目的：心臟向來被認為自出生后即是一個終末分化器官而缺乏自我更新與再生能力,但心臟干／祖細胞（cardiac stem/progenitor cells, CSC/CPCs）的發(fā)現(xiàn)顛覆了這一傳統(tǒng)觀念。迄今,已從人類等多種哺乳動物心臟中成功分離得到了CSC/CPCs。體內(nèi)、體外實驗表明,CSC/CPCs具有形成心肌細胞、血管內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞的能力,在維持心臟自穩(wěn)態(tài)和損傷修復中起關鍵作用。目前已報道了多種類型的CSC/CPCs,提示心臟組織中可能存在功能各異的CSC/CPCs.本文的目的是：利用實驗動物C57BL/6J小鼠,通過細胞生物學和分子生物學等手段,系統(tǒng)地研究CSC/CPCs細胞成分的構成,旨在篩選和鑒定出可能的新的CSC/CPCs亞型,為深入了解CSC/CPCs及其臨床應用奠定基礎。方法：1)小鼠心臟細胞的分離與制備：斷頸處死小鼠,取心臟,沖洗殘留血液,剪碎至1-2mm3,膠原酶Ⅱ消化25min,細胞篩過濾,制備成心臟單細胞懸液。2)細胞表型分析與分選：新鮮分離細胞與系列抗表面標志蛋白熒光抗體組合孵育后,通過流式細胞分析儀分析心臟細胞表型及含量,通過流式細胞分選儀分選純化潛在的... 

【文章來源】：廣西師范大學廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
第1章 前言
    1.1 心臟干/祖細胞的發(fā)現(xiàn)、類型及發(fā)育起源
        1.1.1 心臟干/祖細胞的發(fā)現(xiàn)
        1.1.2 心臟干/祖細胞的類型
        1.1.3 心臟干/祖細胞的發(fā)育起源
    1.2 心臟干/祖細胞的分離與鑒定方法
    1.3 心臟干/祖細胞在臨床應用的前景與存在問題
        1.3.1 心臟干/祖細胞在臨床應用的前景
        1.3.2 存在問題
第2章 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 主要實驗試劑與耗材
        2.1.3 主要試劑與溶液的配制
        2.1.4 儀器設備
    2.2 實驗方法
        2.2.1 小鼠心臟細胞的分離
        2.2.2 小鼠心臟細胞的流式分析
        2.2.3 小鼠心臟干細胞的流式分選
        2.2.4 細胞免疫熒光分析
        2.2.5 RT-PCR檢測基因表達
-CD45^-Sca-1⁺CD31⁺細胞的擴增培養(yǎng)">        2.2.6 小鼠Lin^-CD45^-Sca-1⁺CD31⁺細胞的擴增培養(yǎng)
        2.2.7 小鼠心臟細胞周期分析
        2.2.8 統(tǒng)計方法
第3章 實驗結果
    3.1 小鼠心臟干/祖細胞表型分析
        3.1.1 小鼠心臟干/祖細胞表型流式分析
        3.1.2 小鼠心臟干/祖細胞免疫熒光分析
    3.2 心臟特異性基因表達
-CD45^-Sca-1⁺CD31⁺細胞的體外擴增">    3.3 小鼠心臟Lin^-CD45^-Sca-1⁺CD31⁺細胞的體外擴增
-CD45^-Sca-1⁺CD31⁺細胞的細胞周期檢測">    3.4 小鼠心臟Lin^-CD45^-Sca-1⁺CD31⁺細胞的細胞周期檢測
第4章 討論
第5章 結論
參考文獻
英文縮寫一覽表
致謝



本文編號：3131781