不同途徑移植脂肪來(lái)源干細(xì)胞治療大鼠肝硬化模型的實(shí)驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2017-04-18 10:10
本文關(guān)鍵詞:不同途徑移植脂肪來(lái)源干細(xì)胞治療大鼠肝硬化模型的實(shí)驗(yàn)研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:比較不同途徑移植脂肪來(lái)源干細(xì)胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)治療肝硬化大鼠模型的療效。 方法:從健康SD雄性大鼠腹腔脂肪組織提取ADSCs,純化、培養(yǎng)并穩(wěn)定傳至第3代,經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)鑒定后,作為細(xì)胞移植治療肝硬化SD雄性大鼠的種子細(xì)胞。50只SD雄性大鼠,設(shè)正常對(duì)照組(G1,n=10),其余40只采用四氯化碳與橄欖油混合液腹腔注射法建立肝硬化SD雄性大鼠模型,并隨機(jī)分為:肝硬化模型對(duì)照組(G2,n=10)、門(mén)靜脈移植組(G3,n=10)、肝動(dòng)脈移植組(G4,n=10)、脾動(dòng)脈移植組(G5,n=10),其中G1又分為G1a(細(xì)胞移植前處死正常對(duì)照組,n=5)、G1b(細(xì)胞移植后處死正常對(duì)照組,n=5),G2又分為G2a(細(xì)胞移植前處死模型對(duì)照組,n=5)、G2b(細(xì)胞移植后處死模型對(duì)照組,n=5);造模8周后處死G1a及G2a大鼠,取出肝臟組織做病理檢查,觀察是否造模成功;造模成功后G3、G4及G5分別經(jīng)門(mén)靜脈、肝動(dòng)脈及脾動(dòng)脈途徑,注入ADSCs懸液1ml(細(xì)胞數(shù)約1x106)。分別于細(xì)胞移植前、移植后第4周、移植后第8周跟蹤檢測(cè)G1b、G2b、G3、G4及G5大鼠肝功能(包括ALB、TBIL、ALT、AST);細(xì)胞移植后第8周處死全部大鼠,取出肝臟組織做病理檢查并進(jìn)行肝纖維化組織學(xué)半定量計(jì)分。 結(jié)果:從脂肪組織中分離培養(yǎng)的第3代細(xì)胞高表達(dá)ADSCs表面標(biāo)記分子CD29(90.88%),CD44(96.24%),CD90(95.52%),極低表達(dá)造血細(xì)胞表面分子CD34(0.08%),CD45(0.34%);G1a與G2a進(jìn)行肝纖維化程度比較P0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;細(xì)胞移植4周后,與G2b比較,G3、G4、G53組大鼠肝功能均得到明顯改善,血清白蛋白顯著升高(P 0.05),轉(zhuǎn)氨酶、膽紅素顯著降低(P 0.05),肝纖維化程度顯著減輕(P 0.05);G3及G4大鼠肝功能改善及肝纖維化減輕程度優(yōu)于G5(P 0.05),前兩者之間無(wú)顯著性差異(P0.05)。 結(jié)論:1.貼壁篩選法能便捷地從脂肪組織中分離培養(yǎng)出高純度的ADSCs;2.CCl4與橄欖油混合液腹腔注射法可成功誘導(dǎo)出肝硬化模型;3.經(jīng)門(mén)靜脈、肝動(dòng)脈及脾動(dòng)脈三種途徑移植ADSCs治療肝硬化大鼠均可減輕肝纖維化程度,改善肝功能,門(mén)靜脈及肝動(dòng)脈移植途徑略?xún)?yōu)于脾動(dòng)脈移植途徑,,并且前兩者之間無(wú)明顯差異。
【關(guān)鍵詞】:肝硬化 脂肪來(lái)源干細(xì)胞 細(xì)胞移植 療效
【學(xué)位授予單位】:福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類(lèi)號(hào)】:R575.2;R-332
【目錄】:
- 英文縮略詞表4-5
- 中文摘要5-7
- Abstract7-9
- 前言9-12
- 第一部分:分離純化獲取高純度的脂肪來(lái)源干細(xì)胞12-17
- 1 材料與方法12-14
- 2 結(jié)果14-15
- 3 討論15-17
- 第二部分:肝硬化動(dòng)物模型的建立17-23
- 1 實(shí)驗(yàn)材料17
- 2 實(shí)驗(yàn)方法17-20
- 3 結(jié)果20-22
- 4 討論22-23
- 第三部分:脂肪來(lái)源干細(xì)胞移植對(duì)肝硬化大鼠肝臟的影響23-34
- 1 實(shí)驗(yàn)材料23-24
- 2 實(shí)驗(yàn)方法24-26
- 3 結(jié)果26-32
- 4 討論32-34
- 結(jié)論34-35
- 參考文獻(xiàn)35-41
- 致謝41-42
- 綜述42-49
- 參考文獻(xiàn)47-49
【參考文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條
1 孫建偉;滕學(xué)仁;張其亮;戴世友;;脂肪來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞的研究進(jìn)展[J];青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2011年06期
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本文關(guān)鍵詞:不同途徑移植脂肪來(lái)源干細(xì)胞治療大鼠肝硬化模型的實(shí)驗(yàn)研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號(hào):314627
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