表達(dá)HO-1受Nrf2調(diào)控，Nrf2調(diào)控NQO1表達(dá)的作用不明顯。
【關(guān)鍵詞】：肺炎支原體 脂質(zhì)相關(guān)膜蛋白 血紅素氧合酶-1 醌氧化還原酶-1 核因子相關(guān)因子-2
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R375.2
【目錄】：

• 主要英文縮寫4-6
• 中文摘要6-8
• ABSTRACT8-11
• 1 前言11-13
• 2 實驗材料13-16
• 3 實驗方法16-25
• 4 實驗結(jié)果25-32
• 5 討論32-34
• 6 結(jié)論34-35
• 參考文獻(xiàn)35-40
• 綜述40-46
• 參考文獻(xiàn)44-46
• 讀碩期間論文46-47
• 致謝47

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

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2 馬小華;游曉星;吳移謀;;HO-1在免疫調(diào)節(jié)中的作用及其相關(guān)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路研究進(jìn)展[J];中南醫(yī)學(xué)科學(xué)雜志;2011年06期

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  本文關(guān)鍵詞：肺炎支原體LAMPs激活Nrf2及其對HO-1和NQO1表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：316878