研究背景：剛地弓形蟲是一種廣泛寄生于人和動(dòng)物有核細(xì)胞內(nèi)的原蟲,可引起人獸共患弓形蟲病,嚴(yán)重威脅著人類健康和畜牧業(yè)生產(chǎn)。由于抗弓形蟲藥物不能達(dá)到理想的治療效果,研制安全有效的疫苗來(lái)預(yù)防和控制弓形蟲病成為當(dāng)前的研究熱點(diǎn)。研究目的：構(gòu)建編碼弓形蟲棒狀體蛋白R(shí)OP16和致密顆粒蛋白GRA7基因片段的DNA復(fù)合疫苗,以及能表達(dá)小鼠共刺激分子B7-2的重組質(zhì)粒作為分子佐劑,免疫接種昆明小鼠,評(píng)價(jià)疫苗的保護(hù)效果,以及分子佐劑的添加對(duì)疫苗誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答的影響,為優(yōu)化弓形蟲DNA疫苗免疫效果提供新思路。研究方法：使用PCR技術(shù)分別擴(kuò)增弓形蟲抗原ROP16和GRA7基因以及小鼠共刺激分子B7-2基因,經(jīng)TA克隆回收各目的片段,在測(cè)序正確后,亞克隆至真核表達(dá)載體pEGFP-C1中,構(gòu)建重組真核表達(dá)載體pEGFP-ROP16. pEGFP-GRA7、 pEGFP-ROP16-GRA7和pEGFP-B7-2;經(jīng)PCR、雙酶切和測(cè)序鑒定后,瞬時(shí)轉(zhuǎn)染HEK293T細(xì)胞,熒光顯微鏡觀察、SDS-PAGE和Western blotting分析檢測(cè)目的蛋白的表達(dá)情況；大量抽提重組質(zhì)粒用于制備弓形蟲DNA疫苗與基因佐劑B7... 

【文章來(lái)源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：74 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
主要符號(hào)說(shuō)明
前言
第一部分 弓形蟲DNA疫苗與B7-2基因佐劑的構(gòu)建
    一、材料
    二、方法
    三、結(jié)果
    四、討論
第二部分 弓形蟲DNA疫苗與B7-2基因佐劑的體外表達(dá)
    一、材料
    二、方法
    三、結(jié)果
    四、討論
第三部分 弓形蟲DNA疫苗及B7-2基因佐劑免疫小鼠實(shí)驗(yàn)
    一、材料
    二、方法
    三、結(jié)果
    四、討論
附圖
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
學(xué)位論文評(píng)閱及答辯情況表


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]外源基因轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞技術(shù)的研究進(jìn)展[J]. 余祖華,丁軻,程相朝,張春杰,李銀聚,吳庭才.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(21)



本文編號(hào)：3126999