目的：心臟向來被認(rèn)為自出生后即是一個終末分化器官而缺乏自我更新與再生能力,但心臟干／祖細(xì)胞（cardiac stem/progenitor cells, CSC/CPCs）的發(fā)現(xiàn)顛覆了這一傳統(tǒng)觀念。迄今,已從人類等多種哺乳動物心臟中成功分離得到了CSC/CPCs。體內(nèi)、體外實驗表明,CSC/CPCs具有形成心肌細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞的能力,在維持心臟自穩(wěn)態(tài)和損傷修復(fù)中起關(guān)鍵作用。目前已報道了多種類型的CSC/CPCs,提示心臟組織中可能存在功能各異的CSC/CPCs.本文的目的是：利用實驗動物C57BL/6J小鼠,通過細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)等手段,系統(tǒng)地研究CSC/CPCs細(xì)胞成分的構(gòu)成,旨在篩選和鑒定出可能的新的CSC/CPCs亞型,為深入了解CSC/CPCs及其臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。方法：1)小鼠心臟細(xì)胞的分離與制備：斷頸處死小鼠,取心臟,沖洗殘留血液,剪碎至1-2mm3,膠原酶Ⅱ消化25min,細(xì)胞篩過濾,制備成心臟單細(xì)胞懸液。2)細(xì)胞表型分析與分選：新鮮分離細(xì)胞與系列抗表面標(biāo)志蛋白熒光抗體組合孵育后,通過流式細(xì)胞分析儀分析心臟細(xì)胞表型及含量,通過流式細(xì)胞分選儀分選純化潛在的... 

【文章來源】：廣西師范大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
第1章 前言
    1.1 心臟干/祖細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)、類型及發(fā)育起源
        1.1.1 心臟干/祖細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)
        1.1.2 心臟干/祖細(xì)胞的類型
        1.1.3 心臟干/祖細(xì)胞的發(fā)育起源
    1.2 心臟干/祖細(xì)胞的分離與鑒定方法
    1.3 心臟干/祖細(xì)胞在臨床應(yīng)用的前景與存在問題
        1.3.1 心臟干/祖細(xì)胞在臨床應(yīng)用的前景
        1.3.2 存在問題
第2章 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 主要實驗試劑與耗材
        2.1.3 主要試劑與溶液的配制
        2.1.4 儀器設(shè)備
    2.2 實驗方法
        2.2.1 小鼠心臟細(xì)胞的分離
        2.2.2 小鼠心臟細(xì)胞的流式分析
        2.2.3 小鼠心臟干細(xì)胞的流式分選
        2.2.4 細(xì)胞免疫熒光分析
        2.2.5 RT-PCR檢測基因表達(dá)
-CD45^-Sca-1⁺CD31⁺細(xì)胞的擴增培養(yǎng)">        2.2.6 小鼠Lin^-CD45^-Sca-1⁺CD31⁺細(xì)胞的擴增培養(yǎng)
        2.2.7 小鼠心臟細(xì)胞周期分析
        2.2.8 統(tǒng)計方法
第3章 實驗結(jié)果
    3.1 小鼠心臟干/祖細(xì)胞表型分析
        3.1.1 小鼠心臟干/祖細(xì)胞表型流式分析
        3.1.2 小鼠心臟干/祖細(xì)胞免疫熒光分析
    3.2 心臟特異性基因表達(dá)
-CD45^-Sca-1⁺CD31⁺細(xì)胞的體外擴增">    3.3 小鼠心臟Lin^-CD45^-Sca-1⁺CD31⁺細(xì)胞的體外擴增
-CD45^-Sca-1⁺CD31⁺細(xì)胞的細(xì)胞周期檢測">    3.4 小鼠心臟Lin^-CD45^-Sca-1⁺CD31⁺細(xì)胞的細(xì)胞周期檢測
第4章 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
英文縮寫一覽表
致謝



本文編號：3131781