本文關(guān)鍵詞：自身免疫調(diào)節(jié)因子對DC2.4細(xì)胞表型及功能影響的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：自身免疫調(diào)節(jié)因子（Autoimmune regulator，Aire）作為一種轉(zhuǎn)錄因子，其基因突變能夠引發(fā)多器官自身免疫性疾病-APECED病。研究證實，中樞Aire通過調(diào)節(jié)mTECs上TRAs表達(dá)，清除自身反應(yīng)性T細(xì)胞維持中樞免疫耐受。在外周，Aire主要表達(dá)在DC細(xì)胞上，不成熟DC能夠誘導(dǎo)免疫耐受，也有報道稱某些成熟DC也可參與誘導(dǎo)免疫耐受。此外，外周DC也能夠表達(dá)TRAs誘導(dǎo)自身反應(yīng)性T細(xì)胞清除或者誘導(dǎo)Treg的產(chǎn)生，維持耐受。但DC上表達(dá)的Aire功能和意義還不是很清楚，Aire是否也參與外周免疫耐受機(jī)制有待于探討。 基于以上背景，我們推測Aire可能通過影響DC細(xì)胞表型和成熟狀態(tài)，以及調(diào)節(jié)TRAs表達(dá)而參與外周免疫耐受維持。為此，，我們進(jìn)行了以下幾方面研究： 1.穩(wěn)定轉(zhuǎn)染Aire的DC2.4細(xì)胞的鑒定研究顯示我們前期建立的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染pEGFPC1/Aire（A1-1）、pEGFPC1（C1-1-1）質(zhì)粒的DC2.4細(xì)胞株中Aire和GFP表達(dá)良好，可以用于后續(xù)實驗。 2. Aire對DC2.4細(xì)胞表型的影響流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示某些模式識別受體的配體處理后，A1-1組較C1-1-1組CD80、CD40、CD11c、CD83、CD86和MHC-II類分子表達(dá)降低。表明Aire能夠使DC2.4維持不成熟狀態(tài)。 3. Aire對DC2.4細(xì)胞增殖能力的影響細(xì)胞增殖-毒性檢測測試各組細(xì)胞之間增殖能力無明顯差異。表明Aire對DC2.4細(xì)胞增殖能力無影響。 4. Aire對DC2.4細(xì)胞吞噬能力的影響熒光微球吞噬實驗結(jié)果顯示，A1-1組較C1-1-1組細(xì)胞吞噬能力增強(qiáng)。表明Aire能夠增強(qiáng)DC2.4吞噬功能，使其維持在不成熟狀態(tài)。 5. Aire對DC2.4細(xì)胞TRAs表達(dá)的影響聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)結(jié)果顯示，A1-1組細(xì)胞與C1-1-1組細(xì)胞相比，多種TRAs表達(dá)上調(diào)。提示Aire可能通過調(diào)節(jié)DC2.4上TRAs的表達(dá)參與外周耐受。 本研究發(fā)現(xiàn)Aire可能通過影響DC細(xì)胞表型及其吞噬能力使其維持在不成熟狀態(tài)，或者通過調(diào)控外周DC上TRAs的表達(dá)，參與外周免疫耐受的維持。這有利于揭示Aire在外周免疫系統(tǒng)表達(dá)的功能和意義，成為該領(lǐng)域的一創(chuàng)新點。
【關(guān)鍵詞】：Aire DC2.4 TRAs 免疫耐受
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R392
【目錄】：

• 提要4-5
• 中文摘要5-8
• ABSTRACT8-14
• 英文縮略詞14-16
• 引言16-18
• 文獻(xiàn)綜述18-28
• 一、自身免疫調(diào)節(jié)因子（Aire）的研究進(jìn)展18-21
• 1. Aire 突變與 APECED 病18-19
• 2. Aire 基因的表達(dá)和分布19-20
• 3. Aire 與免疫耐受20-21
• 二、樹突狀細(xì)胞的生物學(xué)特征和功能21-27
• 1. 樹突狀細(xì)胞的發(fā)育與分類21-23
• 2. 樹突狀細(xì)胞的功能23-27
• 三、Aire 與樹突狀細(xì)胞27-28
• 課題設(shè)計思路28-30
• 實驗研究30-64
• 一、材料30-36
• 1. 細(xì)胞系30
• 2. 細(xì)胞培養(yǎng)所需試劑和配制方法30-31
• 3. 流式細(xì)胞術(shù)使用抗體及試劑配制31-32
• 4. CCK-8 檢測所需試劑32
• 5. 熒光微球吞噬檢測所需試劑32
• 6. RNA 提取及 RT-PCR 所需試劑32-35
• 7. 主要儀器設(shè)備35-36
• 二、實驗方法36-44
• 1. 細(xì)胞培養(yǎng)36-37
• 2. 流式細(xì)胞術(shù)37
• 3. CCK-8 增殖實驗37-38
• 4. 熒光微球吞噬實驗38
• 5. 總 RNA 的提取38-39
• 6. RT（Reverse transcription，RT）反應(yīng)39
• 7. 普通 PCR 反應(yīng)39-43
• 8. RT-qPCR 反應(yīng)43-44
• 9. 結(jié)果統(tǒng)計學(xué)分析44
• 三、實驗結(jié)果44-57
• 四、討論57-61
• 五、結(jié)論61-62
• 六、有待于進(jìn)一步研究的問題62-64
• 參考文獻(xiàn)64-74
• 作者簡介及在學(xué)期間所取得的科研成果74-76
• 致謝76-78

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 顧春瑜,鄭磊,王前;樹突狀細(xì)胞治療自身免疫性疾病的機(jī)制及應(yīng)用研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代免疫學(xué);2005年03期

  本文關(guān)鍵詞：自身免疫調(diào)節(jié)因子對DC2.4細(xì)胞表型及功能影響的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：315412